hhlim基因转录调控区域鉴定及表达调控的初步研究

为了研究hhlim基因表达调控机制,对该基因5′上游－2 537 bp序列从5′端依次进行缺失后,利用荧光素酶报告基因检测各种不同长度片段在C2C12细胞中驱动荧光素酶表达的活性.结果表明,在hhlim基因5′上游－2 537～－1 537 bp之间存在负调控元件,在－253～－157 bp之间含有增强子样序列.用含有增强子样序列的DNA片段做探针,对未分化型和分化型C2C12细胞的核蛋白进行电泳迁移率改变分析(electrophoretic mopility shift assay, EMSA).分析的结果显示,两种表型细胞中的核蛋白与探针结合所形成滞后带的谱型明显不同.结果还发现内皮素-1(ET-1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)既能显著诱导C2C12细胞对hhlim的表达,也能刺激含增强子样序列的调控区域所驱动的报告基因表达.提示hhlim基因转录起始点至－2 537 bp的区域内含有负调控元件及增强子样序列,该基因的表达受ET-1和bFGF的调节.     

周爱儒、查锡良主编医学专业教材《生物化学》(第五版)出版

由北京大学医学部周爱儒教授、复旦大学医学院查锡良教授主编的全国高等医药院校规划教材《生物化学》第五版已于 2 0 0 0年 1 0月由人民卫生出版社出版 .本教材是根据卫生部医学专业教材评审委员会精神修订和编写的面向 2 1世纪课程教材 .与第四版比较 ,第五版教材主要在以下两方面做了调整 :(1 )适当精简部分繁琐代谢过程的描述 ,加强分子生物学的有关内容 .(2 )反映医学特点 ,加强与医学的联系 ,区别于综合性大学教材 .本教材由全国 1 1所高等医学院校的十二名生物化学教授参与编写 ,适合五年制和七年制医学各专业本科生使用 .全书分四篇…     

一种新的内皮细胞生长因子──VEGFB

一种新的内皮细胞生长因子──ＶＥＧＦＢ以前的研究表明血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＦＧＦ）特异地作用于血管内皮细胞,强烈地促进内皮细胞的分裂增殖,在新血管形成中起重要作用。最近Ｏｌｏｆｓｓｏｎ等又...     

球囊拉伤兔髂动脉内膜的组织形态变化的研究

球囊拉伤血管内膜是目前研究血管内膜增厚,管腔狭窄的方便而切实的模型。因此,对其演变过程的形态学研究是必要的。方法：应用ＰＴＣＡ球囊导管拉伤兔髂动脉,用光镜、电镜和扫描电镜观察拉伤后不同时间的动态变化。结果：拉伤后各期变化不同,拉伤后１周内,以血细胞沉积为主,１周后,内膜开始增生,２至４周增生最快。增生活跃的内膜平滑肌细胞来自活化的中膜平滑肌细胞。内皮细胞增生极慢,４周内未见内膜内皮化,呈虫食样改变。结论：球囊拉伤兔髂动脉内膜,可引起血栓形成,炎症反应,平滑肌细胞增生和细胞外基质堆积,导致血管腔狭窄。此研究为今后的工作提供一定的客观依据     

同型半胱氨酸对大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用

血中同型半胱氨酸（ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ,ＨＣＹ）浓度的升高已成为动脉粥样硬化发生的一个独立危险因子．为进一步阐明ＨＣＹ促进血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｓ,ＶＳＭＣｓ）增殖,从而引起动脉粥样硬化发生的机理．本实验采用细胞计数、３Ｈ－ＴｄＲ参入、细胞周期分析、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交方法证明,一定剂量的ＨＣＹ可促进离体培养的ＷＫＹ大鼠血管平滑肌细胞增殖,使其ＤＮＡ合成增加,细胞周期中Ｓ期细胞所占比例增加４３％,并促进ｃ－ｍｙｃ与ｃ－ｆｏｓ原癌基因ｍＲＮＡ表达增加．提示ＨＣＹ可能通过促进ＶＳＭＣｓ增殖而诱发动脉粥样硬化     

血管内皮生长因子基因对兔髂动脉内膜损伤的组织形态变化过程的影响

探讨血管内皮细胞的特异丝裂原－血管内皮生长因子（VEGF）基因阻止血管内膜损伤后形成再狭窄的组织变化过程。建立球囊拉伤血管内膜的兔髂动脉模型,将携带VEGF目的基因的真核表达载体pcDNA3/VEGF经多聚赖氨酸处理的PTCA球囊导管导入拉伤的血管内膜。VEGF基因组拉伤2周时血管内壁有VEGF mRNA和蛋白的高表达。血管内膜内皮化较快。2周时即有许多血管内皮细胞呈岛状分布。4周时内膜基本恢复光滑。内膜平滑肌细胞增生明显减少,而对照组2周时血管内膜粗糙,基底膜暴露,拉伤后4周仍无内皮细胞再生,最后形成虫蚀样改变。血管中膜平滑肌细胞穿过内弹性膜进入内膜并大量增生,内膜增厚。VEGF基因定位导入血管内壁后。VEGF mRNA和蛋白高表达且发挥其生物学效应,内皮细胞岛状增生,加快内膜内皮化,减轻内膜增厚。     

~3H-TdR放射线转化C3H/10T1/2细胞株转化生长因子α的研究

本文通过斑点印渍杂交技术和放射免疫分析方法,首次证实,~3H-TdR放射线转化C3H/10T1/2细胞株可高表达TGFα mRNA,并可向细胞外分泌具有免疫活性的TGFα分子,而非转化对应细胞中虽有TG FαmRNA的弱表达,但其无血清培养上清中未测到TGFα的分泌。表明TGFα参与了放射线对细胞的转化以及维持转化细胞增殖的过程。提示TGFα在三大致癌因素转化细胞中的存在可能具有普遍意义。同时,c-myc与c-fos两种癌基因mRNA在转化细胞中的表达水平显著高于非转化对应细胞,而c-sis癌基因mRNA的表达水平在两种细胞中无显著差异。     

hhlim促进DMSO诱导的P19细胞向心肌分化

为了确定hhlim是否参与胚胎期的心肌分化和发育过程,用可表达hhlim蛋白和hhlim反义RNA的真核表达质粒转染P19胚胎干细胞,经G418筛选得到稳定表达hhlim和hhlim反义RNA的P19细胞克隆后,观察hhlim对P19细胞向心肌分化和发育的影响.结果显示,Nkx2.5和GATA-4在未被外源性hhlim基因转染的P19细胞中不表达.DMSO刺激细胞2天后,GATA-4开始表达,3天后Nkx2.5的表达活性显著升高.hhlim的过表达不但有利于P19细胞的存活和生长,而且还可以使Nkx2.5和GATA-4的表达比对照细胞提前1天.反义hhlim细胞株被DMSO诱导5天后,细胞仍呈集落化生长.同时,Nkx2.5和GATA-4开始表达的时间明显延滞.结果表明,hhlim能促进P19细胞向心肌细胞分化,其作用是通过促进转录因子GATA-4和Nkx2.5的表达而实现的.     

组织细胞一氧化氮含量测定的几种方法

一氧化氮(nitric oxide,NO)是一种新型的细胞信使分子,它在调节心血管系统、神经系统和免疫功能方面起着重要的作用.测定组织细胞 NO 的含量对于探讨NO 的生理功能具有重要的意义.该文简要介绍了应用化学发光法、微盘测定法、放射强度测定法和分光光度法检测组织细胞 NO 的含量.