掺入胆固醇和阴离子磷脂对阿霉素免疫脂质体性能的影响

本文研究了胆固醇和阴离子磷脂的掺入对阿霉素—磷脂酰乙醇胺免疫脂质体包裹效力及其在PBS缓俄冲液和在50%血清中的稳定性的影响,并对这种影响可能的机理进行了讨论.阴离子磷脂PG和DPG的掺入使ADM免疫脂质体包裹ADM的效力大大增加,使ADM与PE的克分子比从(0.08—0.8)%增加到75%,其中DPG比PG更有效.掺入胆固醇可以明显提高ADM脂质体在缓冲液和在血清中的稳定性,但使脂质体包裹ADM的效力下降.通过脂质的选择和制备条件的摸索,我们成功地用超声法制备了包裹抗癌药(ADM),表面带有抗人胃癌细胞M85单克隆抗体3HII的小单层脂质体(SUV),其起脂质份是PE:PG:Chol:ADM(4:2:2:1),脂质体内的ADM与PE的克分子比为17—25%.经电镜观察,脂质体直径在60—80nm范围内,大以比较均一.这种脂质体在PBS缓冲液中于室温下保存12天,仍然能够保持其包裹药的70%;在50%的血清中,37℃1小时,能够保持其包裹药的80%.     

CD4^＋T细胞在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的通过大鼠心肌缺血再灌注损伤的动物模型,分析CD4^＋T细胞在心肌组织损伤中的作用。方法结扎大鼠冠状动脉左前降支45min,随后恢复再灌的方法,制作缺血再灌损伤的动物模型,随机分为再灌注0、2、6、9、12h组及相应的对照组。II导联心电图及TTC确定模型,组织病理学观察心肌细胞的损伤情况,免疫荧光染色计数浸润的炎性细胞,半定量PCR进一步验证各型T细胞的表达。结果心肌的梗死面积与心肌缺血再灌时间成正相关,至观察结束未出现峰值;组织中浸润的中型粒细胞和T细胞分别在2h和12h有峰值出现,但CD4^＋T/CD3^＋T的比率几乎保持不变;观察所见CD4^＋T细胞是组织中存在最多的T细胞。结论大鼠缺血再灌注损伤中,心肌组织中浸润的CD4^＋T细胞作为主要的效应细胞,参与了持续稳定的心肌损伤过程。     

脂质体包裹增加了阿霉素的体内抑瘤作用

我们用超声法制备了内部包裹阿霉素,表面带有抗人胃癌细胞M85的单克隆抗体3Hll的阿霉素靶向脂质体,研究了这些脂质体经腹腔注射入荷瘤裸鼠之后的组织分布和抑瘤效果.结果表明,靶向脂质体组阿霉素在肿瘤组织的含量明显高于游离阿霉素组,而在心脏中的含量,前者则比后者有所降低。分别在接种M85细胞后5天、13天和25天,按4mg/kg的剂量注射阿霉素靶向脂质体和游离阿霉素,在40天时观察结果。我们发现,无论在动物存活数、肿瘤发生率还是在肿瘤生长速度方面,阿霉素靶向脂质体的抑瘤能力都明显地优于游离阿霉素。     

大鼠心肌缺血再灌注损伤中诱导CD4＋T细胞募集的趋化因子的表达

目的检测大鼠心肌缺血再灌注中诱导CD4＋T细胞趋化的趋化因子的表达。方法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤的实验动物模型,冠状动脉左前降支结扎45 min后恢复再灌,在不同的再灌注时间点0、2、6、9、12 h获取心脏组织（每组4只）,相应时间点的假手术组作为对照。RT-PCR检测趋化CD4＋T细胞的趋化因子的表达;免疫荧光检测趋化因子诱导的CD4＋T细胞的募集;组织学评价心肌细胞的损伤。结果诱导CD4＋T细胞募集的趋化因子的表达在再灌注2 h即迅速增高,随后出现下降。其中,CXCL-10（IP-10）的表达高峰出现在2 h,与其共用同一受体CXCR3的其它两个趋化因子CXCL9（Mig）和CXCL11（I-TAC）的表达,分别在再灌注12 h和9 h出现另一高峰。受趋化因子的诱导,组织中浸润的CD4＋T细胞逐渐增多;心肌的缺血再灌注损伤也随之不断加重。结论诱导CD4＋T细胞募集的趋化因子,通过CD4＋T细胞介导的免疫损伤作用,最终导致了心肌的梗死。     

掺入胆固醇和阴离子磷脂对阿霉素免疫脂质体性能的影响

本文研究了胆固醇和阴离子磷脂的掺入对阿霉素—磷脂酰乙醇胺免疫脂质体包裹效力及其在PBS缓俄冲液和在50%血清中的稳定性的影响,并对这种影响可能的机理进行了讨论.阴离子磷脂PG和DPG的掺入使ADM免疫脂质体包裹ADM的效力大大增加,使ADM与PE的克分子比从(0.08—0.8)%增加到75%,其中DPG比PG更有效.掺入胆固醇可以明显提高ADM脂质体在缓冲液和在血清中的稳定性,但使脂质体包裹ADM的效力下降.通过脂质的选择和制备条件的摸索,我们成功地用超声法制备了包裹抗癌药(ADM),表面带有抗人胃癌细胞M85单克隆抗体3HII的小单层脂质体(SUV),其起脂质份是PE:PG:Chol:ADM(4:2:2:1),脂质体内的ADM与PE的克分子比为17—25%.经电镜观察,脂质体直径在60—80nm范围内,大以比较均一.这种脂质体在PBS缓冲液中于室温下保存12天,仍然能够保持其包裹药的70%;在50%的血清中,37℃1小时,能够保持其包裹药的80%.     

趋化因子CXCL10在心肌细胞及巨噬细胞中的表达机制

目的探讨心肌缺血-再灌注损伤中趋化因子CXCL10的产生机制。方法分别用LPS、H2O2、Ca2+载体A23187刺激原代培养的心肌细胞、骨髓来源的巨噬细胞或二者混合培养的共培养系统后,ELISA检测培养基上清中的趋化因子CXCL10和促炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量,观察其表达动力学。结果①大剂量(10μg/mL)的LPS刺激心肌细胞主要产生趋化因子CXCL10;刺激骨髓来源巨噬细胞主要产生促炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α。②H2 O2、Ca2+通道激活剂并不能使产生趋化因子CXCL10或IL-1β、IL-6、TNF-α这些促炎性细胞因子。③骨髓来源的巨噬细胞促进心肌细胞表达趋化因子CXCL10;心肌细胞促进骨髓来源的巨噬细胞表达IL-6、TNF-α,但抑制IL-1β的表达。结论心肌细胞是心肌缺血-再灌注损伤中CXCL10潜在的细胞来源;CXCL10的表达,主要依赖于TLR4的激活。