不同程度内质网应激对ApoE-/- 小鼠动脉粥样硬化斑块稳定性的影响

目的:采用Apo E-/-小鼠建立不稳定动脉粥样硬化斑块模型,给予不同剂量衣霉素,观察其对动脉粥样硬化斑块稳定性的影响。方法:取40只6-8周的Apo E-/-小鼠随机分为对照组和手术组。对照组小鼠给予正常饮食;手术组小鼠行右侧颈总动脉套管术(Perivascular carotid collar placement,PCCP),同时给予高脂喂养。9周末分别取对照组和手术组小鼠颈动脉,HE染色观察小鼠颈动脉斑块形成情况。成功造模后,将小鼠随机分为正常对照组、单纯PCCP组、小剂量衣霉素组和大剂量衣霉素组;正常对照组和单纯PCCP组给予生理盐水腹腔注射,小剂量衣霉素组和大剂量衣霉素组分别给予小剂量衣霉素、大剂量衣霉素腹腔注射。2周后,处死小鼠,通过HE染色观察颈动脉斑块形态,油红O染色观察斑块内脂质聚集,抗巨噬细胞免疫组化染色观察斑块内巨噬细胞聚集,Western-blot检内质网应激标志蛋白GRP78和自噬标志蛋白Atg7、P62的表达水平。结果:HE染色结果显示:与单纯PCCP组和大剂量衣霉素组相比,小剂量衣霉素组颈动脉腔内的斑块脂质池减少,斑块结构较为完整且相对稳定;油红O染色结果显示:小剂量衣霉素组斑块内脂质含量显著降低(P0.05 vs单纯PCCP组和大剂量衣霉素组);巨噬细胞免疫组化染色显示:与单纯PCCP组和大剂量衣霉素组相比,小剂量衣霉素组斑块内巨噬细胞的含量显著降低(P0.05);Western-blot结果显示:小剂量衣霉素干预诱导的一定程度的内质网应激可以适度上调自噬(P0.05 vs单纯PCCP组和大剂量衣霉素组)。结论:PCCP手术加高脂饮食可以短期成功建立小鼠不稳定动脉粥样硬化斑块模型,其动脉粥样硬化斑块不稳定性较高,而小剂量衣霉素干预可以使得颈动脉管腔内斑块相对较小,内部脂质池明显较小,纤维帽变厚且结构更完整,斑块结构较稳定;斑块内脂质含量降低;巨噬细胞含量明显降低,且小剂量衣霉素组自噬水平适度上调。因此,小剂量衣霉素干预引起的适度的内质网应激一定程度对动脉粥样硬化斑块起到保护作用。     

银杏蜜环口服溶液联合尼可地尔对冠心病患者血清HsCRP、HCY、IMA、LP-PLA2水平的影响

目的:研究银杏蜜环口服溶液联合尼可地尔对冠心病患者血清超敏C反应蛋白(High-sensitivity C-reactive protein,Hs CRP)、同型半胱氨酸(Homocysteine,HCY)、缺血修饰白蛋白(Ischemia Modified Albumin,IMA)和脂蛋白相关磷脂酶A2(Lipoprotein-related phospholipase A2,Lp-PLA2)水平的影响。方法:选择2016年11月～2018年11月在我院全科医学科、急诊科收治的80例冠心病患者,根据就诊顺序,用抽签法随机分为两组,每组40例患者。对照组口服尼可地尔治疗,观察组采取银杏蜜环口服溶液联合尼可地尔治疗,两组均持续治疗2周。比较两组治疗前后的血清Hs CRP、HCY、IMA、LP-PLA2水平,左室舒张末径(left ventricular end-diastolic diameter,LVEDD)、心输出量(cardiac output,CO)和左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)等心功能指标的变化。结果:治疗后,观察组的总有效率为92.50%(37/40),明显高于对照组[75.00%(30/40)](P0.05);两组治疗后的血清Hs CRP、HCY、IMA、LP-PLA2水平均较治疗前明显降低(P0.05),且观察组以上指标均明显低于对照组(P0.05);两组治疗后的LVEDD均较治疗前明显降低,而CO和LVEF均较治疗前明显升高(P均0.05),且观察组治疗后的LVEDD与对照组相比明显降低,而CO和LVEF显著升高(P0.05)。结论:银杏蜜环口服溶液联合尼可地尔治疗冠心病的疗效明显优于单独口服尼可地尔治疗,其机制可能与降低血清Hs CRP、HCY、IMA、LP-PLA2水平相关。     

