Antigen changes of monoclonal antibody MSH27 in process of post-testicular maturation (in mice)

An anti-mouse spermatozoon monoclonal antibody, MSH27, as well as its purified antigen, can block sperm-egg membrane fusion. As a candidate protein for sperm-egg membrane fusion, the sperm antigen was investigated in the process of post-testicular maturation (PTM). The molecule was produced in testes and located on the plasma membrane of the postacrosomal area of the spermatozoon. However, the epitope recognized by the MSH27 (MSH27Ep) was not exposed until the occurrence of the acrosome reaction. In the process of fertilization, spermatozoa must complete the acrosome reaction before penetrating across the zona pellucidas (ZPs) to approach the plasma membrane of eggs. The effects of the acrosome reaction and penetration of the ZP on the exposure of the MSH27Ep were also studied. It was shown that the percentage of the spermatozoa with the MSH27Ep exposed increased followed with their mature status in PTM. In fact, it bad a linear correlativity with the rate of the acrosome reaction. After spermatozoa had     

高原鼠兔褪黑素受体在下丘脑-垂体-性腺轴中的表达分析

褪黑素在季节性繁殖动物的生殖细胞发育与性腺功能调控中发挥重要作用,然而褪黑素如何通过下丘脑-垂体-性腺（HPG）轴实现其调控功能目前仍不清楚。因此,本研究选取典型的长日照动物——高原鼠兔（Ochotona curzoniae）作为研究对象,使用酶联免疫吸附法测定繁殖期与非繁殖期雌雄鼠兔的血清褪黑素水平昼夜变化,利用实时荧光定量PCR分析褪黑素受体基因Mtnr1a与Mtnr1b在下丘脑、垂体与性腺中的表达水平,并通过免疫荧光染色进一步确认两种受体在性腺不同类型细胞中的定位。结果显示,非繁殖期雄性鼠兔的血清褪黑素含量始终高于繁殖期,且呈现不同的昼夜变化模式;雌性鼠兔的血清褪黑素含量远低于雄性鼠兔,且在繁殖期与非繁殖期并不存在显著差异。Mtnr1a与Mtnr1b在下丘脑、垂体与性腺中均有表达,雄性鼠兔在下丘脑与垂体中表现出繁殖期与非繁殖期基因表达的显著差异,而雌性鼠兔基因表达的差异主要出现在垂体与性腺中。两种受体蛋白在雄性性腺生殖细胞和支持细胞中均有分布,但MTNR1A更局限于精原细胞内,MTNR1B则在管腔内生殖细胞中表达。雌性性腺中MTNR1A在卵母细胞胞质内有表达,但更集中表达于颗粒细胞;MTNR1B在颗粒细胞以及卵母细胞核质内均有表达,且在生长卵泡的卵泡膜细胞中呈现高表达。以上结果表明,褪黑素调控雌雄高原鼠兔季节性繁殖的模式并不相同,其作用不仅限于通过下丘脑-垂体-性腺轴的间接调控,也可能通过性腺内靶向受体直接影响生殖细胞与体细胞命运。     

脱细胞神经移植物对骨髓间充质干细胞的诱导分化

目的探讨脱细胞神经移植物诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为施旺细胞样细胞的可行性。方法将分离纯化的SD大鼠骨髓间充质干细胞进行体外培养扩增,行表型鉴定后,取第5代细胞,诱导组采用脱细胞神经移植物匀浆进行诱导,非诱导组加入等量无血清培养基,倒置相差显微镜观察诱导后细胞形态变化,免疫细胞化学染色检测诱导后细胞S-100,神经胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein GFAP)的表达情况。结果BMSCs表型鉴定为CD44+、CD54+、CD34-,免疫细胞化学染色GFAP、S-100的阳性表达率分别为为(42±4)%和(64±5)%。结果 脱细胞神经移植物可诱导骨髓间充质干细胞分化为施旺细胞样细胞。     

嗜碱菌Alkalimonas amylolytica N10在不同pH条件下的膜蛋白差异表达研究

为了探讨嗜碱菌的嗜碱机制,对一株新型专性嗜碱菌（Alkalimonas amylolytica N10）在不同pH条件下的差异膜蛋白质组进行了初步的研究。在3种pH条件下（pH值分别为84、94和104）培养的该菌的膜蛋白,通过8%～20%的梯度SDSPAGE进行分离。经胶图图像和统计计算,7条电泳条带的相对染色强度随培养液的pH值变化而改变,其中仅有一条条带强度随pH值增高而增加。这些条带经胰蛋白酶胶内消化和高效液相色谱电喷雾离子阱串联质谱（LCMS/MS）分析,共鉴定出了12种蛋白质。其中4种膜蛋白已有报道直接或间接参与细胞pH稳态的保持,其他几种蛋白则是首次发现其表达水平与生活环境的pH变化可能相关。     

英格兰喀斯特瀑布苔藓植物水生群落生态研究

喀斯特(Karst)是指在可溶性碳酸盐岩(主要石灰岩和白云岩)上发育并演化而形成的独特地貌类型[1,2].     

