芽胞杆菌B13解养分效果研究

目的评价芽胞杆菌B13的功能。方法通过培养基及土壤培养分析其解钾、解磷的效果。结果芽胞杆菌B13培养7d后液体培养基中的有效磷含量（0．94μg／mL）比对照组（0．75μg/mL）增加25．33％,有效钾含量（0．54μg/mL）比对照组（0．31μg／mL）增加74．19％,解磷和解钾差异均有统计学意义（P〈0．01）。芽胞杆菌B13添加在灭菌土壤和不灭菌土壤中都具有明显的解磷、解钾功效,说明芽胞杆菌B13有较好的土壤定植能力。平板解磷试验证明芽胞杆菌B13同时具有解无机磷和有机磷的功效。结论芽胞杆菌B13具有很大的研究与开发价值。     

益肾填精中药拮抗环境内分泌干扰物引致青春前期大鼠性腺发育不良的作用机制

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexylphthalate,DEHP)及氯氰菊酯(cypermethrin,CYP)是我国广泛存在的两种环境内分泌干扰物(environmental endocrine disruptors,EEDs),具有显著的抗雄激素活性及生殖毒性,可致雄性性腺发育不良.祖国传统医学认为,性腺发育不良属肾精亏虚、肾气不足,临床采用益肾填精中药治疗取得显著疗效,但其具体机制尚不清楚.本实验主要研究益肾填精中药拮抗EEDs——DEHP及CYP引致青春前期大鼠性腺发育不良的作用机制.实验中染毒组分别饲喂500 mg/kg DEHP,80 mg/kg CYP及500 mg/kg DEHP+80 mg/kg CYP,治疗组采用40 mg/kg益肾填精中药与相应染毒物质同时饲喂.研究结果显示,DEHP、CYP单独及联合染毒组的青春前期大鼠睾丸重量、睾丸系数及血清睾酮水平均显著下调;睾丸氧化应激指标MDA含量、GSH-Px活性明显上升;病理组织及超微结构显示睾丸形态萎缩;睾丸支持细胞功能相关的基因与蛋白表达均出现不同程度的下调.益肾填精中药治疗干预后,睾丸重量、睾丸系数及血清睾酮水平均显著增加并接近对照组水平;睾丸形态明显改善,细胞数量增加;睾丸氧化应激水平下降;实时荧光定量PCR及Western印迹显示睾丸支持细胞功能相关的基因与蛋白的表达水平显著上调.本研究证实,益肾填精中药对DEHP及CYP的抗雄激素活性及生殖毒性有显著拮抗作用,可明显拮抗染毒物质诱导的氧化应激作用,促进睾酮分泌,并改善睾丸支持细胞功能,这可能是益肾填精中药有效拮抗EEDs抗雄激素活性及其生殖毒性的主要作用机制之一.     

大肠杆菌L-色氨酸合成的代谢流分析简

目的：从代谢流的层面研究育种过程中基因操作对色氨酸积累的影响,为色氨酸菌种选育的设计思路提供理论指导和验证。方法：根据实验菌株的代谢特点构建￡一色氨酸代谢网络图,对出发菌株TRTH0709,及其重组菌株TRTH1013、TRTH1105和TRTH1107在30L发酵罐中进行分批流加发酵试验,在发酵进入稳定期后的26．28h,分别检测主要胞外代谢物的浓度并计算变化速率。结果和结论：得到了各菌株在拟稳态下的代谢流分布图。转酮酶基因（tktA）和磷酸烯醇式丙酮酸合成酶基因（ppsA）过表达能显著影响中心代谢途径,使代谢流向有利于色氨酸合成的方向改变,贮碳因子基因（csrA）敲除的影响较小,但在tktA和ppsA过表达质粒存在的情况下对色氨酸合成的代谢流有明显的促进作用。进一步的菌种改造仍有待进行,葡萄糖转运系统的替代和三羧酸循环的减弱是主要方向。     