CK-MBmass, hs-cTnT及CK-MB与急性心肌梗死的相关性及其联合诊断价值

摘要 目的：研究肌酸激酶同工酶质量（CK-MBmass)、肌酸激酶同工酶（CK-MB）和高敏心肌肌钙蛋白T（hs-cTnT）在急性心肌梗死患者（AMI）血清中的含量,并探讨三者联合对AMIDE诊断价值。方法：选择2018年1月到2021年10月我院收治的AMI患者90例作为研究组,并选择同期在我院体检健康志愿者40例作为对照组,比较两组AMI患者血清CK-MBmass,hs-cTnT和CK-MB。根据Killp分级法将不同心力衰竭将AMI患者分为II、III和IV级,并根据心肌梗死范围将AMI患者分为轻度、中度和重度心肌梗死组。比较不同AMI患者血清CK-MBmass,hs-cTnT和CK-MB。通过受试者工作曲线计算血清CK-MBmass,hs-cTnT和CK-MB联合诊断AMI的阳性预测值、阴性预测值、敏感度和特异度。结果：（1）AMI患者血清CK-MBmass,hs-cTnT和CK-MB均显著高于健康志愿者（P<0.05）;（2）AMI患者血清CK-MBmass,hs-cTnT和CK-MB随Killp分级或心肌梗死范围升高而升高（P<0.05）;（3）AMI患者血清CK-MBmass,hs-cTnT,CK-MB与急性心肌梗死患者左室射血分数（LVEF）呈负相关（P<0.05）,与左室舒张末期容积（LVEDd）和梗死范围呈正相关（P<0.05）;（4）血清CK-MBmass,hs-cTnT和CK-MB联合检测急性心肌梗死的阳性预测值、阴性预测值、敏感度和特异度均高于单独诊断。结论：血清CK-MBmass,hs-cTnT和CK-MB在AMI患者含量升高,并且与患者心功能和心肌梗死范围有关,适用于AMI的联合诊断。     

AAV-9病毒转载sfrp1靶向干预wnt信号通路治疗心力衰竭大鼠分子机制研究

摘要 目的：探讨腺病毒9（AAV-9）转载可溶性卷曲相关蛋白1（Sfrp1）靶向干预wnt信号通路治疗心力衰竭大鼠的效果和分子机制。方法：选择45只健康SD雄性大鼠作为研究对象,随机分为对照组、模型组和sfrp1组,各15只。模型组和sfrp1组采用左前降支动脉结扎手术建立慢性心力衰竭大鼠模型后,给予对照组和模型组大鼠经尾静脉注射生理盐水,给予sfrp1组大鼠经尾静脉注射AAV-sfrp1载体。分别在建模成功时和注射AAV-9病毒载体第28 d通过心脏超声评价各组大鼠心功能[左室射血分数（LVEF）、左室收缩期内径（LVIDS）和左室短轴缩短率（LVFS）]。采用酶联免疫吸附法检测腹主动脉血血清中Ⅰ型和Ⅲ型胶原水平。采用TUNEL法检测各组大鼠心肌细胞凋亡情况。采用Western blot技术检测心肌组织细胞中β-catenin、Dvl-1和α-SMA蛋白表达情况。结果：模型组和sfrp1组大鼠建模成功时的LVEF、LVFS均显著低于对照组,LVIDS显著大于对照组。注射AAV-9病毒载体后第28 d时sfrp1组大鼠LVEF和LVFS显著增加并显著大于模型组,LVIDS显著降低并显著低于模型组（P<0.05）。sfrp1组大鼠血清胶原Ⅰ和胶原Ⅲ水平以及心肌细胞凋亡比例均显著高于对照组,但显著低于模型组（P<0.05）。sfrp1组大鼠心肌组织中β-catenin、Dvl-1、α-SMA蛋白相对表达水平显著高于对照组,但显著低于模型组（P<0.05）。结论：AAV-9病毒转载sfrp1能够通过靶向抑制wnt信号通路以及抑制心肌胶原合成,降低心肌细胞凋亡,改善心力衰竭大鼠心脏功能。     