尖叶胡枝子总黄酮含量测定方法(比色法)的优化

采用NaOH-Al(NO₃)₃-NaNO₂比色法对尖叶胡枝子的总黄酮含量进行测定。以芦丁为对照品,检测波长为510 nm。结果表明,在０～1 g·L^-1范围内,芦丁吸光度与其质量浓度呈良好的线性关系（r＝0.999 8）,对测定方法的稳定性、精密度、重现性及回收率进行试验,相对标准偏差（RSD）为0.199%～1.023%。根据拟合的线性回归方程对尖叶胡枝子不同提取液中总黄酮进行定量,所得测定数据分别为0.029 0、0.024 0、0.315 0、0.379 0和0.012 4 ｇ/Ｌ。该方法简便、快速、准确,可作为尖叶胡枝子中总黄酮含量的测定方法。     

不同病理类型的原发性甲状旁腺功能亢进临床特征及生化指标的相关性分析

摘要 目的：分析不同病理类型的良性原发性甲状旁腺功能亢进（primary hyperparathyroidism,PHPT）患者临床特征和术前术后生化指标变化的不同,探讨其相关性,为该病的诊断与治疗提供思路。方法：收集行手术治疗的良性PHPT患者56 例,回顾性分析其临床资料及术前术后生化指标的变化,并按术后病理结果对其进行分组,比较其临床特征及生化指标的差异。结果：按病理类型将患者分为4组：甲状旁腺腺瘤（PA组）21 例（37.5%）,甲状旁腺腺瘤样增生（PAH组）28 例（50.0%）,甲状旁腺非典型腺瘤样增生（PAAH组）5例（8.93%）,甲状旁腺腺瘤合并甲状旁腺腺瘤样增生（PA+PAH组）2例（3.57%）。PHPT患者中女性明显高发,男女比例为1：5.22,且在PAH组所占比重明显高于PA组（P>0.05）。各组临床表现无明显差异。术前PTH在PAAH组明显高于PAH组,而术前血钙、血磷、25-羟基维生素D3在各组间比较无显著性差异。多处病灶有66.67%发生在PAH组,组间比较有显著性差异（x²=20.160a, P=0.000）。术后病理标本最大直径在PA组明显大于PAH组（P<0.05）,而在其余各组间比较无统计学差异（P>0.05）。PTH在术中标本切除后数值迅速下降,在术后第一天略有上升;血钙在术后呈持续下降趋势。PTH及血钙的下降幅度在各组间比较无显著性差异（P>0.05）。结论：良性原发性甲状旁腺功能亢进症中老年女性高发,尤其在PAH组明显高发。各种病理类型临床表现无差异。多处病灶主要集中在PAH组,PA组术后病理标本最大直径最大,PAAH组术前PTH水平最高,应对PAAH组患者加强术后PTH随访。     

CTA联合CEUS在锁骨上皮瓣术前设计中的应用

目的:探讨计算机断层扫描血管造影(CTA)联合对比增强超声(CEUS)在锁骨上皮瓣术前设计中的应用价值。方法:将2016年1月2018年12月本院收治的15例锁骨上皮瓣术前患者作为研究对象。所有患者术前进行CTA和CEUS联合检查以观察锁骨上动脉穿支解剖变异及走行,应用于锁骨上皮瓣术前的辅助设计,评估该方法的成功率和并发症的发生情况。结果:15例患者的锁骨上动脉来源于颈横动脉,其中5例(33.33%)来自甲状颈干,10例(66.67%)来自锁骨下动脉。CTA检查中,10例识别出右锁骨上动脉,血管平均长度为(38.25±11.08)mm,血管平均直径(1.52±0.45)mm;13例确定了左锁骨上动脉,血管平均长度为(38.14±11.05)mm,血管平均直径(1.52±0.51)mm。CEUS检查的15个皮瓣中,发现27个胸锁骨上动脉的胸廓分支(TBSA),平均口径为(0.8±0.2)mm,平均收缩期峰值流速(PSV)为(11.95±2.08)cm/s。所有病例(100%)术中观察皮瓣血管数量、走形等情况与术前影像学相一致的手术结果。与造影剂有关的并发症发生率为6.67%。所有患者均随访1年以上,无进一步并发症,手术效果满意。结论:将CTA和CEUS相结合用于锁骨上皮瓣术前的辅助设计,可互为补充,尤其适用于锁骨上皮瓣(SCF)存在血管解剖变异而且管径细小的皮瓣术前设计。     

