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[目的]核酸的甲基化修饰是一种常见的化学修饰形式,具有重要的生物学功能,却也在一定程度上给一些核酸研究过程带来了技术难度。tRNA上具有的大量甲基化修饰会阻碍逆转录进程,从而降低荧光定量PCR (real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和高通量测序对其的检测效率。来自大肠杆菌(Escherichia coli)的AlkB蛋白是一种多功能的脱烷基化酶,可以去除DNA和RNA上多种甲基化为代表的修饰,有望解决以上问题。[方法]针对大肠杆菌来源的AlkB,分别尝试在大肠杆菌和毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统中进行诱导表达和纯化,对纯化获得的AlkB进行酶学性质测定。最后以tRNAUAUIle等两种tRNA为代表,研究AlkB的处理对于荧光定量PCR法检测tRNA表达水平的影响。[结果]AlkB在大肠杆菌中表达时多以包涵体形式存在,但是在毕赤酵母中可以成功分泌表达。使用镍柱分离纯化后获得了纯度高于95%的AlkB蛋白,其酶学性质参数如... 相似文献
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了解贺兰山岩羊可食植物营养成分变化是研究岩羊采食分布范围的重要环节，对阐明野生岩羊与自然环境关系具有重要意义。以不同季节(6月、8月和11月)、不同海拔(1100～2600 m)的贺兰山岩羊可食植物为对象，分析其营养成分变化的时空格局。结果表明：8月植物营养价值最佳，除粗灰分，各个营养成分在不同季节之间差异均显著(P<0.05);6月不同海拔之间除粗脂肪外贺兰山岩羊可食植物营养成分均具有显著性差异(P<0.05),8月各个营养成分之间在不同海拔差异均显著(P<0.05),11月除粗蛋白外其余养分含量在不同海拔均具有显著性差异(P<0.05);海拔和季节对岩羊可食植物营养成分变化具有交互作用(P<0.05)。因此，针对不同季节、不同海拔下植物的营养价值不同，建议分时间、分海拔区域对岩羊进行管护，促使岩羊种群健康可持续性发展。 相似文献
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面对全球变化，准确掌握陆地森林生态系统生物地球化学循环过程及其影响因素，有助于维持生态系统多功能性与稳定性，实现增汇并延长碳汇服务，持续增进并改善人民福祉。为了探究贺兰山山地森林生态系统优势建群种青海云杉(Picea crassifolia)林土壤生态化学计量特征对海拔的生态响应及其影响因素，从土壤、林分、地形影响因素的角度出发，采用冗余分析(Redundancy analysis, RDA)和方差分解分析(Variance partitioning analysis, VPA)阐明影响其非根和根围土壤生态化学计量特征空间变异的关键因素。结果表明：(1)贺兰山青海云杉林非根和根围土壤C、N养分含量均维持在较高水平，高海拔区域青海云杉生长受土壤P限制高；相较非根土壤，根围土壤虽养分含量较低，但具有较高的养分周转能力，如有机质分解与矿化、固持P的潜力等。(2)随海拔变化，非根和根围土壤养分及其生态化学计量比变化趋势不同，非根土除了全氮(TN)含量外其他养分含量及化学计量比在不同海拔间均差异显著(P<0.05),根围土全磷(TP)、碳磷比(C/P)具有显著性差异(P>0.05)。... 相似文献
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