外周血miR-223和血清BNP水平在慢性心力衰竭患者中的诊断价值

目的:探究慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)患者外周血microRNA-223(miR-223)和血清B型利钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP)水平及其诊断价值。方法:选取CHF患者65例(CHF组),其中美国纽约心脏病协会(New York Heart Association,NYHA)心功能分级Ⅱ级24例,Ⅲ级22例,Ⅳ级19例。另取40例同期在体检中心进行健康体检者(Control组),采用实时荧光定量PCR检测外周血中miR-223水平,ELISA检测血清BNP含量,ROC曲线评价miR-223及BNP对CHF的诊断价值。结果:CHF组左心室短轴缩短率及左心室射血分数显著低于Control组(P0.01);左心室舒张末期内径显著高于Control组(P0.01)。CHF组不同NYHA心功能分级患者miR-223和BNP水平均高于Control组,且miR-223和BNP水平随NYHA心功能分级逐渐递增,组间两两比较均显示统计学差异(P0.05)。miR-223诊断CHF的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.7375,临界值为43.51时灵敏度为92.82%,特异度为89.44%;BNP诊断CHF的AUC为0.7925,临界值为128 ng/L时灵敏度为92.93%,特异度为92.58%。结论:CHF患者外周血miR-223和血清BNP水平高于健康对照人群,其对CHF的诊断具有一定的临床参考价值。     

房颤大鼠模型心室重构与心肌细胞钙稳态和心律失常的关联

摘要 目的：探讨房颤大鼠模型心室重构与心肌细胞钙稳态和心律失常的关联性。方法：将雄性Wistar大鼠随机平分为两组,各组8只,模型组采用乙酞胆碱-氯化钙混合液尾静脉注射法建立房颤动物模型,对照组注射同剂量的生理盐水,记录两组心室重构、心肌细胞钙稳态、心律失常情况并进行相关性分析。结果：模型组建模第2周与第4周的左室舒张末期内径（LVEDD）、左室收缩末期内径（LVESD）值都高于对照组（P<0.05）。模型组建模第2周与第4周的血清肌钙蛋白（cTnT）含量高于对照组（P<0.05）。模型组建模第2周与第4周心脏体外牵张性心律失常持续时间都高于对照组（P<0.05）。Pearson相关分析显示建模第2周与第4周的LVEDD、LVESD、cTnT与牵张性心律失常持续时间存在正相关（P<0.05）。结论：房颤大鼠伴随有心室重构与心肌细胞钙离子的大量释放,可增加牵张性心律失常持续时间,相关性分析结果表明：心室重构、心肌细胞钙稳态和心律失常存在显著正相关性。     

