人SPRED2 基因重组腺病毒载体的制备及其对K562 细胞

目的:构建携带SPRED2的质粒载体与重组腺病毒载体,并观察其在K562细胞的表达及对ERK信号通路的作用,为Spred2在造血细胞中的作用的研究奠定基础。方法:以HepG2细胞cDNA为模板,RT-PCR克隆SPRED2全长CDS序列,并亚克隆到pCDNA3.0和pshuttle-CMV质粒载体,构建携带SPRED2的真核表达载体pCDNA3.0-Spred2与穿梭载体pshuttle-CMV-Spred2;将线性化pshuttle-CMV-Spred2与腺病毒骨架质粒Adf11p在感受态细胞BJ5183中进行同源重组,产生重组质粒Adf11p-Spred2;后者经线性化后转染至HEK293细胞进行病毒包装;在HEK293细胞扩增病毒颗粒,以CsCl密度梯度离心法进行纯化,TCID50法测定病毒滴度;将病毒颗粒以100MOI感染K562细胞,Western blot检测Spred2过表达情况及Spred2对细胞ERK的影响。结果:经酶切、DNA测序、Western blot检测等方法鉴定,证明pCDNA3.0-Spred2与Adf11p-Spred2携带Spred2序列正确,能够在HEK293细胞、K562细胞正确表达,Spred2过表达能够显著抑制K562细胞ERK活性。结论:成功构建对K562细胞有高感染效率的SPRED2重组腺病毒载体,且Spred2对K562细胞ERK信号通路有显著抑制作用。     

低氧条件下白藜芦醇对HepG2细胞增殖及自噬的调节作用及初步机制

白藜芦醇（resveratrol）是天然存在于葡萄、红酒及花生等中的一种多酚类化合物,具有抗癌、抗氧化等作用．目前针对resveratrol抗癌作用的研究大多侧重于常氧状态,而对于更接近体内肿瘤生长环境即低氧状态的研究相对匮乏．本文以肝癌细胞HepG2为模型,探讨了低氧（1％02）条件下resveratrol抑癌的相关功能和机制．结果表明,在低氧状态下resveratrol不仅抑制HepG2细胞的活性,而且也促进了低氧诱导的自噬保护机制;进一步研究发现,去乙酰化酶Sirtl和鞘氨醇激酶SPKl也参与上述过程．本文初步揭示了低氧状态下癌细胞对resveratrol敏感性低的可能机制,更加明确resveratrol在实体瘤中的抗癌作用,并为resveratrol的药物研发提供了借鉴．     

超氧化物歧化酶和Bcl-2在实验性精索静脉曲张大鼠睾丸中的变化

目的:建立大鼠实验性精索静脉曲张(experimental varicocele EV)的模式,测量睾丸中超氧化物歧化酶(superoxide dismutaseSOD)活性和Bcl-2的表达。方法:将40只雄性青春期Wistar大鼠随机分为EV8周组和12周组(各12只)和相应的假手术对照组2组(各8只),通过部分结扎左肾静脉建立大鼠EV模型,分别于术后8周、12周处死动物,测左侧精索静脉直径,用比色法测SOD 活力,免疫组化法测Bcl-2的表达。结果:成功建立了EV型,与相应的对照组相比左侧精索静脉直径明显增大(P<0.01)。光学显微镜下观察睾丸组织,发现大鼠睾丸生精上皮退变,曲细精管萎缩,间质水肿和精子发育阻滞。EV组双侧睾丸的SOD活性显著低于相应的对照组(P<0.01),左侧睾丸比右侧睾丸更低,但无明显统计学意义(P>0.05)。EV组双侧睾丸间质细胞中Bcl-2的染色指数与相应的对照组相比均显著降低(P<0.01),左侧睾丸染色指数比右侧睾丸下降更明显(P<0.01),EV12周组与 EV8周组相比,EV12周组染色指数更低(P<0.05)。SOD活性与Bcl-2的染色指数在0.01水平有显著相...     

基于RS和GIS的毛乌素沙地植被盖度定量估测

选取毛乌素沙地东北部的伊金霍洛旗为研究区域,以少量野外定位调查数据与其对应的遥感信息和GIS信息为基础,利用岭估计分析方法,对植被盖度估测模型及其影响因子进行系统研究.结果表明,植被盖度除受NDVI影响外,还与其他遥感信息紧密相关,岭估计方法明显地改善了最小二乘估计的缺陷,克服了变量间由于存在复共线性关系对求解待定参数所造成的不利影响,提高了估测精度.建立了以像元为单位的植被盖度估测模型,其模型检验精度达98.7%.此外,还建立了区域性植被盖度地理信息系统,实现了研究区域内任意一点(像元)或任意土地单元植被盖度的查询、更新及自动制图.     

小兴安岭森林采伐对河川径流的影响

采用大流域径流测定与小流域对比实验相结合的方法,利用35年的径流和森林资源变化资料,对小兴安岭林区森林采伐后河川径流发生的一系列变化进行了全面系统的研究.结果表明,森林采伐后营造落叶松人工林,造林初期10年内,河川径流量表现为增加趋势;随着落叶松人工林的不断生长和郁闭成林,采伐流域的径流量逐渐减少,并趋于采伐前水平或低于采伐前水平（与对照流域相比）.河川年径流量与年降水量、森林采伐面积及更新造林面积密切相关.森林采伐面积与年径流量呈正相关,森林采伐能增加河川年径流量;更新造林面积与年径流量呈负相关,更新造林能减少年径流量.而森林采伐对洪峰流量和融雪径流量均有显著增加作用.     

神经生长因子受体Trka在糖尿病大鼠膀胱和腰骶背根神经节的表达

目的研究糖尿病大鼠膀胱组织及背根神经节中神经生长因子受体Trka的表达变化及意义。方法建立糖尿病大鼠模型20只,以15只正常大鼠为对照,应用免疫组化方法,分别检测大鼠膀胱组织及背根神经节中Trka的表达情况。结果无论是在膀胱组织还是在背根神经节中,糖尿病组Trka的表达均低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论神经生长因子受体Trka的表达降低与糖尿病膀胱病变的发生有关。