大鼠输精管平滑肌细胞的体外培养及形态学特征(英文）

建立大鼠输精管平滑肌细胞的培养方法。取大鼠输精管,剥离外膜和内膜,用组织块法进行体外培养。用抗α-SMA(anti α-smooth muscle actin)免疫组化染色的方法鉴定培养的细胞。结果显示,在倒置显微镜下观察细胞形态多样,表现为长梭形或星形,细胞伸出突起互相接触,彼此融合,部分区域细胞多层重叠,部分区域细胞单层高低起伏,呈"峰-谷"状生长。免疫组化染色鉴定呈阳性反应,用该方法所分离、培养的输精管平滑肌细胞纯度达99%以上。应用组织块法培养大鼠输精管平滑肌细胞,操作简单,结果稳定。     

环磷酰胺诱导小鼠血小板减少症模型的建立(英文）

比较由环磷酰胺两种不同给药方式诱导小鼠血小板减少症模型的效果,并对效果较稳定的一种给药方式进行最佳造模剂量摸索,以期确定一个造模效果较好,毒副作用较低,利于观察治疗药物疗效的血小板减少症模型。模型A组,第1天尾静脉注射环磷酰胺200 mg/kg,然后连续6 d,每天1次以维持剂量30 mg/kg腹腔注射环磷酰胺。模型B组,按150 mg/kg皮下注射环磷酰胺,每天1次,连续3 d。结果显示模型B组造模效果较好,故以模型B组给药方法进行剂量摸索实验。由第7天的血小板计数可知环磷酰胺低（100 mg/kg）、中（120 mg/kg）、高（140 mg/kg）剂量均可引起血小板减少症,而低剂量组与其他组比较有高效低毒的特点,更有利于观察治疗药物的作用,可用于具有升血小板作用药物的药效学研究     

细菌生物膜形成与慢性难愈性创面相关性的研究进展

感染是影响慢性难愈性创面愈合最常见的原因,由于多种细菌混合感染、耐药性产生、生物膜的形成使其治疗成为难题.其中,细菌生物膜形成是导致创面的难以愈合的重要因素之一.本文就慢性难愈合创面中细菌生物膜的形成机制、特征、生态学、对伤口愈合的影响以及可能的治疗对策等作一综述.     

耐甲氧西林葡萄球菌PBP2a的质粒克隆与构建

目的克隆并构建耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）青霉素结合蛋白2a（PBP2a）全长及转肽酶区的原核表达质粒。方法登录基因文库查找获得mecA基因的编码序列,应用PCR技术扩增获得DNA片段,将此基因片段插入PET-32a载体,同时酶切鉴定阳性克隆,DNA序列测定验证序列正确性。结果 PCR扩增获得了mecA基因全长及转肽酶区DNA片段,成功插入到原核表达载体PET32a,双酶切鉴定及DNA序列测定证实插入片段正确。结论成功构建了PBP2a全长及转肽酶区片段表达质粒,为该蛋白的纯化表达和疫苗研究奠定了基础。     

环磷酰胺诱导小鼠血小板减少症模型的建立(英文)

比较由环磷酰胺两种不同给药方式诱导小鼠血小板减少症模型的效果,并对效果较稳定的一种给药方式进行最佳造模剂量摸索,以期确定一个造模效果较好,毒副作用较低,利于观察治疗药物疗效的血小板减少症模型.模型A组,第1天尾静脉注射环磷酰胺200 mg/kg,然后连续6 d,每天1次以维持剂量30 mg/kg腹腔注射环磷酰胺.模型B组,按150 mg/kg皮下注射环磷酰胺,每天1次,连续3 d.结果显示模型B组造模效果较好,故以模型B组给药方法进行剂量摸索实验.由第7天的血小板计数可知环磷酰胺低(100 mg/kg)、中(120mg/kg)、高(140 mg/kg)剂量均可引起血小板减少症,而低剂量组与其他组比较有高效低毒的特点,更有利于观察治疗药物的作用,可用于具有升血小板作用药物的药效学研究.     

