确定病毒B细胞抗原表位的策略

抗原表位是诱生免疫反应的抗原最基本单位,根据其功能的不同,可大致分为Ｂ细胞、Ｔｈ细胞及Ｔｃ细胞抗原表位。如何确立这些抗原表位是近年分子免疫学研究的热点。本文综述了有关确立病毒Ｂ细胞抗原表位的方法及策略,并评价了这些方法的优缺点及适用范围。     

表油菜素内酯对黄瓜子叶过氧化物酶活性和可溶性蛋白含量的影响

０．５ｍｇ／Ｌ的表油菜素内酯（ｅｐｉ－ＢＲ）能显著地促进黄瓜子叶叶绿素ａ、叶绿素ｂ的含量和叶绿素ａ／叶绿素ｂ比值的下降,表明ｅｎｉ－ＢＲ能促进子叶的衰老。从过氧化物酶（ＰＯＤ）的活性测定及同工酶谱发现ｅｐｉ－ＢＲ可提高其活性,暗示它可能通过提高子叶ＰＯＤ的活性而加速子叶叶绿素的降解。另一方面,ｅｐｉ－ＢＲ促进子时可溶性蛋白含量的下降,其中主要是ＲｕＢＰ羧化酶含量的下降,同时,ｅｐｉ－ＢＲ引起子叶游离氨基酸的累积。     

恶性疟原虫多抗原表位基因的融合与表达

以霍乱毒素Ｂ亚基（ＣＴＢ）基因为载体,构建了含不同抗原表位的恶性疟原虫的融合基因ＣＴＢ／ＡＴＥ和ＣＴＢ／ＡＷＴＥ。前者除含有恶性疟原虫裂殖子表面主要抗原表位杂合多肽基因ＳＰｆ６６外,还含有很强的Ｔ辅助细胞表位ＣＳＴ３和Ｔｃ细胞表位;后者在此基础上将我国发现的Ｂ细胞表位ＮＫＮＤＤ基因经８次串联后融合其中。两种形式的融合基因经测序正确后转入大肠杆菌ＴＫ１０４６中,产量分别为１０ｍｇ／Ｌ及５ｍｇ／Ｌ。表达产物ＣＴＢ／ＡＷＴＥ经亲和层析纯化双抗夹心ＥＬＩＳＡ测定表明,该融合蛋白在保留了与抗ＣＴＢ抗体结合的同时,与抗ＮＫＮＤＤ单抗的结合效价达１：８０００。     

表油菜素内酯对绿豆幼叶衰老的促进作用

表油菜素内酯（ｅｐｉＢＲ）０．０５ｍｇ／Ｌ能促进绿豆幼叶的衰老,其叶绿素和蛋白质含量均低于对照。绿豆幼叶经ｅｐｉＢＲ处理后,可使过氧化物酶活性明显增加,但同工酶谱无变化;超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性随ｅｐｉＢＲ处理时间的延长而降低。ｅｐｉＢＲ能促进丙二醛（ＭＤＡ）含量增加,而其含量与ＳＯＤ和ＣＡＴ活性呈显著负相关。     

表油菜素内酯对绿豆幼叶衰老的促进作用

表油菜素内酯（ｅｐｉＢＲ）０．０５ｍｇ／Ｌ能促进绿豆幼叶的衰老,其叶绿素和蛋白质含量均明显低于对照。绿豆幼叶经ｅｐｉＢＲ处理后,可使过氧化物酶活性明显增加,但同工酶谱无变化;超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性随ｅｐｉＢＲ处理时间的延长而降低。ｅｐｉＢＲ能促进丙二醛（ＭＤＡ）含量增加,而其含量与ＳＯＤ和ＣＡＴ活性是显著负相关。     

表油菜素内酯对离体黄化小麦叶片展开的影响

油菜甾醇内酯类化合物对叶片展开(leaf-unrolling)的生物活性,以表油菜素内酯效应为最强。epiBR的作用与其浓度及苗龄有关,0.0001ppm时已表现促进作用,至1ppm达最高;epi-BR对4d龄叶片促进最明显,随苗龄增加逐渐下降,表明幼嫩叶片比老叶片对epiBR更为敏感。epiBR能克服环己酰亚胺和放线菌素D对叶片展开的抑制;epiBR与脱落酸之间亦存在拮抗,而与6BA则表现加成作用。     

用计算机进行昆虫分类检索研究初探

本文采用昆虫分类上通用的两项式分类法,用计算机进行昆虫分类检索,详尽地介绍了检索原理、程序框图、输入资料的方法及修改资料的命令,并以检索夜蛾科成虫为例,对操作步骤和使用方法及程序中的主要变量进行了解释。     

人乳头瘤病毒16型E_7开放读码框编码免疫反应表位的定位

用核酸外切酶Ⅲ和s1核酸酶,逐步缺失能在原核细胞中有效表达人乳瘤病毒16型E_7开放读码框的质粒P16E_7TNP1,获得了一系列DNA逐渐缩短的质粒。它们能在大肠杆菌中表达产生一组从羧基端往氨基端逐步减少的融合蛋白,用Western blot方法检测相应融合蛋白与阳性血清的免疫反应。分析实验结果,编码免疫反应表位的核酸序列于619至644之间。     

扣囊拟内孢霉α-淀粉酶基因的克隆和在酿酒酵母中表达

以穿梭质粒pCN60为载体,大肠杆菌C600为受体构建了扣囊拟内孢霉(Endomycopsis fibuligera)G45 Sau 3A基因文库。从基因文库中提取重组质粒DNA并转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BJ1991,选出四个具有o-淀粉酶活性的转化子,琼脂糖凝胶电泳结果证实插入的DNA片段为9.0kb。对插入DNA片段亚克隆,确定。-淀粉酶基因位于PstI-Sall 3.9kb片段上,启动子位于PstI-EcoRI 的1.3kb片段上。用亚克隆PGK11.9kb片段置换。-淀粉酶启动子区,其转化子的e-淀粉酶活性有明显提高。     

应用细菌鞭毛递呈的随机肽库研究丙型肝炎病毒核心蛋白B细胞抗原表位

设计了利用大扬杆菌鞭毛蛋白递呈的随机十二肽库研究ＨＣＶ核心蛋白Ｂ细胞抗原位的实验程序：１利用大肠杆有达质粒ｐＱＥ－３０有达并纯化ＨＣＶ核心蛋白Ｐ１９;２利用Ｐ１９蛋白亲和层析纯化ＨＣＶ感染者血清的抗ＨＣＶ核心蛋白多克隆抗体;