地衣芽胞杆菌BL63516对抗生素诱导的 菌群紊乱小鼠肠黏膜屏障功能的影响

目的探索地衣芽胞杆菌BL63516对肠道菌群和肠黏膜屏障功能调节的效果和可能机制,为临床疾病的治疗提供新思路。方法采用健康清洁级雄性BALB/C小鼠30只构建动物模型,将小鼠分为3组(每组10只),分别为对照组(CON组)、头孢曲松钠灌胃组(CS组)和地衣芽胞杆菌BL63516治疗组(BL组),除CON组外其余两组小鼠给予300 mg/mL头孢曲松钠0.2 mL,2次/d灌服8 d,短期大量服用抗生素以建立肠道菌群紊乱模型。第9天起BL组小鼠给予地衣芽胞杆菌干预连续8 d。第17天摘眼球处死小鼠,取血、结肠、粪便样本。ELISA方法检测小鼠血清及肝脏组织中的细胞因子及LPS水平。PCR-变性梯度凝胶电泳方法及16S rRNA高通量测序测定小鼠肠道菌群结构。结果地衣芽胞杆菌干预后小鼠血清LPS水平较模型组显著降低,屏障功能改善。且地衣芽胞杆菌治疗后BL组小鼠肠道菌群丰富度和多样性显著升高,菌群结构有所改变。结论实验结果提示地衣芽胞杆菌BL63516可以有效改善抗生素所致的肠道菌群失调,对肠屏障功能有一定调节作用。     

猪CAPN1基因部分外显子及3′UTR区的SNPs检测

以野猪、民猪和大白猪为研究对象, 根据网上公布的序列设计了7对引物, 采用测序、PCR-SSCP和PCR-RFLP方法对CAPN1基因的部分外显子和3′UTR区进行了单核苷酸多态性检测和基因型分析, 探讨CAPN1基因多态性与瘦肉率和嫩度的关系。研究发现11个SNPs, 其中5个位于外显子, 4个位于内含子, 2个位于3′UTR区, 外显子中的突变有一处是错义突变, 导致了蛋白质多肽链第260位氨基酸发生了M/V的替代。群体遗传学分析表明, 在所检测的各多态位点上, 野猪、民猪、大白猪3个品种间不同基因型的分布都存在着极显著的差异(P<0.01), 而野猪和民猪之间各基因型的分布差异不显著(P>0.05), 民猪和大白猪之间各基因型的分布存在着极显著的差异(P<0.01)。结合品种特性分析表明, P4、P6引物和3′ UTR区HinfⅠ位点所检测的不同基因型和瘦肉率具有一定的相关性。     

母乳糖复合物对新生儿肠道菌群的影响

母乳是新生儿最理想的营养来源。母乳喂养不仅维持婴儿的发育,也促进有益的肠道微生物增殖。母乳中的糖复合物,包括游离的低聚糖、糖蛋白和糖脂,因在肠道健康和菌群调节方面起着重要作用而被越来越多的人所重视。这些糖类物质不仅能预防传染病,也可作为益生元调节肠道微生态。新生儿出生时肠道是不成熟的,复杂的母乳成分确保了肠道微环境成熟。婴儿的肠道微生物群的构成在出生后会发生连续变化。出生后的细菌定植是肠道发育和免疫系统成熟的必要条件。本文将母乳中糖物质及对婴儿肠道菌群的影响作一综述。     

猪AMPD1基因的克隆与变异位点分析

腺苷一磷酸脱氨酶基因(AMPD1)在嘌呤代谢过程中起着重要的作用。AMPD1基因主要在骨骼肌中高水平表达, 与肌肉中肌苷酸代谢有关。还发现AMPD1与猪的胴体性状有关。对AMPD1基因CDS进行了克隆、测序, 获得2 195 bp的CDS序列, 并利用PCR-SSCP方法对其进行分子扫描, 寻找多态位点, 分析不同基因型在不同猪种间的分布规律。χ2独立性检验表明, 民猪、大白猪、杜洛克间不同基因型的分布存在着极显著的差异(P<0.01)。     

