测定T_4-RNA连接酶活力的新方法及tRNA单加反应条件的研究

本文对T_4-RNA连接酶催化tRNA单加pCp的反应条件进行了探讨。tRNA单加pCp的反应在37℃进行1小时,产率一般可达80%以上,条件适当时可达定量产率。利用这个反应建立了一个T_4-RNA连接酶活力测定的新方法。单加活力单位定义为,在标准条件下,37℃,60分钟,催化tRNA单加pCp产生1 pmole产物的酶量为1单加活力单位。1单加活力单位约相当于0.58焦磷酸交换单位。用该方法进行T_4-RNA连接酶制备过程的活力测定表明,该方法适合于纯酶制剂的活力测定也适合于粗酶制剂的活力测定。     

人类淋巴细胞干扰素的简易部分纯化方法

干扰素的纯化是一个重要的问题,对临床疗效与应用研究将有很大的推动作用。七十年代,特别是最近几年以来,干扰素的纯化研究取得了重大的进展,人的α及β型干扰素已基本上纯化了,但由于细胞(特别是人白细胞)来源困难以及单层细胞培养产量受限制,故干扰素仍然供不应求。1975年Strander等发现一株“人类淋巴细胞”(Namalwa)可以诱导产生干扰素,因为它来源方便,又可连续传代及大规模悬浮培养,还可在无血     

人类淋巴细胞干扰素的简易部分纯化方法

干扰素的纯化是一个重要的问题,对临床疗效与应用研究将有很大的推动作用。七十年代,特别是最近几年以来,干扰素的纯化研究取得了重大的进展,人的α及β型干扰素已基本上纯化了,但由于细胞(特别是人白细胞)来源困难以及单尾细胞培养产量受限制,故干扰素仍然供不应求。1975年Strander等发现一株“人类淋巴细胞”(Namalwa)     

2′—5′寡聚腺苷酸衍生物的研究——Ⅰ.以2′-5′寡聚腺苷酸作为T_4-RNA连接酶的供体和受体合成其衍生物的方法

在干扰素的功能表达中,2′-5′寡聚腺苷酸是一类重要的媒介物。本文研究了T_4-RNA连接酶的专一性及其用于2′-5′寡聚腺苷酸衍生物合成的可能性。1980年,我们曾发现2′-5′寡聚腺苷酸可以作为RNA连接酶的受体。本文对此作了进一步的研究,证实了T_4-RNA连接酶可以将pNp(N=A,G,C,U)、pCpUpC、pCpm_2~2G等供体连到2′-5′P_3A_3受体上去,生成各种相应产物。2′-5′磷酸二酯键连接的寡核苷酸能否作为T_4-RNA连接酶的供体,有人估计不大可能。本文也证实了T_4-RNA连接酶能将供体pA~(2′)p~(5′)A连接到CpUpC、UpCpCpA、Cpm′IpψpG等受体上面去。从而说明T_4-RNA连接酶也可使用2′-5′磷酸二酯键连接的寡核苷酸作为供体。应用T_4-RNA连接酶,可以合成既含有2′-5′又含有3′-5′磷酸二酯键的寡核苷酸。本工作还证明A~(2′)p~(5′)A也可以作为T_4-多核苷酸激酶的底物。     

干扰素的功能表达机制——Ⅵ.2'-5'三腺苷酸对烟草花叶病毒增殖的抑制作用

2'-5'三腺苷酸是否能抑制植物病毒在植物组织中的繁殖,过去无人报告过。本文证实2'-5'三腺苷酸能抑制烟草花叶病毒对离体的枯斑三生烟(Nicotina tabacum cv. samsum NN)叶片的侵染和在离体的普通烟(Nicotina tabacum)叶片内的繁殖,说明在植物中也存在2'-5'寡腺苷酸的作用体系,为植物干扰素的作用机理研究提供了新的依据。     

测定T_4-RNA连接酶活力的新方法及tRNA单加反应条件的研究

本文对T_4-RNA连接酶催化tRNA单加pCp的反应条件进行了探讨。tRNA单加pCp的反应在37℃进行1小时,产率一般可达80%以上,条件适当时可达定量产率。利用这个反应建立了一个T_4-RNA 连接酶活力测定的新方法。单加活力单位定义为,在标准条件下,37℃,60分钟,催化tRNA 单加pCp 产生lpmole 产物的酶量为1单加活力单位。1单加活力单位约相当于0.58焦磷酸交换单位。用该方法进行T_4-RNA 连接酶制备过程的活力测定表明,该方法适合于纯酶制剂的活力测定也适合于粗酶制剂的活力测定。     

油菜花叶病毒的提纯及其理化性质的研究

在浙江省油菜产区分离到的对油菜作物造成危害的油菜花叶病毒6号(YMV_6),从病毒形态、血清学、沉降常数和其他性质的研究都说明它是一种新的球形病毒,并具有较高的稳定性。为了对油菜病毒病的诊断和防治积累一些资料,进一步研究了其提纯和理化性质。前已用琼脂凝胶过滤法部分提纯了YMV_6,此法虽简而易行,但由此获得供理化性质研究用的提纯样品仍有困难。本文报导用聚乙二醇浓缩和差速离心法提纯YMV_6及其若干理化性质的研究结果。     

干扰素的功能表达机制——Ⅵ.2’-5’三腺苷酸对烟草花叶病毒增殖的抑制作用

2′-5′三腺苷酸是否能抑制植物病毒在植物组织中的繁殖,过去无人报告过。本文证实2′-5′三腺苷酸能抑制烟草花叶病毒对离体的枯斑三生烟(Nicotina tabacum cv.samsum NN)叶片的侵染和在离体的普通烟(Nicotina tabacum)叶片内的繁殖,说明在植物中也存在2′-5′寡腺苷酸的作用体系,为植物干扰素的作用机理研究提供了新的依据。