绿色高效液相色谱法分析四种虫草药材的游离和总甾醇含量

虫草类药材采用85%乙醇超声提取游离甾醇、采用0.5 mol/L氢氧化钾-乙醇溶液回流提取总甾醇,并用绿色溶剂(乙醇和水)固相萃取法纯化分析溶液。用HPLC-ELSD法测定麦角甾醇、胆甾醇和谷甾醇的含量,色谱柱为Poroshell 120 EC-C₁₈ (100 mm×4.6 mm, 2.7 μm),绿色流动相乙醇-水(89:11),流速为0.5 mL/min,结果表明所建立的分析方法3种甾醇成分在考察的浓度范围内,线性关系好、精密度和准确度高。20批虫草类样品均含结合型甾醇和游离型甾醇;冬虫夏草繁育品与野生品均含3种甾醇,两者含量相当;凉山虫草(野生品)、蛹虫草(培植品)、蝉花(野生品)可检测到麦角甾醇。该方法可有效鉴别冬虫夏草和其他3种虫草产品,为虫草类产品质量评价提升提供了依据。     

人毛乳头细胞组织化学研究

毛乳头细胞是一种高度特殊化的成纤维细胞。本文通过对体外培养的毛乳头细胞进行组织化学染色研究发现,它对阿新蓝、甲苯胺蓝和PAS染色均呈阳性,并对甲苯胺蓝显异染性．与原位时的细胞染色结果相同,表明在体外培养下．毛乳头细胞合成和分泌酸性、中性粘多糖的能力仍能维持较长时间;在细胞聚集区和多层化细胞团中有丰富的细胞外基质,阿新蓝和PAS染色呈强阳性,说明细胞外基质的存在与毛乳头细胞的聚集有很大关系;另外毛囊真皮鞘细胞对阿新蓝、甲苯胺蓝染色呈阳性反应．无甲苯胺蓝的异染性,PAS染色阴性,而真皮成纤维细胞这些染色均阴性,说明它与毛乳头细胞关系密切。     

呼吸道合胞病毒感染人肺上皮细胞一氧化氮的产生及其作用

本文探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染人肺上皮细胞(A549细胞)后, 一氧化氮(NO)的水平变化及其在RSV感染中的氧化损伤和抗病毒作用。RSV以不同时间感染A549细胞, 并给予NO合成的抑制剂氨基胍(AG)处理。收集细胞培养上清, 分别用硝酸还原酶法和硫代巴比妥酸法检测NO和丙二醛(MDA)含量, 化学法检测羟自由基(OH·)与超氧阴离子(O2.—)水平, 空斑形成试验测定病毒复制滴度(PFU)。结果显示在RSV感染4 h后即上调NO、OH·、O2.—和MDA的表达水平。当RSV感染中给予AG处理以抑制iNOS合成NO时, 则降低OH·、O2.—和MDA含量, 但病毒PFU升高。各指标的变化与相应时间点的感染组相比, 差异均有显著性。提示RSV感染肺上皮细胞诱导生成的NO与细胞内自由基水平升高和加重细胞的自由基损伤程度有关; 但在一定程度上可抑制病毒的增殖水平。     

他卡西醇对人黑素细胞生物学性状的影响

目的:观察他卡西醇对体外培养的正常人黑素细胞增殖、黑素合成及酪氨酸酶(TYR)mRNA表达、酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1)mRNA表达的影响,探讨他卡西醇治疗白癜风的机制.方法:体外黑素细胞培养,给予不同浓度他卡西醇(10-6、10-7、10-8、10-9、10-10mol/L)处理,用MTT法测定细胞增殖,碱裂解法测定黑素合成,多巴氧化法检测酪氨酸酶活性,半定量RT-PCR法检测TYR、TRP-1 mRNA的表达.结果:10-8 mol/L他卡西醇能刺激黑素细胞增殖,10-8、10-9 mol/L能促进黑素合成,10-9～10-6 mol/L的他卡西醇能显著增强正常人黑素细胞酪氨酸酶活性并上调TYR、TRP-1mRNA的表达.结论:他卡西醇可促进黑素细胞增殖,并提示该药物可能通过上调酪氨酸酶家族中关键基因TYR、TRP-1mRNA的表达来提高酪氨酸酶活性,最终增加黑素合成.     

