肌肉蛋白的免疫化学研究——Ⅱ.软骨鱼系原肌球蛋白免疫化学的若干有关数据

在前文中我们报导了软骨鱼系原肌球蛋白的若干免疫化学性质。根据琼脂电泳、免疫电泳和琼脂双扩散反应,检出用其他化学或物理化学方法所未能检出的不均一性,并根据电泳移动速度,在(?)和鯊原肌球蛋白中,找到“快速泳动”和“慢速泳动”两部分。这两     

单抗在人铁蛋白免疫亲和纯化中的应用

抗人铁蛋白单抗６Ｄ６和Ａ－ｈＦ－Ｃ与肝型铁蛋白和心型铁蛋白的反应性有所不同。６Ｄ６对两种铁蛋白的反应性相似;而Ａ－ｈＦ－Ｃ单抗与肝型铁蛋白的反应性较强。我们将６Ｄ６和Ａ－ｈＦ－Ｃ分别制成了亲和凝胶,用来纯化人肝脏和心脏粗抽提物中的铁蛋白。此法具有操作简便,产率和产品纯度高等优点。     

紫贻贝(Mytilus edulis)血淋巴液乙酰胆碱酯酶的性质研究

紫贻贝(Mytilus edulis)血淋巴液乙酰胆碱酯酶是溶解状态的酶。我们制备了四种接有不同配位基或手臂的亲和凝胶,对酶的亲和层析行为作了比较。结果表明,不仅配位基的性质对酶的结合有关,而且手臂的疏水性质也影响酶的结合。用N-甲基吖啶为配位基的凝胶将粗酶制剂纯化了480倍。该酶对碘化硫代乙酰胆碱的米氏常数Km为6.8×10~(-5)M,对抑制剂BW284C51的可逆抑制常数Ks为1.03×10~(-5)M,过量底物使酶活力受到抑制。另外,我们还初步观察到不同季节的材料,其酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳分离图谱有所差异。     

抗人铁蛋白单克隆抗体的制备及其在肝癌病人血清铁蛋…

铁蛋白是一种肿瘤相关蛋白质,我们从人肝癌组织中分离纯化了铁蛋白,并筛选到一株抗该铁蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株（６Ｄ６）,它针对铁蛋白上的构象决定簇,并对人源铁蛋白高度专一。然后我们用此单抗建立了测定铁蛋白浓度的夹心ＥＬＩＳＡ法,并对方法的灵敏度,精确度及特异性作了研究。本法用于测定不同血清标本的结果表明：肝癌病人血清中的铁蛋白浓度明显高于正常人,这可能对临床诊断会有使用价值。     

抗体对猪脑尾核乙酰胆碱酯酶的热稳定性的影响

采用不同的固定化方法制备了三种固定化猪脑尾状核乙酰胆碱酯酶,其中琼脂糖-抗体-乙酰胆碱酯酶热稳定性最好。抗体与热稳定性最差的琼脂糖-青豌豆植物凝集素-乙酰胆碱酯酶反应后,酶的热稳定性明显提高。抗体还能部分恢复热失活的琼脂糖-青豌豆植物凝集素-乙酰胆碱酯酶的活力。酶与抗体反应前后的表观米氏常数K_m 及反应速度没有明显变化,表明抗体是结合在酶的非活性部位,没有或很少影响酶的活性中心的构象。     

用膦酰化试剂[o-ethyl-s-(diisopropylaminoethyl-2)methanethiophosphonate]滴定乙酰胆碱酯酶的活性中心

用稳定的乙酰胆碱酯酶不可逆抑制剂(MTP)滴定了猪脑尾核、眼镜蛇蛇毒和电鳗电组织乙酰胆碱酯酶溶液的活性中心数。抑制剂与这些酶的二级反应常数分别为:1.69×10~5l·mol~(-1)·s~(-1);6.72×10~5l·mol~(-1)·s~(-1)和6.78×10~5l·mol~(-1)·s~(-1)。因为MTP膦酰化的紫贻贝血淋巴液乙酰胆碱酯酶容易自活化,故此法不能用来滴定这种酶的活性中心。     

紫贻贝(Mytilus edulis)血淋巴液乙酰胆碱酯酶的性质研究

紫贻贝(Mytilus edulis)血淋巴液乙酰胆碱酯酶是溶解状态的酶。我们制备了四种接有不同配位基或手臂的亲和凝胶,对酶的亲和层析行为作了比较。结果表明,不仅配位基的性质对酶的结合有关,而且手臂的疏水性质也影响酶的结合。用N-甲基吖啶为配位基的凝胶将粗酶制剂纯化了480倍。该酶对碘化硫代乙酰胆碱的米氏常数K_m为6.8×10~(-6)M,对抑制剂BW284C51的可逆抑制常数K_4为1.03×10(-6)M,过量底物使酶活力受到抑制。另外,我们还初步观察到不同季节的材料,其酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳分离图谱有所差异。     

分泌抗天花粉蛋白单克隆抗体的淋巴细胞杂交瘤细胞系(简报)

天花粉蛋白经我国化学、生物学和医学工作者近年来的共同努力,用于中期引产的成功率已达百分之九十八,用作抗早孕的成功率也已达百分之九十二以上。(沈阳市计划生育科学研究所刘国武等,未发表资料)。为使用高度专一的单克隆抗体,进一步分离纯化天花粉蛋白的有效成分,以开展天花粉蛋白的生物活性与抗原结构关系的研究,最近我们采用淋巴细胞杂交瘤技术,建立了二株稳定     

亲和层析纯化猪脑尾状核乙酰胆硷酯酶

将乙酰胆硷酯酶的可逆抑制剂(间-羧苯二甲基碘乙基季铵盐)共价连接到Sepharose 4B上,用0.5%胆酸钠抽提的猪脑尾核乙酰胆硷酯酶经上述凝胶亲和层析,比活提高1024倍,得率为32%。纯化制剂的琼脂免疫双扩散呈单一的沉淀线,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离出四条酶活力区带,对硫代乙酰胆硷的米氏常数为:8.9×10~(-5)M。     

抗乙型肝炎病毒表面抗原preS1（20－47）多抗的制备、性质和应用

ＨＢｓＡｇｐｒｅＳ１（２１－４７）肽参与乙肝病毒与肝细胞受体的结合。我们用固相法合成了ＨＢｓＡｇｐｒｅＳ１（２０－４７）２８肽,并用此肽与ＢＳＡ的偶联物免疫家兔;抗血清经亲和层析纯化后,得到了高纯度、高活力及专一性的抗ＨＢｓＡｇｐｒｅＳ１（２０－４７）多抗,它能成功地用于基因工程表达产物及病人血清中的ＰｒｅＳ１抗原的检测。