基因拷贝数对重组毕赤酵母产谷氨酰胺转胺酶的影响

基于毕赤酵母核糖体DNA序列 (rDNA),构建多拷贝谷氨酰胺转胺酶基因表达载体pPICZα-rDNA- mtg,并转化到表达前导肽 (Pro peptide或pro) 的宿主菌pGAP9-pro/GS115,得到共表达菌株pro/rDNA-mtg (GS115)。实时荧光定量PCR (qPCR) 分析了4株阳性表达菌株中mtg基因拷贝数,进一步研究了不同基因拷贝数对重组毕赤酵母产酶的影响及高产菌株在3 L发酵罐高密度发酵。结果表明,被检测的4株阳性表达菌株中mtg拷贝数分别为2.21、3.36、5.72和7.62 (mtg-2c、mtg-3c、mtg-6c和mtg-8c),其发酵产酶能力和蛋白质表达水平为mtg-3c>mtg-2c>mtg-6c>mtg-8c;高密度发酵较低和较高拷贝数的两株菌mtg-3c和mtg-6c,发酵上清的最高酶活和单位菌体酶活分别为3.12 U/mL、52.1 U/g湿重和2.07 U/mL、36.5 U/g湿重,其中单位菌体酶活mtg-3c是mtg-6c的1.4倍;mtg-3c纯化酶的最高酶活达到7.21 U/mL,蛋白浓度为437.2 μg /mL。通过分析拷贝数对重组毕赤酵母产酶的影响,发现mtg-3c适合pro/rDNA-mtg中pro和mtg共表达,MTG高酶活与菌株较高分泌蛋白有关。     

土曲霉（Aspergillus terreus）产生洛伐他汀（lovastatin）的研究

从土曲霉Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｔｅｒｒｅｕｓ ＣＡ９５１发酵液中,分离出一种白色针状晶体,经质谱、紫外光谱、红外光 谱和核磁共振谱分析,与文献报道的洛伐他汀（ｌｏｖａｓｔａｔｉｎ）基本一致。 Ａ．ｔｅｒｒｅｕｓ　 ＣＡ９５１经亚硝基胍诱变,选出 编号为ＣＡＮ １８７的突变株,其产生洛伐他汀的能力比ＣＡ９５１高６６％。摇瓶发酵实验研究了不同碳源、氮源和 水质对 ＣＡＮ１８７ 菌株产生洛伐他汀的影响,并进行了 ５００Ｌ发酵罐实验,发酵单位达９００ｍｇ／Ｌ左右。     

全球转基因大豆专利信息分析与技术展望

转基因大豆作为目前转基因作物推广种植面积最广的作物,在保障人类油料与饲料供给上发挥着重要作用。基于智慧芽数据库(PatSnap)对欧盟、美国及中国等国家地区1985~2016年收录的全球转基因大豆技术领域专利文献进行统计分析,得出全球转基因大豆专利信息的总体发展趋势、研发热点及技术分布与格局,并对比分析了我国转基因大豆研发的竞争力,对未来转基因大豆的产业发展提出了展望。     

基于创新型人才培养的《生物化学与分子生物学》立体化教学的探索与实践

以创新型人才培养为目标,对《生物化学与分子生物学》立体化教学模式进行初步的探索与实践。从理论教学、实验教学和教学评价等方面进行了改革和探索,探索了"教学内容模块化,课堂教学聚焦核心概念,信息技术用于拓展和补充课堂教学,实验教学的实用性、应用性和创新性设计,多元化教学评价体系的构建"等教学改革措施。通过在生物制药技术专业开展立体化教学探索的实践,证实立体化教学对培养学生的综合能力和激发学生的创新意识有显著的促进作用。     

提高订单班岗位职业能力的基因工程实验教学

校企合作订单班的基因工程实验教学,根据工作任务确定教学内容,在实验教学中采用三元模式,即技能分解模式、差异化教学模式、任务驱动模式进行职业技能的训练,同时突出细致、严谨、耐心、善于比较、分析等良好职业素养的培养,实践证明这样的方式有利于培养学生扎实的实践操作技能,提高职业能力,企业满意度高。     

三菌混合固态发酵产纤维素酶

以稻草粉和麸皮为主要原料,对白腐菌(White-rot fungi) NS75、黑曲霉(Aspergillus niger)NS83和絮凝酵母(Saccharomyces cerevisiae)SP5混合菌固态发酵产纤维素酶进行研究.实验结果显示,在白腐菌和黑曲霉双菌混合培养2d后接入絮凝酵母,培养到第7d产酶达到峰值;三菌混合发酵产纤维素酶酶活明显高于白腐菌和黑曲霉双菌混合培养,其β-葡萄糖苷酶(β-G)和羧甲基纤维素酶(CMCase)酶活比白腐菌(White-rot fungi) NS75和黑曲霉(Aspergillus niger)NS83双菌发酵产酶分别提高了143.3％和68.2％.单因素实验和正交实验结果表明,当稻草粉麸皮质量比为8∶2,料水比为1∶2,白腐菌NS75、黑曲霉NS83和絮凝酵母SP5的接种比例为1:2∶1.5 (v/v/v)时,于30℃培养7d,固态发酵基中β-G和CMCase酶活分别达到62305 U/g和30241 U/g.