辐照大麦M~1花粉母细胞染色体畸变及其与M~2 性状变异的关系

大麦种子经5种不同剂量γ射线辐照后, M1植株的花粉母细胞出现多种染色体畸变类型,例如后Ⅰ、后Ⅱ中出现桥、落后,后Ⅰ中出现不对称分裂,后Ⅱ中出现不同步分裂,中期Ⅰ出现环状四价体,末期Ⅰ中有三极分裂和微核,四分体中出现微核且有的微核独立于四分体,从而形成多分体。花粉母细胞的染色体畸变率随剂量的增高而升高,二者呈极显著直线相关关系。 M1花粉母细胞的染色体畸变率与M2的叶绿素突变率及农艺性状变异率呈显著或极显著指数函数关系。 M2花粉母细胞的染色体畸变率低于M1。 Abstract:Barley seeds were irradiated with five different doses of 60 Co-γ ray.There were many kinds of chromosome aberration in pollen mother cells,such as bridge,laggards in anaphase I and anaphase II,asymmetrical division in anaphase I and asynchronous division in anaphase II,ring quadrivalent in metaphase I,three pole division and micro-nuclei in telophase I,micro-nuclei in tetrad and some micro-nucleus separates from the tetrad to form polyad.The frequency of chromosome aberration in pollen mother cells of M1 increased with the increase of dose.There was a significant linear relationship between them.The frequencies of agronomic character mutation and chlorophyll mutation in M2 significantly correlated with the frequencies of chromosome aberration in pollen mother cells of M1 and showed an exponential function.The chromosome aberration frequency in pollen mother cells of M2 was lower than that of M1.     

转基因棉花的Bt基因流

通过两年实验检测转基因陆地棉品种间和海岛棉与陆地棉种间的Bt基因流.将转基因陆地棉国抗12号种植在12m×12m的样方内,周围分别种植非转基因陆地棉品种中棉所12号和海岛棉品种新海13号,在离转基因棉花不同距离选取样点,采集非转基因棉花种子,利用标记选择基因、Dot朎LISA和PCR扩增检测Bt基因流.结果表明在0～6m内陆地棉品种间显示较高频率的基因流,随着距离的增加Bt基因流降低,最大可达36m;提高样方内转基因棉花纯度,仅增加0～3m内基因流,对较远距离基因流无影响.海陆种间Bt基因流在0～6m内比陆地棉品种间低,但Bt基因流随距离增加下降幅度小,最远达72m.因此,在小规模转基因棉花环境释放实验,可选用同种不同品种棉花作为缓冲隔离带,并讨论了棉花转基因逃离至我国棉属种类的可能性.     

侵袭性肺曲霉病临床和病理分析——附23例报告

目的 分析侵袭性肺曲霉病(IPA)临床和组织病理特征,为探讨IPA早期诊断和临床病理分型提供依据.方法 非选择性地总结本院34年来512例成人(年龄≥16岁)尸检资料,依据病理切片真菌形态确定IPA患者共23例,并进行临床和病理对照分析.结果 23例中有明确基础疾病者21例,有明确诱因者20例.临床上表现有发热等中毒症状者17例(73.91%),合并呼吸道症状者18例(78.26%),存在肺部和肺外栓塞征象者9例(3.91%).胸部影像表现和病理检查符合急性支气管肺炎型15例次,血管侵袭型12例次,急性气管支气管炎型5例次,粟粒型3例次和胸膜炎型1例次.其中急性支气管炎型和血管侵袭型常合并存在,并成为患者致死的直接原因.结论 IPA临床表现复杂多变,探讨临床尤其是胸部影像学检查和组织病理分型有利于患者的早期诊断和判断预后.