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2.
颜青 《生物物理学报》1996,12(3):404-408
用不同浓度的变性剂盐酸胍、脲、十二烷基硫酸锂(LDS)对无花果蛋白酶(Ficin)变性,用荧光光谱及圆二色谱(CD谱)监测无花果蛋白酶去折叠过程中的构象变化并与活力变化比较,发现在1-2mol/L胍浓度及9.2×10-4mol/LLDS浓度条件下,CD谱显示的二级结构含量较高,荧光谱的发射峰位刚开始红移,活力的变化则较为显著,表现为胍溶液中激活,LDS溶液中失活,揭示酶的这二种变性剂的这二个浓度范围内,可能存在变性中间态。  相似文献   
3.
Palczewsski等[1]以邻苯二甲醛修饰醛缩酶活性部位的氨基和流基以形成一异蚓噪环,利用该基团的荧光特性来探测醛缩酶的活性部位构象,Weq[2],Le[3]并成功地运用这一方法研究肌酸激酶和酵母乙醇脱氢酶的活性部位构象变化.中华猕猴桃蛋白酶的唯一游离流基(CyS-25)是催化功能团【'」,而且氨基也是活性部位的必需基因【到,符合邻苯二甲醛的反应性,所以我们借鉴Pal_ski等的方法【1]将这一荧光基因引人中华猕猴桃蛋白酶,用以探测该酶在抓溶液中活性部位的构象变化,并与相应的活力变化以及酶的内源荧光及CD谱变化作比较.1材…  相似文献   
4.
无花果蛋白酶在胍溶液中的分子折叠与活力变化研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
本文研究无花果蛋白酶(EC.3.4.4.12)在不同浓度盐酸胍溶液中分子构象与活力变化关系。酶的内源荧光光谱,圆二色光谱与酶活力的变化表明:荧光光谱呈现二个明显的变化区域,低浓度胍(低于2mol/L)中,荧光发射峰基本不变,但荧光强度随胍浓度上升,随胍浓度断续增大(高于2mol/L),酶的最大发射波长明显红移。当胍浓度低于1mol/L时,不仅不会使酶失活,反而使酶激活,当胍浓度高于1mol/L以上  相似文献   
5.
本文研究无花果蛋白酶(EC.3.4.4.12)在不同浓度盐酸胍溶液中分子构象与活力变化关系。酶的内源荧光光谱,圆二色光谱与酶活力的变化表明:荧光光谱呈现二个明显的变化区域,低浓度胍(低于2mol/L)中,荧光发射峰基本不变,但荧光强度随胍浓度上升,随胍浓度断续增大(高于2mol/L),酶的最大发射波长明显红移。当胍浓度低于1mol/L时,不仅不会使酶失活,反而使酶激活,当胍浓度高于1mol/L以上时,酶逐渐失活,使酶完全失活的胍浓度为6mol/L酶的圆二色光谱也随着胍浓度的改变而发生复杂的变化。将荧光变化,CD谱变化及活力改变结合起来,表明活力的激活与构象的明显变化似是同步发生的,从另一角度进一步说明酶活性部位柔性是充分表现酶活力所必需。  相似文献   
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