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目的:在FUS-50L生物反应器中利用补料分批培养技术培养表达含重组质粒pET28a( )-GNLY的大肠杆菌BL21(DE3)pLysS株,生产重组颗粒溶素(GNLY)。方法:选取含pET28a( )-GNLY的BL21(DE3)pLysS菌株单个克隆分级培养,将制备的二级种子液接种于发酵罐中。在发酵过程中,控制溶氧为30%~50%,温度为37℃;在基础培养基内生长4h后,补加以甘油为碳源的补料,继续生长到11h;加入葡萄糖至终浓度为1%,30℃诱导表达6h;收集菌体,纯化制备目的蛋白。利用Western印迹检测重组蛋白的抗原性,用CFU方法检测其生物学活性。结果:发酵液中最终菌体密度达80g/L;纯化所得重组蛋白约占菌体总蛋白的5%,含量为60mg/L;经鉴定所获重组颗粒溶素有较好的免疫学活性和生物学活性。结论:用含重组质粒pET28a( )-GNLY的大肠杆菌BL21(DE3)pLysS表达系统,可得到具有生物活性的重组颗粒溶素,为大批量生产提供了条件。 相似文献
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目的:采用液基细胞学检测(TCT)方法,探讨其在妇科宫颈病变细胞学筛查中的临床应用价值。方法:选择我院2007年1月-2008年12月接受宫颈病变筛查的患者2445例,收集宫颈脱落细胞,采用TCT技术检测,细胞学分类采用TBS分类标准诊断,对细胞学检查阳性者行阴道镜指引下多点活检,将细胞学检查结果与活检结果作对比分析。结果:2445例受检者中细胞学阳性病例196例,阳性检出率8.02%。其中非典型鳞状细胞(ASCUS)占5.8%;低度鳞状上皮内病变(LSIL)占1.5%;高度鳞状上皮内病变(HSIL)占0.6%;鳞癌(SCC)占0.1%。阳性病例阴道镜下活检结果与细胞学检查结果符合。结论:TCT检查能准确反映宫颈病变情况,在妇科宫颈病变筛查中有较高的临床应用价值,可作为临床宫颈癌普查方法。 相似文献
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目的:研究肺癌患者血清中血管内皮生长因子(VEGF)、组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平变化及临床意义。方法:选取2014年3月至2016年3月来我院治疗的91例肺癌患者为病例组,同期选取40例健康者为对照组,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定两组血清VEGF、TIMP-1、MMP-9水平,分析肺癌患者上述指标与病理特征的关系,并采用spearman检验分析相关性。结果:病例组血清VEGF、TIMP-1、MMP-9水平均高于对照组,差异均具有统计学意义(P0.05)。肺癌患者血清VEGF、TIMP-1、MMP-9水平均与肿瘤体积大小、TNM分期、淋巴结转移、远处转移有关(P0.05)。肺癌患者血清MMP-9与TIMP-1正相关(r=0.337,P0.05)、血清MMP-9与VEGF正相关(r=0.312,P0.05)、血清TIMP-1与VEGF正相关(r=0.316,P0.05)。结论:血清VEGF、TIMP-1、MMP-9相互作用、协同参与肺癌的发生及侵袭转移,可作为肺癌诊断及预后评估的生物学标志物。 相似文献
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