酿酒酵母染色体DNA样品制备和CHEF分析

采用国产溶壁酶蛊酿酒酵母菌株Ｘ８的原生质体，将４×１０＾８／ｍｌ的原生持体悬浮液与等体积的１％低融点琼脂糖混匀后，凝固的原生质体包埋块在含１ｍｇ／ｍｌ蛋白酶Ｋ的ＮＤＳ缓冲中处理２４ｈ，获得适宜于ＣＨＥＦＪ民泳的染色体ＤＮＡ样品。采用了上述与前人不同的方法制备酿酒酵母染色体ＤＮＡ样品，为广泛研究真菌电泳核型和制备巨型ＤＮＡ分子量标记样品奠定了基础。ＣＨＥＦ电泳结果显示，供试菌株Ｘ８与对照菌７５５之间     

表面响应法优化黑曲霉过氧化氢酶的发酵工艺*

采用表面响应法 (responsesurfacemethodology)研究了黑曲霉发酵过氧化氢酶过程的搅拌与通风条件的优化 ,获得了 1个二次模型用于描述搅拌与通风对产过氧化氢酶的影响。当搅拌与通风量分别为 691r/min、 1 3L·L^-1 ·min^-1 时 ,黑曲霉产过氧化氢酶水平最高。     

模拟酸雨对乐东拟单性木兰幼苗部分生理指标的影响

采用盆栽法,研究了不同pH值的模拟酸雨胁迫对乐东拟单性木兰（Paramecia lotungensis）叶片膜损伤、抗氧化酶活性、叶绿素（Chl）含量以及气体交换参数等的变化。结果表明：在模拟酸雨胁迫下,幼苗叶片膜透性和丙二醛（MDA）含量显著增加,且两者呈现显著正相关;过氧化氢酶（CAT）活性逐渐下降,超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物（POD）活性逐渐或急剧上升;Chl含量明显下降;净光合速率（Pn）、气孔导度（Ga）、蒸腾速率（Tt）、水分利用效率（WUE）和气孔限制值（La）等指标均呈下降趋势,而胞间CO2浓度（Ci）却表现为上升趋势。表明酸雨诱导了活性氧生成,使抗氧化酶系统失调,造成活性氧产生和清除之间的不平衡,从而加速膜脂过氧化作用,破坏膜透性,降解叶绿素,导致光合作用下降。     

高静水压诱导水稻变异的初步研究

以高静水压处理水稻粤香占、粤丰占、998、999和毕粳38种子后的当代群体(M1),以及从中筛选到的突变株粤变长、巨无霸、粤丰压变1号-5号、毕籼为材料,研究了静水高压对水稻生长发育及其农艺性状的影响,结果发现：(1)与对照相比,粤香占和998处理当代群体的株高和有效穗数明显增加,但株叶形态没有明显变化;粤丰占、999和毕粳38的处理群体没有明显变化;(2)粤变长和巨无霸从第二代(M2)到第四代(M4)性状稳定,未发现明显分离,但在株高、有效穗数、穗粒数、粒长和千粒重等方面,与对照相比明显不同;(3)在M,代,粤丰压变1号一5号中除粤丰压变2号外的株高都发生了分离,而且粤丰压变4号分离出了大粒型和长芒型的植株;(4)毕籼从Mz代到lVt,代,性状稳定,但其株高、穗长、粒长和穗粒数均比对照显著增加,结实率和千粒重则明显降低;(5)经静水高压处理后的粤丰占种子发芽试验中,出现了双苗和3苗现象。这些结果表明静水高压能够影响水稻的生长发育,并能诱导水稻产生变异。     

水稻基因APRT的克隆及其与温敏核雄性不育的关系

在拟南芥中腺嘌呤磷酸核糖转移酶基因(APRT)突变导致植株雄性不育。本文首次报道从水稻(Oryza sativa subsp.indica)中克隆了基因APRT(GenBank登录号AY238894),并将其定位于水稻第4染色体的一个BAC克隆(AL606604)的58000bp至63000bp区域。该基因K4220bp(起始密码子至终止密码子),含7个外显子、6个内含子,编码的APRT蛋白长212个氨基酸残基,与其他物种来源的APRT序列存在很高的同源性。与大麦、小麦、拟南芥1型及其2型的该蛋白同源性分刖为54．9％、54．9％、49．6％和59．5％。经保守结构域搜索发现该蛋白中存在APRT催化结构域。从DNA、mRNA两个水平分析了该基因与水稻温敏核雄性不育(TGMS)的关系,结果表明：受温度诱导,水稻“安农S—1”APRT基因的表达变化可能与温敏核雄性不育表现型具相关性。     