重组人β-干扰素的表达、纯化与鉴定

经 1 5L发酵罐制备重组人β 干扰素 (recombinanthumanIFN β,rhIFN β)。以免疫亲和层析方法纯化发酵液中rhIFN β并与蓝谱亲和层析纯化法比较 ,探索快速高效纯化rhIFN β的方法。以ELISA测定rhIFN β含量及经免疫亲和层析纯化的rhIFN β中鼠IgG残留量 ;以PAGE法鉴定rhIFN β的分子量 ;以CPEI法测定rhIFN β的生物活性。取 2L发酵液经免疫亲和层析纯化后 ,得到 3.0 3mgrhIFN β ;经蓝谱亲和层析纯化后 ,得到2 .6 5mg ;分子量为 2 2kD ;沉淀带灰度值分别为 96 .2 %和 95 .1 % ;CPEI比活性分别为 1 .4 3× 1 0 7IU/mg和 1 .6 3× 1 0 7IU/mg ;经免疫亲和层析后纯化物中鼠IgG残留量小于 5 0 μg/L。实验结果表明 ,所采用的免疫亲和层析和蓝谱亲和层析均可快速高效地从酵母菌发酵上清液中分离纯化rhIFN β基因产物     

酵母菌表达倍菲隆发酵工艺研究

目的 :为了探索用酵母菌表达乙型干扰素 (倍菲隆 )的大批生产的发酵工艺流程及优化的重要参数。选用 1 5L不锈钢发酵罐作为乙型干扰素发酵工艺研究系统。方法 :探索了种细胞密度对初始发酵期 (甘油利用期 )的影响 ,启动甘油补充期的溶解氧浓度 ,诱导目的蛋白表达时添加甲醇的速率条件控制 ,pH对酵母菌生长与蛋白表达的影响以及发酵时间对乙型干扰素表达量影响等重要发酵工艺参数。结果 :接种高密度的种菌 (OD60 0为 9)时酵母菌增殖快 ,湿细胞重量于1 8h即达到 1 5 7g L。当DO恢复至 67%时即开始补充甘油可使酵母菌在 5h内增殖达到 2 1 9g L。添加甲醇速率从 2 %(甲醇终浓度为 0 0 3%)开始 ,逐步增加 ,在 2 4h内达到 33%的添加速率 (甲醇终浓度为 0 5 %)。甲醇诱导前pH为 6时最有利于酵母菌生长 ,在蛋白表达时期 ,控制发酵罐内pH值在 3 0 ,可得最高蛋白表达量。发酵 70h乙型干扰素表达量达到高峰。结论 :接种高密度种菌可促进工程菌生长 ,当DO恢复至 67%时开始补充甘油可加快酵母菌生长 ,在诱导期中缓慢添加甲醇并维持发酵罐pH为 3 0 ,发酵 70h可获得最佳蛋白生产量。     

基于阴道微生态对比研究宫颈HPV16与HPV52单一亚型感染特征

目的 对比分析宫颈人乳头瘤病毒（HPV）16与52单一亚型感染阴道微生态特征,探讨HPV16与52单一亚型阳性患者阴道微生态差异的临床意义,探求治疗不同亚型HPV感染的方法。方法 将2020年2月至2023年1月在遂宁市第一人民医院妇产科门诊常规宫颈癌筛查的女性（20～65岁）作为研究对象,纳入符合标准的HPV16型、HPV52型、HPV阴性研究对象各165例作为参试者,HPV16、52型均为单一亚型感染,HPV阴性组作为对照组,3组参试者一般资料对比差异无统计学意义（P<0.05）。3组研究对象均行HPV分型、液基薄层细胞学（TCT）、阴道微生态检测,对比分析3组参试者阴道微生态相关指标（pH、过氧化氢、唾液酸苷酶、白细胞酯酶、葡萄糖醛酸酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶、白细胞、杆菌、球菌、线索细胞、滴虫、清洁度）以及TCT情况。结果 （1）3组参试者的阴道内pH情况,HPV16型组（5.01±0.31）显著高于HPV52型组（4.71±0.42）(F=56.26,P<0.05),也较对照组（4.68±0.43）明显异常（F=47.10,P<0.05）;而HPV52型组阴道内...