MTERF2在人子宫颈癌细胞株中的表达及对细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:线粒体转录终止因子2(MTERF2)是线粒体类核的重要组成成分,且参与线粒体基因的表达调控。本研究旨在阐明MTERF2基因在体外培养的人类正常子宫颈上皮细胞株和子宫颈癌细胞株中的表达情况,并进一步探讨MTERF2对子宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:采用qRT-PCR和Western印迹检测正常子宫颈上皮细胞株(End1/E6E7)和子宫颈癌细胞株(HeLa、SiHa、C-33A、C4-1、CaSki)中MTERF2 mRNA及其蛋白质的表达情况;分别构建MTERF2稳定过表达或下调表达的子宫颈癌HeLa细胞株,通过XTT实验、细胞划痕实验、Transwell迁移实验、Transwell侵袭实验、克隆形成实验和流式细胞术等方法观察MTERF2基因过表达或表达下调对子宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响。结果:MTERF2蛋白及mRNA在子宫颈癌细胞株中的表达水平均低于正常宫颈上皮细胞株。与对照组相比,稳定过表达MTERF2的子宫颈癌HeLa细胞增殖能力下降,同时子宫颈癌HeLa细胞的克隆形成能力、迁移能力和侵袭能力均显著下降;细胞周期出现G1/S期阻滞,周期蛋白D1和pRb蛋白的表达水平明显下降。下调MTERF2表达的子宫颈癌HeLa细胞的增殖能力、克隆形成能力、迁移能力和侵袭能力均有所增强,且未出现细胞周期阻滞。此外,稳定过表达或下调MTERF2表达对子宫颈癌HeLa细胞凋亡均没有显著影响。结论:MTERF2基因在子宫颈癌细胞株中的表达水平低于正常子宫颈上皮细胞株,且负调控子宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭,提示其可能在子宫颈癌发生发展中发挥类似抑癌基因的作用。     

一株分离自胡杨的赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus)ML-64的微生物学特性

摘要:【目的】从胡杨茎秆液中分离得到的一株菌株ML-64,对其进行微生物学特性的分析。【方法】通过细菌培养和染色的方法进行了形态和培养特征的检测,使用多相分类学方法测定菌株的各项生理生化指标,脂肪酸组分、醌组分、极性脂类型、16S rRNA基因系统发育分析、(G+C)mol%含量的测定和DNA-DNA杂交分析。【结果】菌株ML-64为革兰氏阳性菌,杆状,产生芽孢。菌落为圆形,淡黄色,表面光滑。菌株生长温度范围为10－45℃(最适37℃),pH范围为7.0－9.0(最适pH7.0),NaCl浓度范围为0－6%(W/V) (最适0－2%)。菌株ML-64 的类脂酯酶,精氨酸双水解酶,脲酶活性和VP-实验为阳性。在API 50CH酶活性检测实验中菌株不能发酵任何糖类。可利用的碳源有: L-丝氨酸,丙酮酸甲酯,α-酮-丁酸,乙酰乙酸。对多粘菌素B(30 μg)、新生霉素(30 μg)、青霉素G(10 U)不敏感。16S rRNA基因序列分析结果表明,菌株ML-64T与ysinibacillus chungkukjangi 2RL3-2T,Lysinibacillus sinduriensis BLB-1T有密切亲缘关系。相似率分别为100%和99.1%。菌株ML-64与Lysinibacillus chungkukjangi 2RL3-2T和Lysinibacillus massiliensis CIP108446T之间的杂交率分别为82%和50.9%。基因组DNA(G+C)mol%含量为36.8%。菌株ML-64优势脂肪酸类型为iso-C15:0(55.05%)和anteiso-C15:0(20.70%),醌组分类型是MK-7。【结论】基于表型特征、遗传型特征和系统发育分析,将菌株定为Lysinibacillus chungkukjangi的新变种,获得序列注册号为KC609752。胡杨内生菌ML-64的基因组结构已与最近源菌株L．chungkukjangi产生了较大的分化,选择性地适应了胡杨内生环境。