重茬胁迫下硒对大豆叶绿体超微结构和叶片中微量元素含量的影响

采用盆栽试验和田间小区试验方法,研究了低浓度施Se对重茬胁迫下大豆叶绿体超微结构及大豆叶片中Mg、Fe、Mn含量的影响．结果表明,当盆栽试验施Se量小于0．50mg.kg^-1,田间小区试验施Se量小于300g.hm^-2时,施Se都不同程度地提高了大豆叶片的Mg、Fe和Mn含量．在盆栽试验中,施Se量与大豆叶片中Mg、Fe的含量呈正比,而施Se量与大豆叶片中Mn含量之间的关系很难确定．同时,透射电镜照片显示,盆栽试验中重茬胁迫下,施se可使大豆叶绿体膜结构保持完好,而不施se对照的叶绿体发生膨胀,基粒消失,甚至转化成了黄化体．可以认为,低浓度施Se能缓解大豆重茬胁迫所造成的过氧化损伤,使大豆生长较为正常．     

《生物分离技术》课程教革的体会

生物分离技术是在生物学、细胞学、微生物学、生物化学、化学、化学工程、物理化学、机械和电子等学科的有关技术的基础上发展起来的 ,是生物工程专业的必修课程 ,因此该课程的教学直接影响了学生的专业素质 ,作者多年从事该课程的教学与科研 ,深刻体会到激发学生的学习兴趣 ,丰富教学内容 ,改革教学方法 ,改进教学手段 ,强调学生能力的培养 ,加强理论与实践相结合 ,是教好这门课程的关键 ,下面从几个方面总结十几年的教革体会。1　培养和激发学生的学习兴趣常言道兴趣是最好的教师。培养学生对课程的学习兴趣 ,是学生能否学好这门课程的关…     

靶向调控血管生成素miRNA的筛选和验证

血管生成素是一个重要的促血管生成因子,在细胞增殖、迁移和凋亡等过程中均发挥重要作用,但其具体的分子机制尚待阐明.miRNA是一类长约22 nt的小RNA,在转录后水平调控基因的表达,广泛参与各种生物学过程.本文探索了可直接调控血管生成素表达的miRNA,希望为阐明血管生成素的作用机制提供线索.首先,我们利用数据库预测得到8个可能靶向结合血管生成素mRNA 3′端非编码区的miRNA;然后,用实验方法验证它们与血管生成素的靶向关系,发现miR-1208、miR-196b、miR-296、miR-409-3p、miR-570和miR-641这6个miRNA可以不同程度地抑制血管生成素的mRNA和蛋白质表达水平,但只有miR-196b、miR-296、miR-409-3p和miR-641可以直接结合血管生成素mRNA的3′端非编码区;进而,在血管内皮细胞中分别过表达这4个miRNA,发现miR-196b、miR-409-3p和miR-641可以抑制血管内皮细胞的细胞增殖,而miR-196b、miR-296和miR-409-3p可以抑制血管内皮细胞的管腔形成.以上结果表明,细胞内有多个miRNA调控血管生成素的表达,它们可能协调调节血管生成,抑或在血管生成的不同阶段发挥作用.我们的工作还为“一种mRNA可被多种microRNA调节,而一种microRNA可调节多种mRNA”假说提供了部分证据.     

广东省地方鸡线粒体遗传多样性与母系起源

系统评估地方鸡的遗传变异水平并追溯其母系起源, 可为保护利用优质家禽种质资源库提供科学依据。本研究测定了广东省和邻省共12个地方鸡品种的线粒体DNA D-loop序列, 分析品种间的遗传距离与系统关系, 并构建单倍型系统发生树和中介网络图。360份样品共检测到60个突变位点, 均为转换。定义了85种单倍型, 归属于单倍型类群A、B、C和E, 在12个鸡品种中均有分布, 其中B是优势单倍型类群(187个, 51.94%), E次之(76个, 21.11%)。B02 和C01是优势单倍型(85个, 23.61%; 48个, 13.33%), 为12个鸡品种共有; E03位居第三(35个, 9.72%), 杏花鸡、黄郎鸡和宁都三黄鸡未见此单倍型。杏花鸡集中分布在单倍型类群B, 惠阳胡须鸡和中山沙栏鸡则主要分布在单倍型类群E; 怀乡鸡的单倍型数量最多, 中山沙栏鸡的最少。广东地方鸡品种间遗传距离为0.012-0.015, 单倍型多样性0.805 ± 0.047至0.949 ± 0.026, 核苷酸多样性0.0102 ± 0.0017至0.0138 ± 0.0009。邻接树和中介网络图将85种单倍型划分为进化枝A、B、C和E, 广东省与邻省地方鸡单倍型的地理分布模式相似。中性检验显示广东地方鸡未经历明显的群体历史扩张。结果表明广东地方鸡处于较好的保护状态, 遗传多样性水平较高, 品种的形成受到邻省和北方家鸡的影响, 东南亚红原鸡对广东地方鸡也有重要的遗传贡献。