阿魏酸在缺氧条件下促进人脐静脉内皮细胞血管形成的实验研究

目的:研究阿魏酸(ferulic acid,FA)在缺氧条件下对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖、迁移和管腔样结构形成的影响。方法:原代培养人脐静脉内皮细胞,在缺氧实验条件下,细胞被分为7组,即1个对照组和6个实验组。对照组采用1%酒精处理,实验组用不同浓度(1×10~(-8)、1×10~(-7)、1×10~(-6)、1×10~(-5)、1×10~(-4)及1×10~(-3) mol/L)的阿魏酸处理。分别采用MTS法、划痕法、Matrigel法分析不同浓度阿魏酸处理对人脐静脉内皮细胞的增殖、迁移和管腔样结构形成的影响。结果:缺氧条件下,浓度为1×10~(-6)~1×10~(-4)mol/L的阿魏酸处理能明显促进HUVECs的增殖(P0.05),以1×10~(-5) mol/L处理的效果最好(P0.01);与对照组相比,1×10~(-6)mol/L(P0.05)、1×10~(-5) mol/L(P0.01)及1×10~(-4) mol/L(P0.01)阿魏酸处理均能明显促进HUVECs横向迁移,以1×10~(-5) mol/L处理迁移的细胞数量最多;1×10~(-8)~1×10~(-4) mol/L阿魏酸处理能不同程度地促进HUVECs管腔样结构的形成,以1×10~(-5) mol/L处理形成管腔样结构的数量最多(P0.01)。结论:阿魏酸在缺氧条件下能促进人脐静脉内皮细胞的增殖、迁移和管腔样结构形成。     

乳房肥大乳腺组织中泌乳素及其受体的表达

目的:研究泌乳素(PRL)及其受体(PRLR)在乳房肥大和正常体积乳房中的表达情况,探讨乳腺组织中PRL、PRLR的表达与乳房肥大的相关性,为乳房肥大的治疗提供方向。方法:收集2013年1月~2013年4月第四军医大学西京医院26例乳房肥大患者和16例因单纯乳房下垂行乳房悬吊术患者的乳腺组织,采用免疫组织化学法检测乳腺组织标本中PRL和PRLR的表达。结果:PRL在乳房肥大组和正常体积乳房组乳腺组织中的阳性细胞率分别为88.46℅和56.25℅,两组比较差异有统计学意义(P0.05),且两组的PRL阳性的细胞面积、平均光密度值和累积光密度值均有统计学差异(P0.05)。乳房肥大组和正常体积乳房组乳腺组织中PRLR的阳性细胞率分别为76.92℅和75.00℅,两组比较无明显的统计学差异(P0.05),且两组间的PRLR阳性的细胞面积、平均光密度值、累积光密度值均无明显的统计学差异(P0.05)。结论:乳房肥大的发生可能与乳腺组织中泌乳素的表达升高有关,而与乳腺组织中泌乳素受体的表达无关。     

负压封闭引流术治疗犬胸壁全层缺损的实验研究

目的:探讨不同负压大小下的封闭负压引流术(vacuum sealing drainage,VSD)在治疗犬胸壁全层缺损创面愈合的效果。方法:25只健康成年犬的右胸壁制作3cm×4cm大小的全层缺损,随机分为5组,所有胸壁缺损处安装一次性封闭式负压吸引器,手动抽吸负压排出胸膜腔气体产生负压,致伤24小时后复查CT观察气胸情况;然后按照压力表显示调节负压至60kpa,40kpa,20kpa,10kpa,0kpa吸引胸壁,比较五组1d,3d,5d的伤口液体引流量,胸膜闭合时间;5d时伤口取材做HE染色及CD34免疫组化染色观察伤口愈合情况。结果:在60kpa和40kpa负压吸引下,1天引流液体量最多,分别为77.6±6.62 ml,77.8±4.97 ml;胸膜闭合最快,分别为3.2±1.30天,3.6±0.55天,但是60kpa组有一只犬血气分析显示为Ⅰ型呼吸衰竭;HE染色和CD34免疫组化染色显示各组均有肉芽组织增生及血管新生,且40kpa和60kpa负压组肉芽组织和血管密度明显多于其他组,二者之间无明显差异。结论:封闭负压吸引器对胸壁全层缺损创面有明显治疗作用,并且在40kpa负压下治疗效果最好而且安全。     

