PEG修饰牛血红蛋白的计算机模拟研究

对αβ二聚牛血红蛋白晶体结构的分析和氨基酸钱基溶剂可及表面积的计算表明,牛血红蛋白表面Ｌｙｓ上的氨基适合进行聚乙二醇（ＰＥＧ）修饰,对其修饰不会影响携氧能力,在此基础上设计了连接物连接ＰＥＧ和牛血红蛋白。分子模拟研究结果显示ＰＥＧ修饰牛血红蛋白产物是无免疫原性的。     

视黄醇结合蛋白L35和Q98位点突变及其对与视黄醇结合的影响

根据视黄醇结合蛋白 (RBP)晶体结构和计算机模拟对拟突变位点所作出的结构预测 ,筛选出 2个可能对RBP结合能力有影响的氨基酸位点 .利用定点突变技术分别将 35位亮氨酸突变为能引入较大构象变化的甘氨酸 ,将 98位谷氨酰胺突变为亲水、带正电的精氨酸 .将突变后的RBP基因转入表达宿主菌获得表达后 ,对突变体蛋白实现了变性条件下的分离纯化 .复性后与视黄醇的荧光增强饱和滴定试验表明 ,35位突变为甘氨酸后对RBP结合能力没有产生明显的影响 ,但 98位突变为精氨酸后 ,则显著的提高了与视黄醇的结合能力 ,说明 98位是影响RBP与视黄醇结合和解离的重要位点 .