miRNA-191对前列腺癌的增殖、迁移侵袭能力的影响及其机制*

目的:观察miRNA-191对前列腺癌的增殖、迁移和侵袭能力的影响,并探讨其机制。方法:分别检测4种人前列癌细胞系(PC-3、DU-145、LNCa P、22RU1)及人正常前列腺细胞RWPE-2中miRNA-191的表达水平,并选择前列腺癌细胞系PC-3作为实验对象。将PC-3细胞分为3组:空白对照组(不转染)、miRNA-191 NC组(Inhibitor NC转染PC-3细胞)、miRNA-191 Inhibitor组(miRNA-191 Inhibitor转染PC-3细胞),每组设置3个复孔。采用RT-qPCR法检测PC-3细胞miRNA-191和PLCD1的mRNA表达水平;采用CCK8法检测PC-3细胞增殖水平;采用划痕实验和侵袭实验分别检测PC-3细胞迁移能力和侵袭能力;通过Targetscan靶基因预测网站,筛选PLCD1作为miRNA-191的靶向蛋白,并用双荧光素酶靶标实验验证;采用Western blot法检测PC-3细胞PLCD1的蛋白表达。结果:与RWPE-2细胞相比,人前列癌细胞中miNRA-191的表达水平显著升高(P＜0.05),且miRNA-191的表达水平在PC-3中较其他3种细胞系显著上调(P＜0.05)。抑制miRNA-191的表达水平后,PLCD1表达水平显著升高,PC-3细胞增殖能力受到抑制,迁移和侵袭能力较空白对照组和miRNA-191 NC组显著降低(P＜0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,PLCD1基因是miRNA-191的靶基因。结论:miRNA-191通过靶向PLCD1促进前列腺癌PC-3细胞的增殖、迁移和侵袭能力。     

不同临床分期肝癌患者抗AFPTh1和Tc1应答反应研究

目的:研究CD4(Th1)和CD8(Tc1)T细胞对肝癌患者的AFP的应答反应及其与临床特征的相关性,为其早期诊断与预防提供新策略。方法:研究对象为62例HCC患者,30例肝硬化患者及30例健康志愿者;重点分析CD4 T细胞和CD8 T细胞对HCC患者的AFP-衍生肽的反应;用胞内细胞因子检测法对IFN-γ进行检测。结果:抗AFP的Tc1反应检测阳性结果在对照组为28.5%,在OkudaⅠ期的肝癌患者中为25.0%,在Ⅱ或Ⅲ期的HCC患者中为31.6%。抗AFP Th1阳性反应仅在HCC患者中检测到。抗AFP Th1阳性反应在44.4%的Child-Pugh A级的HCC患者中检测到,但是在Child-Pugh B或C级中仅15.4%。Tc1型反应在Child-Pugh A级肝功的患者中为16.7%,在Child-Pugh B或C级患者中为46.2%。结论:抗AFP Th1应答更多出现在早期肝硬化的HCC的患者中,而抗AFP Tc1应答更可能出现在晚期肝硬化患者中,这些结论为抗肝癌疫苗药物设计提供了理论基础。     

三峡库区典型支流浮游细菌的生态分布及其影响因素

2013年夏季对三峡库区3条典型支流朱衣河、梅溪河、草堂河进行了采样调查,分析了浮游细菌丰度的分布特征及其与环境因子的关系。结果表明:浮游细菌丰度在调查的水体中存在明显空间差异,变化范围为0.53×105~10.55×105个·m L-1,平均值为2.71×105个·m L-1;平均细菌丰度从大到小依次为梅溪河、朱衣河、长江干流和草堂河;3条支流浮游细菌丰度垂向分布特征均表现为表层中层底层。相关性分析表明,溶解氧、p H、叶绿素a与浮游细菌丰度具有显著的相关性,为该水域浮游细菌丰度空间分布的主要限制因子。根据浮游细菌丰度,各调查水域均处于富营养状态。     

番茄SlARF2基因对叶片老化的影响

作为一类关键的生长素响应因子,ARFs在植物各组织器官的生理活动中起到多效性的作用。本研究结合表型分析,发现番茄SlARF2-RNAi植株叶片叶色鲜绿,侧生叶间小叶数量减少。通过调查,发现在衰老过程中,与对照植株叶片在老化时大规模快速萎黄死亡相比,SlARF2-RNAi植株叶片延缓了老化进程,作为衰老上调基因,SENU1和SENU5基因的延迟表达证明了这一点;在光合水平上,同一时期其叶片可维持相对较高的存活率,个体叶片光合速率,最大光化学效率,叶绿素残留量,Rubisco酶活性下降均慢于对照,同时RBCL,RBCS基因的下调相对滞后;在激素水平上,其叶片衰老机制可能独立于ZR途径,涉及IAA的调控。     

ArlR反应调节蛋白在表皮葡萄球菌不同生长期表达的检测

表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis,SE)是寄居在人体和黏膜表面的条件致病菌,因可在医疗植入材料表面形成生物膜(biofilm)而具有致病性。细菌双组分信号转导系统可调控生物膜形成,但其调控机制在SE中研究甚少。本课题对arlRS双组分信号转导系统的反应蛋白ArlR在细菌不同生长期的表达情况进行初步研究。首先构建ArlR原核表达质粒,用纯化重组ArlR免疫小鼠,获得多克隆抗-ArlR抗体,免疫Dot方法检测结果显示小鼠抗-ArlR血清效价>1∶100000。进一步采用蛋白免疫印迹法检测ArlR在SE1457野生株不同生长期中的表达水平,结果显示,ArlR在2h表达量较低,到4h达高峰,6～10h表达量较4h降低。利用反转录实时荧光定量聚合酶链反应检测arlR基因在不同生长期的转录水平,结果显示相应时间点ArlR蛋白表达水平与arlR基因转录水平一致。本研究结果为后期研究双组分信号转导系统arlRS对SE生物膜形成的影响奠定基础。     