肠道菌群在中药代谢中的作用

近年来,中药在疾病防治方面所发挥的巨大作用受到了广泛认可。科学合理地解释中药的作用机制将有助于提高其利用价值。越来越多的证据表明肠道菌群在中药治疗中起着至关重要的作用,是打开我国中医药宝库的一把钥匙。肠道菌群在中药代谢过程中发挥着复杂的作用:一方面,人类肠道菌群通过编码多种活性酶,促进了中药组分中的非碳水化合物小分子与碳水化合物在肠道中的代谢过程;另一方面,经肠道菌群代谢转化后产生的中药产物具有多种药理作用。因此,在未来中药研究中应更多地考虑肠道微生态因素,这有助于为中药的药理作用机制研究奠定新的科学基础。     

地衣芽胞杆菌BL63516对 DSS诱导的小鼠结肠炎的调节作用

目的探索地衣芽胞杆菌BL63516对DSS诱导的小鼠结肠炎的缓解作用和可能机制,为临床疾病的治疗提供新思路。方法用BALB/C雌性小鼠构建动物模型,将30只小鼠分为CON组、DSS组和BL组,每组10只,除CON组外,其余两组均给予3%(m/v)DSS自由饮用,并给予地衣芽胞杆菌BL63516干预。第8天摘眼球处死小鼠,取血、结肠、粪便样本。以ELISA法检测小鼠血清和结肠研磨液中的细胞因子。用PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)方法分析小鼠肠道菌群结构。结果 DSS组小鼠血清IL-10及结肠MPO水平均与CON组有明显差异,地衣芽胞杆菌干预后有不同程度改变;使用非加权成对算术平均算法(UPGMA)对PCR-DGGE图谱中各泳道条带类型聚类分析结果显示各组小鼠结肠菌群结构具有显著差异,其中BL组增加双歧杆菌属Bifidobacterium saguini及疣微菌门的噬黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila)数量。结论地衣芽胞杆菌可以有效改善DSS诱导的结肠炎症状,其作用机制与肠屏障功能和肠道菌群的调节有密切关系。     

中药材蛤蚧的特异性PCR鉴定

以线粒体Cytb、COI、12SrRNA、16SrRNA基因序列为基础,探讨特异性PCR技术鉴定蛤蚧及伪品的可行性。本研究以所扩增的16条COI序列为引物设计依据序列设计了1对位点特异性引物COISF,COISR,同时从Gen-Bank上下载30条序列,设计了CytbSF,CytbSR;16S rRNASF,16S rRNASR;12S rRNASF,12S rRNASR另外3对位点特异性引物,因此共用4对位点特异性引物分别扩增蛤蚧及伪品实验样本。结果表明在复性温度为65℃时,4对引物都出现了理想的结果,即蛤蚧正品出现了扩增条带,而伪品没有扩增条带。同时对市售的蛤蚧商品进行了检测,在所供的7号标本中,有4号为蛤蚧正品,其余3号为蛤蚧伪品。本研究所设计的位点特异性引物可快捷、准确的鉴定蛤蚧及伪品,且在药检工作中具有极大的应用前景。     

东北地区分泌型和非分泌型母亲哺乳期 HMO差异及其对子代肠道菌群的影响

目的分析中国东北地区母亲分泌型和非分泌型基因的分布及其在哺乳期母乳中低聚糖(HMO)种类和含量的差异,探讨这些差异对于子代肠道微生态的影响。方法收集56例母亲在哺乳期第6天母乳样本及其母乳喂养的新生儿在同一天的粪便样本;以质谱分析20种主要HMO的含量;以变性梯度凝胶电泳检测两组新生儿肠道菌群差异。结果所选取的56例母亲其分泌型与非分泌型的比例为43∶13,其中分泌型母亲的岩藻糖基化HMO含量显著高于非分泌型母亲,并且两组新生儿肠道菌群结构也有明显差异。结论不同基因型母亲在哺乳期HMO存在明显差异,而这一差异显著影响了其子代肠道菌群结构。     

