大瓶螺碱性磷酸酶的分离纯化及部分性质研究

大瓶螺碱性磷酸酶的分离纯化及部分性质研究李清漪,曾和期（西南师范大学生物系,重庆６３０７１５）碱性磷酸酶（ＥＣ３．１．３．１,简称ＡＫＰ）是广泛存在于动物组织中的水解酶。对软体动物中ＡＫＰ的研究仅有少数报道［１,２］,对属于单壳贝类的水生食用螺──大...     

大量饲养水螅的技术

水螅在室内周年地长期大量饲养,主要应注意下面几个问题:采种一般采自野外,但因近年来水体污染比较普遍,故野外采集数量常很少。四川地区常见的水螅为褐水螅(Hydraoligactis),体呈浅褐色,雌雄异体,有6—8条触手,伸展时触手比身体长3—5倍,可在缓流的小溪,冬、囤水田,莲藕田和池塘等水体寻找。具体办法是取水中的枯稻茎、阔叶的水草和浮在水面的荷叶(枯叶或鲜叶贴水的一面)等进行观察,若发现有冻胶状直径约1.5毫米左右的球状物,色泽褐或微带红色,则极大可能是水媳。然后将它们放入有水的烧杯中,静置数分钟后,对着光看到有伸展的水螅,即可最…     

四川省尖嵴蚌属一新种(瓣鳃纲:蚌科)

作者于1981年8月进行四川省贝类资源调查时,在蒲江支流采到尖嵴蚌属一新种——四川尖峭蚌 Acuticosta sichuonica sp.nov.该种壳小,壳长26.5mm,壳高14.5mm,壳宽10.1mm;外形星卵圆形;前背缘短而低下,后背缘平直,与腹缘近于平行;壳面从壳顶至壳中部有五条似同心状的凹槽,最下一条较长,粗大。     

一种简易分离胞二磷胆碱的方法

胞嘧啶核苷二磷酸胆碱(简称胞二磷胆碱)是磷脂合成代谢的重要中间体,实验室利用这一核苷酸衍生物研究磷脂代谢。在医药上,胞二磷胆碱作为生化药物,治疗脑外伤、脑震荡后遗症、神经官能症、脂肪肝等疾病,效果良好。用合成方法制备胞二磷胆碱时,以往的分离方法     

整合素α3、α6在CD151促进HepG2细胞增殖、侵袭中的作用

目的观察CD151转染HepG2细胞后对细胞增殖,侵袭的影响及其与整合素的关系。方法用脂质体转染试剂,将质粒CD151及其突变体CD151-AAA转染HepG2细胞,观察转染后细胞增殖,侵袭的变化;免疫共沉淀法检测整合素的表达情况。结果 CD151-AAA突变体较CD151促细胞增殖力低,其侵袭力未见增强,且其免疫共沉淀未能检测到整合素的表达。结论 CD151促进HepG2细胞增殖,侵袭有赖于CD151-整合素α3/α6复合体的形成。     

瘦素对大鼠主动脉血管平滑肌细胞增殖和移行的影响

目的本实验旨在研究瘦素(Leptin)对大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和移行的影响。方法采用原代细胞培养方法建立VSMC细胞模型;以四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、免疫细胞化学染色等方法观察瘦素对VSMC增殖的影响;采用细胞移行实验观察瘦素对VSMC移行的影响;采用MAPK的抑制剂SB203580观察瘦素对VSMC增殖的抑制作用以探讨MAPK在瘦素促VSMC增殖中的信号转导机理。结果瘦素能显著促进VSMC增殖和移行,而MAPK的抑制剂SB203580可显著抑制瘦素对VSMC的增殖效应。结论瘦素具有明显的促VSMC增殖和移行的作用,其作用机制与激活MAPK信号途径有关。     

瘦素、胰岛素及IL-6对平滑肌细胞瘦素受体mRNA表达的影响

目的研究瘦素、胰岛素及IL-6对平滑肌细胞瘦素受体(Ob-R)mRNA表达的影响。方法采用六孔板培养皿培养鼠平滑肌细胞,5个孔作为一个浓度组,通过半定量的RT-PCR方法,分别观察了不同浓度的大鼠瘦素、胰岛素及IL-6对平滑肌细胞瘦素受体mRNA表达水平的影响。结果通过半定量RT-PCR,我们检测了短型瘦素受体(Ob-Ra)和长型瘦素受体(Ob-Rb)的mRNA表达水平,瘦素受体(Ob-R)mRNA表达水平随着瘦素及IL-6浓度增加而上升,随着胰岛素的浓度增加而下降。结论瘦素及IL-6可在体外上调平滑肌细胞瘦素受体的表达,胰岛素可下调平滑肌细胞瘦素受体的表达。这三个因子参与了瘦素受体的表达调控,对我们了解瘦素抵抗的发生机制有重要意义。     

赖诺普利对血管成形术后平滑肌细胞增殖影响的研究

为研究赖诺普利对血管成形术后平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖的影响,用体外血管平滑肌细胞培养及氚标记胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）掺入技术,观察了不同浓度赖诺普利（１～２０μｇ／ｍｌ）对培养的球囊血管成形术后的兔髂动脉ＳＭＣ增殖情况的影响。结果表明：加入赖诺普利后ＳＭＣ对３Ｈ－ＴｄＲ的摄取及细胞计数明显比对照组低（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）,各浓度组均有作用,浓度越高作用越明显。提示赖诺普利可抑制血管成形术后平滑肌细胞的增殖,有预防血管成形术后再狭窄的作用。     

瘦素对血管平滑肌细胞周期蛋白D1、CDK2表达的影响

目的观察瘦素对人平滑肌细胞周期时相及cyclin D1、CDK2表达的影响,探讨瘦素促进平滑肌细胞增殖的作用机制。方法取对数生长期的平滑肌细胞同步于G0期,分为加入浓度为0、20、40、80、100、200ng/ml瘦素的各组。作用24h后分别用MTT法检测细胞活性,用流式仪进行细胞周期时相的检测,Western blot法测定Cyclin D1、CDK2的表达。结果随着瘦素浓度的增加G0/G1期的平滑肌细胞逐渐减少,S期和G2/M期细胞逐渐增加,PI增殖指数逐渐增加。cyclin D1、CDK2蛋白的表达呈剂量依赖性的上升趋势。以上两项检测均在100ng/ml处达最高。结论瘦素上调cyclinD1、CDK2蛋白的表达,可能是促进平滑肌细胞增殖的机制之一。     

瘦素对血管平滑肌细胞核转录因子κB的影响

目的探讨瘦素(leptin)对血管平滑肌细胞(VSMCs)核转录因子(NF-κB)的影响。方法贴块法原代培养VSMCs;分别采用MTT法检测leptin对VSMCs增殖活性的影响,免疫荧光-共聚焦显微镜和蛋白印迹技术检测Lep-tin对VSMCs中NF?κB的细胞内定位和VSMCs核中NF?κB的蛋白含量。结果leptin对VSMCs具有促进细胞增殖的作用,这种促增殖活性具有剂量依赖性;Leptin能促进VSMCs中的NF?κB从胞质转移至细胞核,并且这种作用也具有剂量依赖性。结论Leptin能促进VSMCs增殖,能激活VSMCs中NF?κB,使其从胞质转位至胞核;同时,目前已有的研究已经证明NF?κB与平滑肌细胞的增殖和迁移关系密切,提示Leptin促进VSMCs的增殖作用中可能有NF?κB信号传导通路的参与。