隐花素在生长素调控拟南芥下胚轴伸长中的作用分析

以拟南芥野生型(Col-4)和隐花素双突变体cry1cry2为材料,研究不同光照条件下不同浓度吲哚乙酸(IAA)和IAA极性运输抑制剂氨基酞氨酸(NPA)对幼苗下胚轴伸长的影响。结果显示,低浓度IAA(10-7mol/L)可促进连续白光和红光下cry1cry2幼苗下胚轴伸长,而连续蓝光下cry1cry2下胚轴的伸长则受到抑制。蓝光下相同浓度的NPA对cry1cry2幼苗下胚轴伸长的抑制程度比野生型要小。RT-PCR分析结果显示,瞬时蓝光处理时IAA合成关键酶基因IGPS以及生长素应答基因IAA1和IAA5在cry1cry2突变体中的转录水平比野生型中要高。这表明隐花素可能部分通过调节IAA合成和/或IAA极性运输,介导蓝光调控拟南芥下胚轴的伸长。     

中国汉族apoB 基因EcoRI、XbaI、MspI、Ins/Del 及3''端VNTR 位点的多态性研究

目的:apo B基因多态性对群体遗传学、心血管疾病等研究领域有着重要的价值,本文分析了中国汉族人群中apoB基因EcoRI、XbaI、MspI、Ins/Del及3’端VNTR等5个多态性位点的等位基因频率分布,为相关研究提供基础资料。方法:应用PCR-RFLP技术分析EcoRI、XbaI、MspI等3个位点的多态性分布,应用常规PCR方法分析Ins/Del及3’端VNTR等2个位点的多态性分布。结果:1人群中EcoRI位点有E+及E-两种等位基因,基因频率分别为87.1%和12.9%;XbaI位点有X+及X-两种等位基因,基因频率分别为6.1%和93.9%;MspI位点有M+及M-两种等位基因,基因频率分别为97.1%和2.3%;Ins/Del位点有Ins及Del两种等位基因,基因频率分别为70.7%和29.3%;3’端VNTR位点有16种等位基因,其中以HVE34与HVE36最为常见,频率分别为33.4%与21%。2连锁不平衡分析表明,5个位点间除XbaI与Ins/Del间存在较弱的连锁不平衡(D’=0.911,r2=0.175),其余点位间无显著连锁不平衡。结论:数据比对表明,5个多态性位点的基因型和等位基因频率存在民族、种族差异,因此在apo B基因相关研究中应充分考虑遗传背景造成的影响。     

辛伐他汀对雷帕霉素作用下心肌微血管内皮细胞的影响

目的:研究辛伐他汀(SIM)对雷帕霉素(RAPA)引起的体外心肌微血管内皮细胞(CMECs)损害的保护机制。方法:分离、培养大鼠心肌微血管内皮细胞。经形态学及Dil-ac-LDL吞噬试验进行鉴定后,采用RAPA(100 nM)处理24小时建立CMECs损伤模型,然后加入不同浓度的SIM(0,10-2,10-1,100,101μM)培养24小时后,采用MTT,WST-8及Transwell检测受损后CMECs的增殖和迁移;采用Hoechst 33258及Caspase-3检查各组CMECs的凋亡;采用蛋白免疫印迹(Western blotting)检测Akt/p70 S6K磷酸化的程度;格里斯反应及实时逆转录PCR分别检测一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达。结果:①经形态学及Dil-ac-LDL吞噬试验均表明,成功培养CMECs;②低浓度SIM 100μM可显著改善100 nM RAPA对CMECs增殖、迁移和凋亡的影响;③SIM可通过上调PI3K/Akt进而上调p70s6K磷酸化(P0.05或P0.01);④SIM通过PI3K/Akt促进CMECs分泌NO及eNOS mRNA的表达(P0.05或P0.01)。结论:一定浓度下的SIM可改善RAPA作用下CMECs的增殖,迁移和凋亡,这些保护作用可能是通过其激活PI3K/Akt/mTOR/p70S6K信号通路实现的。     

