年龄增长对GRK5基因缺陷小鼠海马内肿胀轴突丛形成与积累的影响

目的研究G蛋白偶联受体（G protein-coupled receptors）激酶5（GPCR kinase-5,GRK5）基因缺陷和老化交互作用对阿尔茨海默病（Alzheimer＇s disease,AD）早期的病理改变-海马内肿胀轴突丛（swollen axonal clusters,SACs）出现和积累的影响。方法选取5、6、7、9、12～13、18—19月龄雌性GRK5基因敲除小鼠（GRK5 Knockout,GRK5KO）作为观察对象,另选取年龄匹配的雌性野生型（wild type,WT）小鼠为对照,每个年龄段GRK5KO和WT小鼠各4只。用抗人神经原纤维缠结（neurofibrillary tangles,NFTs）特异性抗体的免疫荧光染色方法观察海马内SACs的变化。结果所有小鼠随着年龄增长,海马内SACs逐渐增加;GRKSKO小鼠组海马内NFT^＋ SACs数量较WT型小鼠组显著增加（P〈0．01）;双因素方差分析显示遗传性GRK5基因缺陷和老化双因素对海马内NFT^＋SACs的影响有显著协同效应（P〈0．01）。结论在促进早期AD病理发生的过程中,GRK5缺陷和老化双因素共同加剧了雌性GRKSKO小鼠海马内SACs的形成与积累。     

性别因素对GRK5缺陷小鼠AD样病理改变的影响

目的性别在阿尔茨海默病（AD）的发病中是一不容忽视的危险因素。研究揭示G蛋白偶联受体（GPCRs）激酶5（GRK5）缺陷引起的相关GPCRs脱敏障碍在早期AD病理发生机制中具有重要作用,而且GRK5敲除／缺陷（GRK5KO）小鼠表现出早期AD样病理特征和短时期记忆功能损害。但这种病理变化在不同性别间有无差异,目前不得而知。本研究旨在探讨GRK5KO小鼠出现的AD样病理变化是否存在性别差异。方法用Campbell-Switzer银染来观察老龄GRK5KO小鼠海马内肿胀轴突的病理变化;Western blotting检测海马内突触蛋白水平和数个胆碱能标记物的变化;同时对上述改变在不同性别间进行深入比较。结果雌性GRK5KO小鼠海马内肿胀轴突数目比雄性小鼠高出2．5倍;而且雌性GRK5KO小鼠海马内数个突触蛋白水平比雄性小鼠显著减低。双因素方差分析显示性别和GRK5缺陷双因素之间呈显著协同效应,共同促进了雌性GRK5KO小鼠轴突缺陷和部分突触蛋白水平的降低。另外,胆碱能标记物检测显示,雌性GRK5KO小鼠毒蕈碱受体2、4以及乙酰胆碱酯酶水平较雄性小鼠显著增高。结论在促进早期AD病理发生的过程中,GRK5缺陷和性别双因素表现出协同效应,共同加剧了雌性GRK5KO小鼠脑内的AD样病理改变。     

2型糖尿病合并急性脑梗死TCD微栓子监测及炎性因子检测的意义

目的探讨TCD微栓子（MEs）监测及超敏C反应蛋白和白介素-6检测在2型糖尿病合并急性脑梗死发病中的意义。方法序贯收集2011年1月至2012年6月在我院神经内科住院的首次前循环脑梗死患者90例,根据是否合并2型糖尿病分为糖尿病合并脑梗死组（观察组）45例,单纯急性脑梗死组45例（脑梗死组）,另外,随机收集同期我院内分泌科首次住院的单纯2型糖尿病患者45例（糖尿病组）,监测三组患者病灶侧大脑中动脉（MCA）微栓子阳性率及微栓子数目,血清超敏c反应蛋白及白介素-6值,分析三组患者中微栓子及相关炎性因子检测的意义。结果观察组脑血管微栓子监测数量和Hs—CRP血清检测水平较脑梗死组和糖尿病组均显著增高（P〈O．05和P〈0．01）。观察组和脑梗死组血清白介素-6检测水平与糖尿病组相比显著增高（P〈0．05）,但观察组与脑梗死组相比无统计学意义（P〉0．05）。结论糖尿病合并急性脑梗死患者微栓子数目和血清Hs—CRP、白介素-6水平明显增高,提示糖尿病脑梗死患者血管内炎性斑块不稳定程度增加,再发卒中的风险明显增高。     

丹参酮对阿尔茨海默病样大鼠海马内白介素1β和白介素6 mRNA表达的影响

目的探讨丹参酮(tanshinone, Tan)抗β-淀粉样肽神经元毒性的分子机制.方法应用凝聚态β-淀粉样肽1-40片段(amyloid β-peptide1-40, Aβ1-40)在大鼠双侧海马齿状回背侧细胞带进行微量注射以建立拟人类阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)样动物模型;采用明暗箱被动回避法、穿梭法测试学习记忆功能;用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定海马内白介素1β(IL-1β)和白介素6(IL-6)mRNA含量;以丹参酮(tanshinone, Tan)(50mg/ kg)对Aβ1-40处理的大鼠连续灌胃14d,观察其干预效果.结果海马内注射Aβ1-40 14 d后,经行为学检测大鼠学习记忆功能明显减退,海马内IL-1β和IL-6 mRNA表达均显著高于对照组(P< 0.01);Tan(50mg/ kg)连续灌胃14 d能显著抑制大鼠学习记忆功能的减退和上述病理变化.结论 Tan对Aβ1-40诱导的大鼠学习记忆功能障碍具有显著改善作用,并能有效地抑制其海马内IL-1β和IL-6 mRNA的升高,这可能为Tan治疗AD样大鼠的分子机制.     

体内GRK5缺陷加剧Tg2576小鼠海马内的病理改变

目的研究体内G蛋白偶联受体激酶5（GRK5）缺陷是否会加剧转瑞典突变淀粉样肽前体蛋白基因（TgAPPsw,Tg2576）小鼠海马内的病理改变。方法将具有C57／BL6遗传背景的GRK5缺陷／敲除（GRK5KO）杂合子与具有相同遗传背景的Tg2576小鼠杂交,以产生野生型（WT）、GRK5KO杂合子型、转淀粉样肽前体蛋白（APP）基因型以及转基因＆敲除（Double）型4种基因型小鼠。用免疫荧光（IF）染色方法来观察这些动物海马内肿胀轴突丛（SACs）和A8沉积量变化。结果IF染色结果定量分析显示,Tg2576小鼠被灭活一个拷贝的GRK5基因后导致海马内SACs和A8沉积量均显著增加。结论体内GRK5缺陷加剧了AD动物海马内的病理改变。