圆红冬孢酵母的密码子用法分析

运用CodonW等软件,分析了圆红冬孢酵母Rhodosporidium toruloides基因组中191个蛋白质编码基因的密码子使用模式,包括密码子3个位置上的GC含量、有效密码子数和密码子使用频率。圆红冬孢酵母有效密码子数ENc值为38.9,密码子GC含量为63%,密码子第三位GC含量为78.3%,且偏好使用G或C结尾的密码子,确定了圆红冬孢酵母R. toruloides的21个高表达优越密码子。研究发现,圆红冬孢酵母与毕赤酵母、酿酒酵母、大肠杆菌和拟南芥在密码子使用频率上有较大差异,而与解脂耶氏酵母和果蝇差异相对较小。研究结果对提高外源基因在圆红冬孢酵母中表达效率及相关代谢工程和合成生物学研究有一定意义。     

圆红冬孢酵母磷酸盐饥饿诱导表达载体的构建

摘要:【目的】建立一种适用于圆红冬孢酵母代谢工程的磷酸盐饥饿诱导表达系统。【方法】对圆红冬孢酵母pho89基因5'侧翼序列进行生物信息学分析,设计相应引物,PCR扩增pho89基因启动子(pPHO89)和hsp70基因终止子(tHSP),利用RF克隆方法置换出发载体上的pPGK组成型启动子和tNOS终止子,以潮霉素磷酸转移酶基因hyg为报告基因,得到响应磷酸盐饥饿诱导的单表达盒载体pZPK-pPHO89-hyg-tHSP,利用ATMT方法转化圆红冬孢酵母,通过转化子潮霉素抗性表型鉴定pPHO89和tHSP的启动子和终止子活 性。在此基础上,构建了适合外源基因表达的双表达盒诱导表达载体pZPK-HYG-pPHO89-MCS-tHSP,并利用该载体构建了苹果酸酶重组表达菌株。【结果】成功构建了响应磷酸盐饥饿的圆红冬孢酵母诱导性表达载体,该载体在圆红冬孢酵母中可表现出启动子和终止子活性。【结论】该启动子受磷酸盐浓度的严谨调节,响应度高,操作简单,无需额外诱导剂,经济便捷,为后续圆红冬孢酵母代谢工程研究提供了基本材料。     

上海市老年护理供需测算与长期护理制度建设研究

目的 了解上海市老年人口的健康状况及老年护理供给和需求的影响因素,测算目前及2015年存在的床位缺口,提出构建与人口老龄化相适应的老年护理服务体系建设的政策建议。方法 通过理论研究、文献归纳、现场调研、焦点组访谈等定量和定性相结合的研究方法,对上海市老龄人口护理服务供给和需求现状进行评估。结果 上海老年护理机构存在的主要问题：老年护理院亏损严重,运营不佳;老年护理院功能定位不清,服务项目有待完善;床位周转率极低,“压床”现象严重。结论 多渠道筹资,合理配置卫生资源,推进多层次老年医疗护理服务体系;建立护理分类支付制度,引导良性就医;发展以家庭为基础的社区长期保健;多层次培养老年护理人才。     

三级医院医疗质量评价指标体系的构建及优化

目的 在原有医疗质量评价体系的基础上,建立一套科学合理、可操作性强的三级综合性医院医疗质量评价指标体系。方法 采用典型研究方法,通过文献研究筛选初始指标,通过知情人访谈法确定质量评价框架,运用德尔菲法并借鉴平衡积分卡的原理和思想优化并确定指标及权重系数。结果 确定了以医疗基础质量、环节质量和终末质量为基本结构的三级综合性医院质量评价框架和指标体系,由3个一级维度、8个二级维度、24个三级维度指标体系及其相应权重。结论 医疗质量评价指标体系关注医院质量管理中的难点和重点环节,能够满足上海市三级综合性医院医疗质量管理的实际需要。