缺氧诱导因子与肾细胞癌关系的研究进展

缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)对维持肿瘤细胞的能量代谢、肿瘤血管生成、促进肿瘤细胞增殖和转移起着重要作用,是肿瘤细胞低氧条件下产生的关键信号分子。本综述旨在总结前人研究,阐述HIF与肾癌细胞之间的内在关系。HIF成员是参与肾癌细胞对缺氧应答反应中的关键因子,并通过靶基因的调节,促进新生血管的生成,导致肿瘤生长。其中,HIF-1α及HIF-2α在促进新生血管的生成方面发挥着主要作用。HIF-1α及HIF-2α与VEGF密切相关,随着其的表达增高,VEGF在数量上及m RNA水平上均显著增高,显示其可通过调控VEGF参与肾癌血管生成,而HIF-2α转录激活VEGF m RNA的特异性较HIF-1α更强。HIF-3α可能存在的负性调控作用,其异构体-4的作用可能与HIF-lα的负性调节有关,其可以阻止HIF-lα与下游靶基因的缺氧反应元件(hypoxia response elements,HRE)结合,同时可在转录水平抑制HIF-lα。HIF在未来可能有成为肾细胞癌治疗的靶点。     

葡萄球菌呼吸相关双组分系统SrrAB研究进展

葡萄球菌呼吸相关双组分系统SrrAB能感应外界O2浓度,并将信号传至胞内,调控下游基因的转录,以应对外界环境的变化。有研究表明,金黄色葡萄球菌SrrAB在有氧条件下促进毒力因子的表达,抑制生物膜的形成;在厌氧条件下抑制毒力因子的表达,促进生物膜的形成。另外,在有氧及厌氧条件下,金黄色葡萄球菌SrrAB调控生长代谢的途径也不一致。表皮葡萄球菌中也存在类似的双组分系统SrrAB,且与金黄色葡萄球菌SrrAB具有较高同源性,但目前尚不清楚两者在生长代谢及毒力调控方面的异同。结合课题组研究工作,简要综述葡萄球菌SrrAB的调控机制,着重比较其在有氧及厌氧条件下的调控差异,这对临床诊治葡萄球菌引起的感染具有一定的借鉴意义。     

实验性肾功能衰竭大鼠血浆中分子物质总量和自由基的变化研究

用腺嘌呤复制动物性慢性肾功能衰竭（ＣＲＦ）模型。观察大鼠血浆血尿素氮（ＢｕＮ）、血肌酐（Ｃｒ）、血红蛋白（Ｈｂ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和中分子物质（ＭＭＳ）总量的变化。结果表明,ＣＲＦ大鼠血浆ＢｕＮ、Ｃｒ和ＭＭＳ总量明显升高（Ｐ〈０．０１）、Ｈｂ和ＳＯＤ含量显著降低（Ｐ〈０．０１）。提示ＣＲＦ大鼠ＭＭＳ总量升高、ＳＯＤ活性降低。     

锁骨远端锁定钢板治疗NeerⅡ型锁骨远端骨折的疗效及对肩关节功能恢复的影响

目的:探讨锁骨远端锁定钢板治疗NeerⅡ型锁骨远端骨折的疗效及对肩关节功能恢复的影响。方法:回顾性分析2015年7月～2017年10月期间四川省泸州市中医医院收治的107例NeerⅡ型锁骨远端骨折患者的临床资料,其中行锁骨钩钢板治疗的53例患者作为对照组,行锁骨远端锁定钢板治疗的54例患者作为研究组。比较两组术后1年的临床疗效,记录两组患者手术时间、术中出血量、手术切口长度、骨折愈合时间,比较两组术前、术后5周、术后10周肩关节功能情况,记录并发症发生情况。结果:研究组术后1年优良率为90.74%(49/54),显著高于对照组患者的64.15%(34/53)(P0.05)。两组患者手术时间、术中出血量、手术切口长度以及骨折愈合时间比较差异无统计学意义(P0.05)。两组患者术后5周、术后10周肩关节功能、肩关节活动度、X线评定、患侧肩部疼痛、关节稳定性评分高于术前,且术后10周高于术后5周(P0.05);研究组术后5周、术后10周上述指标评分高于对照组(P0.05)。研究组术后并发症总发生率为7.41%(4/54),低于对照组的32.08%(17/53)(P0.05)。结论:锁骨远端锁定钢板治疗NeerⅡ型锁骨远端骨折安全有效,可有效改善患者肩关节功能,促进术后恢复。     

莫达非尼对睡眠剥夺条件下工作记忆的影响

目的:观察在睡眠剥夺条件下莫达非尼对工作记忆的改善作用,为此药在我军的应用策略提供实验依据。方法:18名健康男性志愿者,在两次睡眠剥夺实验中交叉服用莫达非尼和安慰剂,睡眠剥夺时间从第一天的07:00到第3d的07:00,并于第二天的0:00、12:00和第三天的0:00分别服用莫达非尼100mg或安慰剂。采用随机双盲设计给药,并在第一天的07:00、第二天的02:00和14:00以及第三天的02:00和07:00安排工作记忆测验。结果:工作记忆测验中,两组的反应时和正确率均有统计学差异(P<0.01),莫达非尼组的反应时要快于安慰剂组,正确率也要高于安慰剂组。莫达非尼对工作记忆的改善效果随着睡眠剥夺时间的延长而更趋明显。结论:莫达非尼对睡眠剥夺条件下个体的工作记忆有改善作用,是较为理想的睡眠剥夺对抗药物。