基于PCR的cDNA基因克隆技术研究进展

RT-PCR、锚定PCR、cDNA末端快速扩增（RACE）、step out RACE、DDRT-PCR、cDNA代表性差异分析、抑制性削减杂交等都是建立在PCR基础之上的cDNA分子克隆技术。本介绍各种技术的优缺点、应用以及与同类技术进行比较,这些技术现在已经成功应用于大量EST的分离、cDNA库的构建、编码产物未知的差别表达基因的分离以及全长cDNA基因序列的克隆等方面。     

SSH和"越轨"RACE分子克隆技术

SSH和“越轨”RACE(step out RACE)均为创建干PCR抑制作用基础上的CDNA基因克隆新技术。SSH具有真阳性率高、不同丰度的mRNA都能被有效分离等优点,“越轨”RACE具有高灵敏度、低背景、操作简便等长处,这两项技术现已经成功应用干大量EST的分离、减数CDNA库的构建、差别表达新基因的分离,以及CDNA全长基因序列的克隆等方面。