2个钟菌属野生菌株鉴定及其菌丝生长特性

钟菌属Verpa隶属于羊肚菌科Morchellaceae,与羊肚菌属Morchella的亲缘关系较近,形态特征与羊肚菌较为相似.对采自湖北省和黑龙江省的2份标本进行形态学鉴定,发现其菌盖表面平滑,呈褶皱状,无横脊,边缘整齐,菌柄着生于菌盖下正中央,子囊呈光滑的棍状,含有2个或4个光滑的椭圆形子囊孢子.对子实体进行组织分离和培养(采自湖北省标本组织分离菌株为z1m2,采自黑龙江省标本组织分离菌株为76a),观察菌丝及细胞核的显微结构,结果发现其菌丝体圆筒状,无色,光滑,有隔,多分支,多核,形态学鉴定为皱盖钟菌Verpa bohemica.基于ITS序列分析进一步验证了形态学鉴定结果的准确性.通过菌丝纯培养结果显示,皱盖钟菌最适培养温度为21℃,最佳培养基为木屑粉(SD)培养基,在小麦粉(WH)培养基上产生菌核最多;菌丝老化速度试验结果发现:菌株76a平均寿命为33 d,而菌株z1m2的衰老速度明显快于76a菌株,至21d时菌丝彻底死亡.对2个不同区域的皱盖钟菌野生菌株进行鉴定和生长特性研究,进一步充实了羊肚菌科钟菌属的相关研究.     

乳菇类外生菌根食用菌研究进展

乳菇类资源分布广泛,且大多属于可食用的外生菌根真菌,具有较高的营养价值及生态价值,其中最著名的是美味乳菇组真菌。乳菇类真菌在传统分类中归于乳菇属Lactarius,但依据分子系统发育研究结果分别归于Lactarius、Lactifluus、Multifurca 3个属中。乳菇类真菌菌丝生长缓慢,无法采用死体有机质进行人工栽培,对它们的深入研究与人工驯化仍然具有较大的难度。目前国内外研究主要集中在乳菇类真菌的分类鉴定、系统发育、菌丝分离培养、菌根化接种、种植园栽培管理技术及营养活性成分研究等方面,其中松乳菇L. deliciosus菌根化和仿野生人工栽培已经取得成功,并在新西兰等地开始商业化栽培。本文较系统地总结了乳菇类真菌的研究历程及现状,并对国内外乳菇类真菌研究趋势进行了展望。     

梯棱羊肚菌镉胁迫响应基因ATX1功能分析

梯棱羊肚菌Morchella importuna是一种可以大田覆土栽培的珍稀食用菌,而土壤重金属污染状况日益严重,对梯棱羊肚菌菌丝生长和子实体产品质量安全构成了潜在的威胁。本研究先采用镉离子胁迫处理梯棱羊肚菌菌丝体,RT-PCR检测发现候选基因ATX1的表达量显著下调。克隆梯棱羊肚菌ATX1基因,对ATX1p蛋白结构进行功能预测,发现ATX1p可能与铜离子转运及重金属胁迫相关。然后分别构建ATX1的超表达和RNAi基因沉默载体,采用农杆菌介导的转化方法,将其转入梯棱羊肚菌同核体菌株A50中,分别筛选到4个ATX1表达显著上调的超表达转化子和4个ATX1表达显著下调的RNAi基因沉默转化子,镉敏感性检测发现ATX1的RNAi基因沉默转化子表现为镉抗性增强,而ATX1超表达转化子则表现为镉抗性减弱。结果表明,梯棱羊肚菌ATX1基因表达与镉抗性呈负相关,ATX1p可能在梯棱羊肚菌镉胁迫响应过程中发挥着某种重要作用。     

梯棱羊肚菌营养类型的研究

羊肚菌是羊肚菌属Morchella中所有种的统称,其味道鲜美,深受人们的喜爱。目前,大多数羊肚菌物种仍然无法实现人工栽培,其重要原因之一就是它们营养类型仍然不甚清楚。梯陵羊肚菌M. importuna是少数可以人工栽培的羊肚菌之一,其腐生营养特性已经明确,但是否与植物根系存在共生营养关系仍然有疑问。为了探究梯陵羊肚菌菌丝与植物根系之间的相互关系,本研究选用梯棱羊肚菌2个不同交配型同核体菌株A2（MAT1-2-1）、A50（MAT1-1-1）和1个异核体菌株A59（MAT1-1-1和MAT1-2-1）为材料,将3个菌株分别与杂交白杨717（Populus tremula × P. alba,clone 717）进行共培养试验,观察菌丝与根系之间的互作情况。结果显示,A2、A50和A59菌丝体都能使杨树根系发生形态变化,产生明显的菌套（mantle）以及“Y”型菌根状结构,但均未观察到明显的哈蒂氏网（Hartig net）结构。研究表明,梯棱羊肚菌与杨树根系存在某种营养关系,但与外生菌根的共生关系不同。     

生产重组蛋白的植物表达系统

作为高附加值重组蛋白生产平台,由于在成本和安全性方面的优势,植物已成为继微生物、哺乳动物等表达系统之后,获得广泛认同的极具潜力的蛋白表达系统。植物表达系统主要包括转基因植株,叶绿体转化植物,瞬时表达系统,细胞悬浮培养。综述了这些表达系统生产重组蛋白的产量和质量,尤其是各种表达系统的优缺点。     

梯棱羊肚菌类膨大素蛋白Cerato-Platanin (CP)生物信息学分析及原核表达

梯棱羊肚菌Morchella importuna是一种珍稀食药用菌,经济价值极高,但其生活史及子实体发育过程并未完全明确,栽培技术尚不稳定.通过查阅文献和比对梯棱羊肚菌基因组信息,找到2个Cerato-platanin(CP,类膨大素)家族的基因,分别命名为Mi-CP1与Mi-CP2.采用生物信息学方法分析了Mi-CP1和Mi-CP2蛋白的结构及理化性质,构建了系统发育树,并采用qRT-PCR检测Mi-CP1和Mi-CP2基因在菌丝期、白菌核期、黄菌核期、原基期、幼菇期、成熟子囊果期6个不同生长发育阶段的相对表达量.结果 显示:Mi-CP1仅在菌丝期显著表达,而Mi-CP2在原基期和幼菇期大量表达,其中原基期是幼菇期的4.7倍,表明Cerato-platanin(CP)蛋白不仅与梯棱羊肚菌的营养生长有关,还可能参与了子囊果的发育.通过去除信号肽,分别构建pMAL-c2X-CP1X和pMAL-c2X-CP2X的原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中诱导表达,结果仅Mi-CP1X蛋白成功诱导表达,而Mi-CP2X蛋白未能成功诱导表达,推测可能与使用的表达载体有关.本研究为揭示CP蛋白在羊肚菌生长发育过程中的作用奠定了基础.