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一株新城疫病毒新强毒株(NL)的分离鉴定及F基因序列测定 总被引:3,自引:0,他引:3
1996年5月以来,1我国各地鸡群暴发鸡新城疫,其发病特征是常规疫苗免疫无效。为研究此病毒的特征,对从华东某地分离的新城疫病毒毒株(NL株)进行了生物学研究。利用RT-PCR技术扩增出NL株融合蛋白基因(F基因)全序列,并测序。结果表明,NL株平均致鸡胚死亡时间最短的,其尿囊液中病毒滴度可达2^9,表明病毒繁殖速度快。F基因测序结果表明,NL株为一强毒株,与现今国外已发表的NDV株F基因同源性在8 相似文献
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表达LacZ基因重组火鸡疱疹病毒(HVT)的构建 总被引:3,自引:0,他引:3
将不含任何启动子的E.coli LacZ基因,插入火鸡疱疹平素FC-126株胸苷激酶编码区末尾的NheⅠ位点,构建成转移载体质粒pTKLacZ。用此质粒和HVT感染的细胞基因组总DNA共感染鸡胚成纤维细胞,在X-gal存在下,通过蓝斑筛选,分离到重组体HVT。rHVT与野生型HVT-FC-126株在CEF中的生长特性完全相似,且在连续传代过程中能稳定表达LacZ基因。 相似文献
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应用聚合酶链反应技术,用设计带有限制性酶切位点的引物,特异地扩增从起始密码子开始的1 .8 kb 新城疫病毒( N D V) 血凝素神经氨酸酶( H N) 基因开放式阅读框,然后插入p T K2 B 的 Nhe Ⅰ位点,构建了含 N D V H N 基因的插入载体p T K H N1 和p T K H N2 ,再与感染火鸡疱疹病毒( H V T) 细胞的总 D N A 共转染鸡胚成纤维细胞( C E F) ,经有限稀释法和 Dotblot 筛选,得到含有 H N 基因的重组体r H V T1 和r H V T2 。经组织培养传代和 Western blot 分析,表明重组体在感染细胞中表达了 H N 蛋白。重组体在 C E F 上的生长特性与亲本病毒相同,且在连续传代过程中保持稳定。为国内新城疫基因工程疫苗研制奠定了基础。 相似文献
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