喉癌术后痰的微生物学及药敏分析

目的指导喉癌术后合理选用抗生素．减少肺内感染。方法取喉癌术后气管内的痰进行细菌培养和药敏试验,得出细菌分离率的排序和耐药率。结果喉癌术后气管内痰的细菌培养G^-菌较G^ 多,G^-菌对阿米卡星敏感,对头孢类敏感性不一,对环丙沙星耐药;G^ 菌中肺炎链球菌对氨苄西林、阿莫西林-棒酸和环丙沙星中度敏感,对头孢类敏感;金黄色葡萄球菌仅对氯霉素、亚胺培南敏感。结论由于细菌的耐药性不一样,最好依据细菌学选择敏感抗菌素;当病原菌不明时,则根据痰培养细菌排序的流行趋势选择抗菌素。     

幽门螺旋杆菌重组尿素酶B亚基的纯化及其免疫学性质的研究

目的:幽门螺旋杆菌(Hp)尿素酶是Hp重要的定制因子和致病因子,Hp尿素酶活性位点位于Hp尿素酶B亚基(UreB),研发基于UreB的Hp疫苗是一种很有前景的防治Hp感染的策略。方法:主要利用基因克隆技术从幽门螺旋杆菌标准菌株SS1(Hp SS1)获得Hp尿素酶B亚基基因,并构建含有重组Hp尿素酶B亚基(rUreB)基因的重组表达载体pET-rUreB及其重组菌株;重组菌株经蛋白表达和优化后,利用Ni-NTP镍离子亲和层析和DEAE Sepharose FF阴离子交换层析纯化重组尿素酶B亚基(rUreB),并进一步通过腹腔注射免疫BALB/c小鼠,研究rUreB的免疫学性质。结果:通过基因克隆技术成功获得了Hp尿素酶B亚基基因,并成功构建了重组表达载体pET-rUreB及其重组菌株BL21(DE3)/pET-rUreB,经蛋白表达优化及纯化,可获得高纯度(96.5%)的重组蛋白rUreB。重组蛋白rUreB辅以弗氏佐剂腹腔注射免疫BALB/c小鼠,经间接ELISA鉴定小鼠能够产生针对天然Hp尿素酶和UreB的高滴度特异性抗体,且能够显著性抑制Hp尿素酶的活性。结论:重组Hp尿素酶B亚基能够在大肠杆菌表达系统中获得较高水平的表达,具有较高的免疫学特异性,其抗体能够有效抑制Hp尿素酶活性。为研究基于尿素酶的防治Hp感染的Hp疫苗奠定了一定的实验基础。