基于对JNK信号通路的调控探讨齐墩果酸对食管癌细胞凋亡的影响

摘要 目的：本研究通过对JNK信号通路的调控来探讨齐墩果酸( oleanolic acid,OA) 对食管癌细胞凋亡的影响。方法：对食管癌细胞EC109进行培养,以MTT法分析不同浓度齐墩果酸对食管癌细胞EC109的生长抑制作用,采用流式细胞术考察齐墩果酸对EC109细胞凋亡的影响,以Western blot实验检测JNK通路蛋白的表达情况。结果：不同浓度齐墩果酸作用Eca109细胞48 h后,均有显著的抑制作用（P<0.05）,且随着齐墩果酸浓度的增加,对Eca109的抑制作用逐渐增强。与对照组相比,各浓度OA组的Eca109细胞的凋亡率分别为8.03±0.34 %,12.82±0.28 %,19.34±0.79 %和32.21±0.81 %,均显著增加（P<0.05）,且随着OA浓度的增加,细胞凋亡率显著升高。与对照组相比,不同浓度OA组的P-JNK、Bak、Bax表达量均显著升高（P<0.05）,Bcl-2表达量显著降低（P<0.05）,JNK表达量无显著差异（P>0.05）,对OA组(1.2 mmol/L)相比,OA组(2.4 mmol/L) Bak、Bax表达量均显著升高（P<0.05）,Bcl-2表达量显著降低（P<0.05）,P-JNK、JNK表达量无显著差异（P>0.05）。结论：齐墩果酸能通过对JNK信号通路的调控促进食管癌细胞的凋亡,且随着浓度的增强,细胞凋亡率显著升高。     

NF-κB1基因干扰质粒的构建及其对DEV增殖的影响

[目的]探究NF-κB对DEV增殖是否有影响。[方法]以NF-κB1基因作为靶基因,设计并构建4个不同p GPU6/GFP/Neo shRNA表达载体,通过荧光显微镜法观察转染后细胞荧光密度和RT-PCR检测转染细胞NF-κB1基因转录水平以筛选最佳干扰质粒,分3种不同组别进行干扰实验后,以荧光定量PCR法检测DEV-NP基因表达变化。[结果]所构建的重组质粒p GPU6/GFP/Neo-NF-κB1-2对细胞NF-κB1基因的干扰效率最高,可达78. 77%;除先感染后干扰组对DEV增殖影响不大外,先干扰后感染组与同时感染和干扰组均对DEV增殖呈现出一定的抑制作用,其中先干扰后感染组在第72 h时的沉默效率最高,可达78%,而同时感染和干扰组于第48 h时的沉默效率最高,可达82%。[结论]RNA干扰下调NF-κB1基因会抑制DEV增殖。     

云南昆明地区4种蝌蚪形态比较研究

作者比较了采自昆明东北郊的滇蛙Rana pleuraden、昭觉林蛙Rana chaochioensis、华西蟾蜍eufo andrewsi和云南小狭口蛙Calluella yunnanensis的蝌蚪。结果表明,4种蝌蚪口部形态、尾形、出水孔和肛管开口位置在第Ⅰ、Ⅱ期稳定。滇蛙蝌蚪唇齿式为Ⅰ：1—1／1—1：Ⅱ;有一出水孔位于体左侧,肛管开口于下尾鳍基部右侧,尾末端尖、短。昭觉林蛙蝌蚪唇齿式为Ⅰ：2—2／1—1：Ⅲ;有一出水孔位于体左侧,肛管开口于下尾鳍基部右侧,尾末端为尖、短。华西蟾蜍蝌蚪唇齿式为Ⅱ／Ⅲ;有一出水孔位于体左侧,肛管开口于下尾鳍基部正中,尾末端钝,几乎呈半圆。云南小狭口蛙蝌蚪无唇齿及唇乳突,口位于吻端,口缘膜状,口部马蹄形,出水孔位于腹部后端中线处;肛管开口于下尾鳍基部正中;尾末端尖,细长。肛管在下尾鳍基部的开口位置可作为蝌蚪分类特征。     

