免疫组化染色阳性对照的设立、制作与应用

目的探讨如何设立免疫组化染色的阳性对照,使操作更简单、结果可靠和方法实用。方法选取阑尾、乳腺和扁桃体等不同类型的组织,通过HE切片观察,选取合适相应抗原表达的区域,将组织切成0.3cm*0.3cm大小,重新作石蜡包埋,连续切片厚4μm,贴在待检查组织旁边作为对照,进行CK、CK19、SMA、CD20、CD3、ER、PR、等36种抗体的免疫组化染色,并观察组织中抗原的表达是否正确,筛选出适合作为免疫组化染色阳性对照的组织。结果乳腺皮肤和扁桃体组织仅部分抗体染色阳性,而阑尾组织中有多种抗原表达,34种抗体染色均呈阳性,染色阳性的其他相对区域的组织细胞呈阴性染色。结论阑尾组织可作为大多抗体染色的阳性对照和阴性对照。方法简单,操作方便,节省抗体,适用于临床批量工作,对免疫组化的染色过程起到很好的质控作用。但对于某些抗体染色,如ER、PR等抗体的阳性对照,则应选用相应的组织如含正常导管上皮乳腺导管癌组织作对照。     

改良乙酰胆碱酯酶染色在快速病理诊断先天性巨结肠中的应用

目的对乙酰胆碱酯酶组织化学染色方法进行改良,使染色操作更加快速和简单,以便能用于术中先天性巨结肠的快速病理诊断。方法以传统的亚铁氰化铜法为基础并进行改良,将底物碘化乙酰硫代胆碱的浓度增加10倍,高浓度的底物加快渗透组织,缩短孵育染色时间。在孵育染色后用DAB(二氨基联苯胺)处理,使阳性产物更加稳定,颜色由棕色加深为棕黑色,不容易退色,更易于观察。结果先天性巨结肠症的直肠黏膜固有层腺体之间可见增生的胆碱能纤维,乙酰胆碱酯酶阳性呈棕黑色,而正常直肠黏膜固有层腺体之间没有增生的胆碱能纤维,乙酰胆碱酯酶染色为阴性。与传统的亚铁氰化铜法相比较,本改良法染色特异性无明显差异,但孵育染色时间从原来的60~120min缩短至10~15min。结论本改良法使乙酰胆碱酯酶染色操作比传统方法更加快速和简单,结果稳定可靠,可用于手术中先天性巨结肠的快速病理诊断,对临床医生制定先天性巨结肠的治疗方案具有十分重要的意义。