乙型肝炎病毒逆转录酶区基因序列准种与变异特点

乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)P基因编码产物从功能上分为末端蛋白(1～178aa)、间隔区(179～336aa)、逆转录酶区(337～682aa)和RNA酶H区(683～816aa),各区有相应的生物学功能;逆转录酶区包含S基因主蛋白编码区.近年来的研究提出HBV感染者体内存在有准种[1,2]的假说.我们以逆转录酶区序列为研究靶区域,应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增慢性乙型肝炎患者血清中的靶基因序列,随机选择克隆测序,比较其结果,证明了HBV准种特点的存在,并发现多种基因突变形式.     

大叶白蜡的离体培养与快速繁殖

1植物名称大叶白蜡(FraxinusrhynchophyllaHance),又名美国白蜡、亚生(维吾尔语)、花曲柳。2材料类别带腋芽的茎段。3培养条件芽诱导培养基:(1)1/2MS+6-BA0.5mg·L-1(单位下同)+NAA0.05;增殖培养基:(2)MS+6-BA0.2+KT0.8+IBA0.2;生根诱导培养基:(3)MS+IBA0.5。以上培养基均添加0.65%琼脂粉、30g·L-1蔗糖,pH5.8。培养温度(25±2)℃,光照强度为30～40μmol·m-2·s-1,光照16h·d-1。4生长与分化情况4.1芽的诱导4月份剪取大叶白蜡生长幼嫩的枝条,剪去叶片,流水冲洗30min。置于超净工作台上,用75%乙醇处理30s,无菌水冲洗2～3次,再用0…     

应用噬菌体随机肽库技术筛选丙肝病毒NS3抗原模拟表位

以抗-HCV NS3的单克隆抗体作为固相筛选分子,对人工合成的噬菌体随机12肽库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"的筛选过程,随机挑取42个克隆,经噬菌 体酶联免疫吸附法(ELISA)鉴定并进行交叉反应实验以及竞争抑制性结合实验,最后对所选克隆进行DNA序列分析,以确定HCV NS3抗原的模拟表位.经噬菌体富集后,从随机筛选的 42个克隆中得到11个阳性克隆,确定氨基酸序列XXIXXXXMSNXX为HCV NS3的模拟表位.我们用噬菌体12肽库成功筛选得到HCV NS3的模拟表位,为开展用HCV模拟表位探索HCV的防治研究创造了条件.