负压封闭引流对兔颅骨外露创面愈合效果的实验研究

目的:探讨负压封闭引流技术(VSD)对兔颅骨外露缺损创面愈合的治疗效果。方法:选取成年新西兰大白兔76只,平均分为四组并建立兔颅骨外露实验模型。其中,A组(19只):于兔颅骨上方制作直径为2.0cm的圆形创面,保留骨膜,采用-120mmHg负压引流和常规换药治疗;B组(19只):实验动物处理同A组,仅采用常规换药治疗;C组(19只):在兔颅骨上制作直径2.0cm的圆形创面,剔除骨膜,治疗方法同A组;D组(19只):实验动物处理同C组,治疗方法同B组。每组各抽取10只,观察创面愈合率和创面愈合时间;其余9只分别在第7天、10天、20天、30天进行取材检测,分析疗效机制。结果:A组创面愈合时间为19.40±1.65天,B组为24.00±2.31天;C组为25.40±4.43天,D组为30.00±5.50天。运用VSD治疗和常规治疗创面愈合时间比较有统计学意义(P0.05)。结论:VSD治疗兔骨外露缺损创面能有效缩短创面愈合时间,促进血管再生,胶原蛋白合成。     

不同剂量链尿佐菌素诱导2型糖尿病大鼠模型的研究

目的:探讨不同剂量链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)联合高糖高脂饮食对2型糖尿病大鼠模型建立的影响。方法:90只8周龄SD雄性大鼠随机平均分为六组:普通饲料喂养+缓冲液组、高糖高脂饲料喂养+缓冲液(H.E组)、高糖高脂饲料喂养+35mg/kg链尿佐菌素组(H.E+35 mg/kg STZ组)、高糖高脂饲料喂养+45 mg/kg链尿佐菌素组(H.E+45 mg/kg STZ组)、高糖高脂饲料喂养+55 mg/kg链尿佐菌素组(H.E+55 mg/kg STZ组)及高糖高脂饲料喂养+65 mg/kg链尿佐菌素组(H.E+65 mg/kg STZ组),高糖高脂饲料喂养4周后诱导胰岛素抵抗,继之腹腔注射STZ,建立2型糖尿病大鼠模型。检测体重、胰岛素、空腹血糖、血脂、胰岛素敏感指数(ISI)。结果:与常规饮食组相比,高糖高脂饮食各组大鼠出现空腹血浆胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)、血清甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)显著升高(P0.01),ISI显著下降(P0.01)。不同剂量STZ注射,H.E+45 mg/kg STZ组成模率最高且无自愈现象。结论:通过STZ腹腔注射联合高糖高脂饮食可成功复制出实验性2型糖尿病动物模型,45 mg/kg为STZ理想注射剂量。     

泌乳素及其受体的研究进展

泌乳素(PRL)又名催乳素,是由腺垂体及一些垂体外器官如乳腺、胸腺、脾脏等合成的一种多肽类激素,以内分泌、自分泌、旁分泌的形式发挥作用,其广泛参与机体生长发育、物质代谢、性腺功能调节、应激反应、免疫调节等。泌乳素通过与其受体(PRL receptor,PRLR)在靶细胞的细胞膜表面结合,激活下游的信号转导通路,发挥其生物学作用。由于泌乳素在人体内复杂的生物学效应,泌乳素及其受体又与乳腺癌、泌乳素瘤等多种疾病的发生发展及其预后密切相关。本文就泌乳素发挥效应时对其受体的激活、受体激活后的信号转导机制以及泌乳素同相关疾病的联系进行了综述,相信泌乳素及其受体的研究将为这些疾病的治疗提供重要的方向。     

游离皮瓣移植术后血运监测的研究进展

游离皮瓣移植已经成为修复重建外科常用的修复手段之一,其成功率已经超过95%,但微循环障碍的风险仍然存在,临床上皮瓣救助率与缺血时间呈负相关,因此游离皮瓣移植术后的血运监测至关重要。作者以"皮瓣"和"监测"为检索词在PubMed数据库检索出2000年1月到2014年1月期间关于游离皮瓣移植术后监测的相关文献,纳入标准为至少5篇以上的相关报道,通过分析相关文献概述当前主要的监测方法,从临床实用性、可靠性等方面分析其优缺点。     