黄芪甲苷抑制缺血再灌注诱导的大鼠心肌细胞凋亡

摘要 目的：本研究旨在探究黄芪甲苷（Astragaloside IV,Ast-IV）在缺血再灌注（ischemia-reperfusion,I/R）大鼠模型中的保护作用,并讨论黄芪甲苷在抑制I/R诱导心肌细胞凋亡过程中的作用。方法：通过左冠状动脉前降支结扎构建I/R大鼠模型;将40只SD大鼠分为4组：假手术组（Sham组）、模型组（I/R组）、黄芪甲苷干预组（Ast组）和黄芪甲苷+LY294002干预组（Ast+LY组）。使用试剂盒测定血清中心脏功能障碍标记物CPK、ALT、LDH和tropornin-T的表达水平;通过HE染色和TUNEL分别检测心肌组织病理学变化和心肌细胞凋亡情况;通过超氧化物荧光探针染色检测细胞内ROS水平;通过ELISA试剂盒测定心肌组织MDA、GSH和GSH-PX含量;免疫组织化学检测SOD2和HO-1蛋白表达水平,分析心肌氧化应激状态;通过Western blot检测PI3K、p-Akt、Akt、p-eNOS、eNOS、caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达水平变化。结果：Ast组大鼠血浆CPK、ALT、LDH和tropornin-T酶活性均明显低于I/R组（P<0.05）。Ast组大鼠心肌纤维断裂,心肌细胞坏死和炎性细胞浸润等病变程度均低于I/R组。Ast组大鼠TUNEL阳性细胞数低于I/R组（P<0.05)。相较于I/R组,Ast组大鼠Caspase3和Bax表达水平均明显下调,Bcl-2和PI3K蛋白表达水平上调,p-Akt/Akt和p-eNOS/eNOS比值均显著上调（P<0.05）。Ast组大鼠DHE荧光强度显著低于Ast+LY组（P<0.05）。与I/R组相比,Ast组大鼠心肌组织中MDA含量降低,GSH、GSH-PX、SOD2和HO-1表达水平升高（P<0.05）;与Ast组相比,Ast+LY组大鼠心肌组织中MDA含量升高,GSH、GSH-PX、SOD2和HO-1表达水平降低（P<0.05）。结论：黄芪甲苷通过激活PI3K/Akt信号通路,抑制心肌细胞氧化应激反应,从而减少I/R诱导大鼠心肌细胞凋亡,缓解I/R后大鼠心肌损伤。     

小蘖碱对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌梗死的保护作用

摘要 目的：揭示小蘖碱（BER）对异丙肾上腺素（ISO）诱导大鼠心肌梗死的保护作用及机制。方法：将100只SD大鼠随机分为5组（n=20）：对照组、ISO组、ISO+10BER（BER 10 mg/kg/d）、ISO+20BER（BER 20 mg/kg/d）和ISO+50BER（BER 50 mg/kg/d）。给药组大鼠按照指定的剂量灌胃BER,对照组和ISO组灌胃等体积无菌水,共灌胃2周。然后,除对照组之外,其他组大鼠皮下注射ISO（5 mg/kg/d）,对照组皮下注射等体积的0.9%无菌盐水,连续3 d。通过超声心动图检查大鼠的EF、FS、LVEDD和LVESD;苏木精和伊红（HE）染色评价心肌组织形态学;Masson三色染色用于评估心脏的间质纤维化;2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）法检测心肌梗死体积。Western blot检测心肌组织中collagen I、collagen Ⅲ、TGF-β1、TNF-α、Smad3、p-Smad3、NF-κB、α-SMA、Nrf2、HO-1、Bcl-2、Bax和caspase-3的表达。免疫组化评估间隙连接蛋白43(Cx43)的表达。使用试剂盒检测血清SOD、CAT和MDA表达水平。结果：与ISO组相比,BER预处理组大鼠的心肌梗死体积和LVEDD和LVESD显著降低,而EF和FS显著升高（P<0.05）。BER预处理组大鼠的纤维化标志物（collagen I、collagen Ⅲ和α-SMA）表达水平与ISO组相比显著下调（P<0.05）。与ISO组相比,BER预处理组大鼠的TGF-β1/Smad3信号通路和炎症因子（TNF-α和NF-κB）被抑制。BER预处理组大鼠的Cx43阳性染色评分显著高于ISO组（P<0.05）。与ISO组相比,BER预处理组大鼠的促凋亡蛋白（Bax和caspase-3）被下调,而抗凋亡蛋白Bcl-2被上调（P<0.05）。与ISO组相比,BER预处理组大鼠的MDA水平显著降低,而SOD和CAT显著升高（P<0.05）。BER预处理组大鼠的Nrf2和HO-1水平显著高于ISO组（P<0.05）。结论：在异丙肾上腺素诱导的心肌梗死大鼠模型中,小檗碱预处理可通过抑制心脏纤维化、炎症反应、心肌细胞凋亡和氧化应激损伤来减少心肌梗死体积并改善心脏功能。