肛提肌外腹会阴联合切除术治疗低位进展期直肠癌的临床研究

目的:探讨肛提肌外腹会阴联合切除术(ELAPE)在低位进展期直肠癌中的应用。方法:回顾性分析2011年1月至2013年12月我院胃肠外科30例接受ELAPE和18例接受传统腹会阴联合直肠癌切除术(APR)的低位直肠癌病人的临床资料,通过对手术用时、失血量、术中穿孔发生率、术后住院时间、术后并发症以及出院后随访相关指标等的比较来分析ELAPE的可行性。结果:和APR相比,ELAPE治疗低位直肠癌可降低术中直肠穿孔和CRM阳性的发生率,术后会阴部切口愈合延迟率以及出院后肿瘤局部复发、远处转移以及患者死亡的发生率,差异均有统计学意义(P0.05)。行ELAPE术的手术时间、术中出血量、平均住院天数,术后引流管拔管时间、尿潴留发生率以及出院随访的骶尾部不适率均稍大于行APR术的患者,但差异均尚无统计学意义(P0.05);进行两种手术的患者住院两组间围手术期死亡病例、会阴部血清肿的发生率、肠梗阻发生率、造口问题发生率以及出现并发症的情况差异不大(P0.05)。结论:和APR相比,ELAPE治疗低位进展期直肠癌可降低术中肠管穿孔发生率、CRM阳性率和住院期间发生会阴部切口愈合延迟率,短期随访预后良好,有望成为治疗进展期低位直肠癌的推荐术式。     

腹腔镜与开腹直肠癌全直肠系膜切除治疗直肠癌临床疗效

目的:探讨腹腔镜与开腹直肠癌全直肠系膜切除治疗直肠癌的临床疗效。方法:选择我院2012年12月~2013年12月行腹腔镜直肠癌根治术(A组)和开腹直肠癌全直肠系膜切除术(B组)的患者,各40例,比较两组患者手术时间、肠道排气时间、住院时间、术后下床时间、术后并发症和标本病理情况。结果:1相比B组,A组手术时间较长,术中出血量少,肠道排气时间短,住院时间短,术后下床活动时间短,术后并发症发生率低,差异有统计学意义(P0.05)。2A、B两组淋巴结清扫数、切除标本长度、肿瘤距远切断、标本切缘情况比较差异无显著性(P均0.05)。结论:腹腔镜手术相比开腹直肠癌系膜切除治疗直肠癌具有手术时间短、创伤小、术后恢复快,并发症少的优点,值得在临床上推广应用。     

西施舌多糖对人食管鳞癌裸鼠移植瘤作用的研究北大核心CSCD

构建人食管鳞癌EC-9706细胞裸鼠移植瘤模型,研究西施舌多糖对人食管鳞癌EC-9706细胞裸鼠移植瘤生长的影响。将移植瘤裸鼠随机分成5组,每天分别腹腔注射生理盐水(NS)、环磷酰胺(CTX,5 mg/kg)、西施舌多糖3个剂量(100、200、300 mg/kg),2周后,每3 d用游标卡尺测量肿瘤体积。实验持续26 d,实验结束后,处死裸鼠,称瘤重,计算抑瘤率。结果表明,不同浓度西施舌多糖对人食管鳞癌裸鼠移植瘤生长均有抑制作用,且西施舌多糖各剂量组中抑瘤率呈现剂量-效应关系,其中西施舌多糖300 mg/kg实验组效果最佳,抑瘤率达28.85%。     

医学院校生物化学课采用案例教学法存在的问题及对策CSCD

生物化学是医学院校非常重要的一门基础课,传统的教学模式无法适应当前高等医学教育飞速发展的需要。案例教学作为一种先进的教学方法,应用于医学院校生物化学教学具有一定的必要性和可行性,但其实施过程中存在很多困难和问题。通过采用相应对策进行优化后,可明显改善教学效果。