极致化医疗服务的理论研究与实践探索

初步探讨了极致化医疗服务满足现实需求、引领行业发展的理论和实践价值,提出了其“坚持以人为本、突出全面质量、追求无限标准”3个方面的理论内涵,并从文化熏陶、教育引导、制度规范和监督约束4个方面探讨了其实现路径。     

球结膜下注射不同浓度消旋山莨菪碱液对雏鸡形觉剥夺近视眼轴的影响

目的研究不同浓度消旋山莨菪碱液对雏鸡形觉剥夺近视眼轴的影响。方法 3日龄雏鸡60只右眼遮盖半透明塑料膜,随机分为6组:给药组4组,不同浓度消旋山莨菪碱液(0.05%组,0.1%组,1%组,2.5%组),隔天行右眼球结膜下注射,每次给药50μL,共4次;对照组为生理盐水组,注射方法同给药组;单纯形觉剥夺组,不做干预。8 d后观察药物对眼轴的影响。结果 2.5%浓度组右眼与左眼眼轴差异显著小于低浓度组及对照组(P<0.05),给药组未发现组织病理毒性。结论消旋山莨菪碱对雏鸡近视眼轴增长有一定抑制作用,无毒副作用,有一定浓度依赖性。     

以减毒沙门氏菌为载体山羊痘病毒P32基因真核表达载体的构建与鉴定

目的：构建以减毒沙门氏菌为载体山羊痘病毒P32基因真核表达载体。方法：以pMD-18T-P32/LD为模板,通过聚合酶链反应（PCR）扩增出山羊痘病毒P32基因片段,定向插入真核表达载体pVAX1中,再重组表达质粒pVAX1-P32/LD。转入DH5α,再转入减毒鼠伤寒沙门氏菌,通过双酶切、PCR及插入片段序列测序对质粒进行鉴定。结果：携带山羊痘病毒P32基因片段的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗S7207/pVAX1-P32/LD已成功构建。结论：为山羊痘基因工程疫苗的研制及诊断方法的建立奠定了基础。     

植物内生放线菌的分离方法

植物内生放线菌是一类大有开发潜力的微生物资源。目前使用的分离条件和技术尚不完善,容易被外源菌和内生真菌、细菌污染,因此内生放线菌尤其是稀有内生放线菌的选择性分离技术至少是今后一段时间研究的重点。介绍了植物内生放线菌选择性分离方法并提出值得研究的问题。     

101例肺炎死亡病例分析

目的：探讨成年肺炎死亡病例的特征,以提高救治率。方法：利用医院住院病案管理系统软件及人工收集我院2008年1月1日-2011年4月26日的全部成年肺炎死亡病例临床资料,共计101例,对其进行回顾性分析。结果：101例观察病例中男性共计71例（占70_30％）,女性共计30例（占29．70％）,大于65岁者共计95例（占94．06％）,44-58岁者共计6例（占5．9％）,平均年龄80．30岁。单侧肺部病变22例（占21．78％）,双侧肺部病变79例（占78．22％）,观察病例均伴有多种基础病及并发症,并且多数病例存在多种致病茵感染及多重耐药茵感染。结论：成年肺炎死亡的发生与患者年龄（65岁以上）、性别（男性）、双侧肺部病变、基础病及并发症、多种致病茵感染及多重耐药茵感染等因素密切相关。     

pCR3．1—bvLDH-C4′的构建及在体内外的表达

精子特异性乳酸脱氢酶(LDH—C4)在精子的运动和存活等生理活动中起着重要的作用。研究表明,LDH—C4接种鼠、兔等能够降低动物的生育率。通过RT—PER方法从布氏田鼠睾丸总RNA中克隆出编码抗原决定簇的LDH—C4基因片断;采用T—A克隆的方法将其插入到pCR3．1载体中构建重组载体pCR3．1—bvLDH—C4′,测序结果表明克隆的基因片断与已知小鼠相应片断有83％的序列同源。通过质脂体法转染HeLa细胞,RT—PCR证实其可在mRNA水平有效表达;通过肌肉接种BAIB/c小鼠,RT-PER结果表明其在体内也可有效表达。