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菌落PCR在大规模基因组测序中的应用 总被引:22,自引:0,他引:22
一种利用菌落直接PCR扩增DNA并用于测序的实验方法.通过对引物的设计和菌液浓度控制,使PCR反应后的内容物对测序干扰减到最小.与传统的测序过程比较,它省去了抽提模板DNA一步,节省了大量时间和实验成本.另外此方法可对BAC亚克隆库构建时由连接转化过程中导致的假阳性起筛选和鉴定作用.采用该法成功测定了籼稻(Oryza sativa indica)广陆矮4号的L3173号BAC DNA全长序列(约100 kb),GenBank登录号:AL512542. 相似文献
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在根瘤菌中 ,结瘤基因的表达受到转录水平上复杂的调控。通过体外转录、引物延伸等一系列实验在豌豆根瘤菌中发现一个与结瘤基因nodF的启动子相互重叠 ,但转录方向相反的启动子 ,该启动子特异起始一个新的RNA分子———px2 的转录。Northern印迹确定 px2 的长度为 0 .72kb ,并且证明 px2 的转录是依赖于根瘤菌的与E .coliσ70 同源的sigma因子。px2的转录启始位点在体内、体外均相同 ,它坐落在结瘤基因顺式元件的“nodbox”内。进一步发现 px2 的体外转录受到一个参与结瘤基因调控的蛋白———Px的抑制。有结果显示 ,px2 影响结瘤基因的表达 相似文献
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生物固氮的发现和研究已有足足一百余年的历史了。由于生物固氮有其潜在的、极为重要的经济价值而一直为人们所重视。在七十年代,国际上曾有不少人抱着这样的希望:生物固氮也许在短期内会在应用上有所突破。那时,许多科学家,特别是许多优秀的分子遗传学家渗透到这个研究领域。不料,经过十多年的艰苦研究,发现生物固氮体系远远比原来想象的 相似文献
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BacteriainthegeneraofRhizobium,Bradyrhizobium,AzorhizobiumandSinorhizobiumelicitrootorstemnodulesontheirspecifichostplantsandfixatmosphericnitrogentherein.Nodulationgenes(nod,nolandnoe)playimportantrolesinthesuccessfulestablishmentofthesymbiosis,yetmost… 相似文献
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几种生物的基因组分析 总被引:1,自引:0,他引:1
几种生物的基因组分析赵文会洪国藩(中国科学院国家基因研究中心,上海200233)关键词基因组分析E.coliM.jannaschi酵母基因组研究是当今世界生物学中投资最大的两大热点领域之一(另一个是艾滋病研究)。迄今已完成多种生物的基因组测序(表1)... 相似文献
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洪国藩 《生物化学与生物物理进展》1979,(1)
对聚丙烯酰胺凝胶电泳的浓缩效应作了研究。建立了电流密度梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳(CDGGE)。CDGGE 不仅在电泳开始时,而且在电泳过程中对被分离的样品有压缩作用,从而提高了分辨率。作者用CDGGE 法将面包酵母混合转移核糖核酸分成20条带,并对其中的一些带作了鉴定。 相似文献