放射受体测定及其应用的进展

近年来,关于受体的研究进展很快。1900年林赖(Langley)和埃利时(Ehrlish)提出活细胞存在着结合化学物质部位的假说后,生物学家、医学家对作用物和拮抗物作用的动力学研究证实活细胞接受激素、神经递质、药物、毒     

不育症精子乳酸脱氢酶同功酶LDHx活性测定及其定位研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、酶联染色、光密度扫描、分光光度法以及电镜酶细胞化学等方法 ,对 12例生育男性(生育组 )和 14例不育男性 (不育组 )精子 L DHx进行了研究。结果显示 L DHx电泳区带位于 L DH3和 L DH4之间 ,生育组精子 L DHx绝对活性和相对活性均高于不育组 (P<0 .0 5 )。相关分析表明精子密度与 L DHx绝对活性和相对活性均具有相关性 ,在生育组呈正相关 (r=0 .8和 0 .75 ,P<0 .0 5 ) ,在不育组呈负相关 (r=- 0 .76和 - 0 .78,P<0 .0 5 )。 L DHx酶细胞化学定位分析显示 L DHx酶反应颗粒主要分布于精子型线粒体 (STM)和胞质内 ,少量分布于顶体及质膜表面。生育组精子各部位酶反应颗粒多于不育组 ,且不育组精子多有畸形并伴有超微结构改变。上述研究分析提示 ,精子 L DHx活性测定与定位分析可作为检查不育症精子质量的可靠指标 ,为男性不育症的临床诊断提供实验依据     

马流产杆菌脂多糖终止小白鼠妊娠的初步研究

参照酚—水法从马流产杆菌中提取出脂多糖,其纯度达到参考标准品的要求。用它对早、中和晚期妊娠小鼠进行腹腔或尾静脉注射,每只小鼠(体重25—30克)注射剂量在5—30μg均能产生终止妊娠的效果,有效率达93—100%。每只注射剂量25和25μg以下的妊娠小鼠全部存活,无明显毒性反应,而30μg剂量的8只小鼠中有2只死亡。     

小鼠类胚胎干细胞分离培养及用于制作嵌合体小鼠的实验研究

目的探讨分离小鼠囊胚内细胞群类胚胎干细胞及用于制作嵌合体小鼠的方法及应用价值。方法分离3.5d小鼠囊胚内细胞群的类胚胎干细胞作为供体细胞,通过显微注射方法将分离的类胚胎干细胞注射到供体小鼠的囊胚腔中,再将注射后的囊胚移植到假孕雌鼠的子宫中制作嵌合体小鼠。结果分离36枚囊胚的内细胞群类胚胎干细胞,注射256只昆明小鼠囊胚中,移植32只假孕雌鼠子宫中,获产崽2窝,共12只,其中2只获毛色嵌合体小鼠。结论采用该技术分离所获得的类胚胎干细胞作为供体细胞制作嵌合体小鼠获得成功,该方法为ES细胞介导的转基因动物制作增添了一条新的途径,在同种不同品系的动物改良及遗传病基因治疗中有一定的应用价值,尤其是对未能建立ES细胞系的大动物的遗传工程操作具有一定意义。     

人地中海贫血β654基因作为外源基因用于转基因的制备方法

目的探讨人地中海贫血β654基因为外源基因用于转基因小鼠制作时,外源基因的制备方法,为进一步制作转基因小鼠打下基础。方法采用反向点杂交法确诊人地中海贫血β654纯合子DNA,以PCR法扩增获得人地中海贫血β654基因,分离纯化后,通过连接酶反应将其克隆入含βLCR调控序列的基础载体pBGT51质粒中,经PCR扩增、酶切、反向点杂交及DNA测序鉴定重组质粒,用EcoRⅤ酶切获得转基因所用的外源基因。结果将人地中海贫血β654基因作为外源基因克隆入基础载体pBGT51质粒中构建了重组质粒βBGT51,用EcoRV酶切获得含人β654基因及βLCR调控序列的6.5kb的DNA片段,制备了可用于显微注射转基因的外源基因。结论采用该方法构建的含人地中海贫血β654基因的重组质粒,可获得用于显微注射转基因的外源基因。