基于ITS2高通量测序 研究强直性脊柱炎患者肠道真菌特征

目的探究强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者肠道真菌菌群的多样性特征,分析健康人群与AS患者肠道真菌的结构差异。方法收集17例健康人群新鲜粪便样本和24例AS患者新鲜粪便样本,分别称为HC组和AS组,提取两组粪便样本总DNA;根据真菌ITS2区设计引物进行扩增,利用Illumina HiSeq PE250平台进行ITS2高通量测序;测序结果经过Reads拼接,OTUs(operational taxonomic units)聚类,Alpha和主成分分析,物种组成统计,显著性差异分析,最终得到样本物种信息。结果对肠道真菌菌群进行Alpha分析,各多样性指标中,shannon和observed_species指数差异有统计学意义(P0.05),其余指数差异均无统计学意义,故不能明确两组间多样性的差异。主成分分析提示差异显著。对肠道真菌结构进行分析,门的水平分析显示,担子菌门(Basidiomycota)在HC组和AS组中差异显著,接合菌门(Zygomycota)在两组间差异极显著;纲和属的水平分析显示,Ascomycota_unidentified纲在两组中差异显著,伞菌纲(Agaricomycetes)、Incertae_sedis_10纲、Orbiliomycetes纲差异极显著。Agaricomycetes_unidentified_1属、Amphinema属、Geoglossales_unidentified_1属、腔块菌属(Hydnotrya)差异显著,鹅膏菌属(Amanita)和锁瑚菌属(Clavulina)差异极显著。结论本实验证实了在AS患者中存在肠道真菌菌群失调,其特征是生物多样性和结构的改变,揭示肠道真菌也可能在AS发病中发挥作用。     

益生菌联合肠内营养对比单用肠内营养在改善胃癌手术患者预后效果的Meta分析

目的对益生菌联合肠内营养对比单用肠内营养在改善胃癌手术患者预后效果进行Meta分析,以得出综合评价结论。方法利用PubMed、Cochrane、Embase、CNKI、维普和万方数据库进行文献检索,搜集有关益生菌联合肠内营养对比单用肠内营养改善胃癌手术患者预后效果的随机对照试验,由2名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,应用RevMan 5.3分析软件进行Meta分析。结果最终纳入8个临床随机对照试验,共552例患者。Meta分析显示,与仅用肠内营养相比,益生菌联合肠内营养能更有效地降低胃癌患者术后血清内毒素水平[MD=-15.94,95%CI(-27.40,-4.49),P=0.006]、血清TNF-α水平[MD=-9.25,95%CI(-14.51,-3.99),P0.001]、术后腹泻发生率[OR=0.41,95%CI(0.20,0.83),P=0.010];缩短术后住院天数[MD=-1.62,95%CI(-2.78,-0.46),P=0.006];提高淋巴细胞[MD=0.24,95%CI(0.07,0.42),P=0.007],粪便双歧杆菌[MD=1.94,95%CI(0.71,3.17),P=0.002]和乳杆菌[MD=2.21,95%CI(0.69,3.74),P=0.004]计数水平。益生菌还有增加胃癌患者术后血清IgG[MD=2.37,95%CI(-0.32,5.06),P=0.080]和IgM[MD=0.73,95%CI(-0.35,1.82),P=0.190]水平的趋势,但差异无统计学意义。结论当前证据表明,益生菌联合肠内营养治疗胃癌术后临床疗效确切,远优于仅用肠内营养,可以增强胃癌患者术后的机体免疫力、降低感染和腹泻的发生率、减轻全身炎性反应、维持肠道微生态的平衡,促进患者康复。受纳入研究数量和质量限制,上述结论尚待更多高质量研究予以验证。