肿瘤抑制基因ARHI的研究进展

ARHI是Ras超家族中第一个被报道的肿瘤抑制基因,定位于人染色体lp31,属小GTP结合蛋白,与Ras拥有相似的GTP／GDP结构域,却具有抑癌作用。ARHI是母源性印迹、父源性表达,可参与细胞周期调控和信号通路转导,从而负向调节细胞生长。在正常人类多种组织中都存在ARHI基因的表达,但在肿瘤组织中其表达却下调。ARHI的表达异常可能与印迹基因的杂合性丢失,DNA甲基化和染色体乙酰化修饰等转录水平的调节失常有关。     

土壤中拮抗菌株铜绿假单胞菌HBD-12次级代谢产物的分离鉴定及其体外抗菌抗肿瘤活性检测

为从土壤中筛到具有抗菌和抗肿瘤等生物活性的菌株,以孕烯醇酮作为唯一碳源进行筛菌,经分子生物学鉴定及菌株发酵液抑菌活性测定,发现一株铜绿假单胞菌HBD-12对大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌、指状青霉、意大利青霉具有较好抑菌效果。运用柱层析法分离纯化该菌株发酵液成分,采用波谱法解析所得单体化合物结构,并使用HTRF激酶检测试剂盒测定其抗肿瘤活性。结果显示：分离得到的单体化合物1-羟基-9,10-二氮杂菲和3-羟基-9,10-二氢二氮杂菲均具有显著的抗肿瘤活性。在浓度为20 μg/mL时,1-羟基-9,10-二氮杂菲和3-羟基-9,10-二氢二氮杂菲对Aurora激酶A的抑制率分别为78.39%±2.29%和60.34%±8.35%。由此可见该菌株的次级代谢产物对新型抗菌、抗肿瘤药物的研发具有很好的利用价值。     

垃圾堆积点土壤中广谱拮抗菌株的分离鉴定及抑菌特性

[目的]从积年垃圾堆积点土壤中筛选具有高效抑菌能力的广谱拮抗菌株并研究其抑菌特性,寻找乡镇垃圾堆积点污染治理的新思路。[方法]采用平板稀释法和管碟法从乡镇积年垃圾堆积点的土壤中分离拮抗真菌,并通过形态观察、生理生化特性及分子生物学鉴定分析对拮抗菌株进行鉴定。通过测定抑菌活性物质的极性,选择合适的有机试剂对拮抗真菌的发酵菌体甲醇浸提物及发酵液进行萃取,并利用TLC-Bioautography法对发酵液及发酵菌体中的抑菌活性组分进行分析。使用23种指示菌测定拮抗真菌DAZ-2的发酵菌体乙酸乙酯粗提物的抑菌广谱,测定粗提物在高温、酸碱、紫外和自然光条件下抑菌能力,以及对大肠杆菌和白色念珠球菌的最小抑菌浓度。[结果]分离得到一株传代稳定的广谱拮抗真菌DAZ-2,经过形态观察、生理生化特性测定及ITS序列分析,菌株鉴定为Aspergillus fumigatus。通过极性测定,选择乙酸乙酯对烟曲霉DAZ-2发酵菌体甲醇浸提物及发酵液进行萃取,TLC-Bioautography法分析表明两者中的抑菌活性物质不是同一组分,且存在多组分物质共同作用产生抑菌效果的可能性;菌体浸提物乙酸乙酯萃取部分(200μg/mL)对11种指示菌具有抑菌效果,对大肠杆菌和白色念珠球菌的MIC为7.50μg/mL和15μg/mL,且对高温、酸碱、紫外、自然光照都具有较强的稳定性。[结论]分离得到一株高效抑菌且传代稳定的广谱拮抗菌株烟曲霉DAZ-2,有希望为微生物药物的开发和乡镇垃圾堆积点污染治理提供科学依据。     

榕树根际土壤广谱拮抗菌株的筛选、鉴定及特性

于江西省吉安市内一株明万历年间植下的古榕树下,采集根际土样并使用23种指示菌通过管碟法和菌丝生长速率法对土壤内放线菌进行拮抗筛选,最终得到一株传代稳定的广谱拮抗菌株AHF-20.根据对菌株的形态观察、生理生化特性以及分子生物学鉴定,将该拮抗菌株鉴定为链霉菌,并对该菌株的抑菌活性物质进行了研究.结果表明:链霉菌AHF-20的发酵产物对23种测试指示菌全部具有拮抗效果,且抑菌能力稳定性较好,对温度、光照、紫外线、酸碱都有一定的耐受性,于121 ℃下加热20 min后依然存在抑菌活性.根据活性物质的极性使用正丁醇萃取发酵产物,获得的正丁醇粗提物稀释至1 μg·mL^-1后,对大肠杆菌仍有抑制效果,可见具有较好的生防利用潜力和开发成新型微生物药物的可能性.     

决明草内生真菌拮抗菌株筛选鉴定及桔青霉ZH-11抗菌物质分析

[背景] 由于抗生素的滥用，导致“超级细菌”出现，寻找新的抗菌药物将有效地应对细菌耐药问题，因为大多数抗菌药物都是从微生物中发现的，所以药用植物内生真菌的研究拓宽了药用资源，并且具有巨大的应用价值。[目的] 对采自江西九江庐山植物园的决明草进行内生真菌分离，筛选出拮抗菌株，并对拮抗菌株的次级代谢产物进行分离，分析其抗菌物质理化性质，为新型抗菌物质的研究提供基础数据。[方法] 用管碟法筛选拮抗菌株，并根据形态学特征和分子生物学的方法鉴定菌株，采用硅胶柱层析、葡聚糖凝胶LH-20柱层析和RP-C18柱层析对其次级代谢产物进行分离，并用液质联用（高分辨飞行时间质谱）和能谱仪分析所得抗菌物质的分子量和分子式。[结果] 筛选到一株广谱拮抗活性菌株桔青霉ZH-11，通过管碟法显示其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、苏云金芽孢杆菌、水稻黄单胞菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、白色念珠菌、蜡样芽孢杆菌这8株指示菌均有较好的抑菌效果。从桔青霉ZH-11次级代谢产物中分离得到纯化合物Y3，其分子量为410.169 1，分子式为C₂₄H₂₆O₆。当Y3浓度为10 μg/mL时，其对大肠杆菌和苏云金芽胞杆菌的抑菌圈直径分别为16.23 mm和17.27 mm。[结论] 菌株桔青霉ZH-11的活性物质与已知的来源于桔青霉类的抗菌活性物质不同，该研究结果为进一步挖掘桔青霉属的活性产物奠定基础，同时丰富了人们对决明草内生真菌的认识。