咪喹莫特抑制兔耳瘢痕增生的机制研究

目的:研究咪喹莫特抑制兔耳瘢痕增生的作用及可能机制.方法:选取10只新西兰大耳白兔,雌雄不限,根据本实验室的改良方法建立兔耳瘢痕模型,每只兔耳腹侧做六个直径为1cm的圆形创面,每个相距1.5cm,双侧对称,左耳为实验组涂抹5％咪喹莫特软,右耳为对照组涂抹等量凡士林软膏,待术后14天上皮化均完全后开始涂抹,一日一次.分别于术后14天、21天、28天、35天及42天同一时间点空气栓塞随机处死2只兔子,后沿每个瘢痕边缘外周的0.5cm处环形切下,经瘢痕最凸点直径一切为二,一半固定后行苏木精-伊红(HE)染色及Masson三色法染色,观察形态学差异,测量并计算瘢痕增生指数(Scar elevation index,SEI):另一半用于提取RNA,反转录后行Real-time PCR检测细胞外基质I型胶原(Collagen-I,Col-I),细胞因子IFN-γ及IL-4的表达.结果:HE及Masson染色可见实验组胶原沉积较对照组明显减少,SEI显示空白对照组于术后第21天增生程度达到高峰,其增生程度明显高于实验组;Real-time PCR结果可见实验组Col-I及IL-4的表达在各时间点明显降低,且IFN-γ的表达较对照组增高.结论:咪喹莫特可能通过调节IFN-γ及IL-4的表达来发挥抑制瘢痕增生的作用.     

负压疗法的科学原理和运用

负压疗法(NPT,negative pressure therapy),也可称为封闭负压引流技术(VAC,vacuum-assisted closure),是用来促进伤口愈合的一种治疗方法。它既可以用于慢性复杂伤口的一期治疗,又可辅助临时关闭伤口及术前创口区的前期准备工作,如植皮术和皮瓣手术。虽然其作用的生理基础尚未得到完全阐释,但其临床效果已经被证明。我们在Pubmed-medline上选择基于随机临床试验、封闭负压引流技术和局部负压的相关研究进行分析。对来源于动物实验,随机临床试验,临床应用观察的科学数据进行评估,并对VAC治疗有影响的病案报道进行分析。系统的数据分析显示,负压疗法在诱导伤口的愈合,特别是在创面早期愈合发挥方面的作用是非常显著的。此外,数据分析表明负压疗法在抗感染治疗方面有积极作用。实验数据证明VAC在促进创口愈合方面是有效的,但是关于其作用机制仍不清楚。因为循证医学数据不能很好的解释临床治疗的良好效果,还需要进一步的随机、盲法研究。尽管如此,我们认为合理的使用负压治疗,特别是经验丰富的外科医生运用,是促进伤口愈合的一个很好的方法。     

咪喹莫特调节Th1、Th2细胞相关趋化因子表达抑制兔耳瘢痕增生

目的:免疫因素在增生性瘢痕的发生中起重要作用,本实验研究免疫抑制剂咪喹莫特对兔耳增生性瘢痕组织中辅助性T淋巴(Th)细胞亚群Th1、Th2细胞相关趋化因子CXCL10、CXCL12、CCL2、CCL3、CCL5、CCL7、CCL13表达的影响,探讨咪喹莫特抑制兔耳瘢痕增生的作用机制。方法:选取16只新西兰大耳白兔,雌雄不限。建立兔耳增生性瘢痕模型,每只兔耳腹侧做四个直径为1 cm的圆形创面,每个相距1.5 cm,双侧对称,右耳为咪喹莫特组涂抹5%咪喹莫特软膏,左耳为空白对照组涂抹等量凡士林软膏,待术后14天上皮化均完全后开始涂抹,一日一次,持续一个月。分别于术后第21、28、35、42、49、56、63天同一时间空气栓塞法随机处死2只兔子,收集所有瘢痕标本。另外处死2只健康兔并采集兔耳正常皮肤组织。所有标本行HE染色及Masson三色法染色,观察形态学差异;测量并计算瘢痕增生指数(Scar elevation index,SEI);行Real-time PCR检测CXCL10、CXCL12、CCL2、CCL3、CCL5、CCL7、CCL13的表达。结果:HE及Masson染色可见咪喹莫特组胶原沉积较空白对照组明显减少,SEI显示空白对照组于术后第28天增生程度达到高峰,其增生程度明显高于咪喹莫特组(P0.05);Real-time PCR结果可见咪喹莫特组Th2细胞相关趋化因子CCL2、CCL3、CCL5、CCL7及CCL13表达在各时间点较空白对照组明显降低,Th1细胞相关趋化因子CXCL10、CXCL12的表达在各时间点较空白对照组明显增高(P0.05)。结论:咪喹莫特可通过调节Th1、Th2细胞相关趋化因子的表达来发挥抑制兔耳瘢痕增生的作用。