全文获取类型
收费全文 | 103篇 |
免费 | 13篇 |
国内免费 | 61篇 |
出版年
2023年 | 5篇 |
2022年 | 10篇 |
2021年 | 13篇 |
2020年 | 3篇 |
2019年 | 5篇 |
2018年 | 2篇 |
2017年 | 6篇 |
2016年 | 6篇 |
2015年 | 6篇 |
2014年 | 12篇 |
2013年 | 7篇 |
2012年 | 14篇 |
2011年 | 3篇 |
2010年 | 8篇 |
2009年 | 4篇 |
2008年 | 9篇 |
2007年 | 3篇 |
2006年 | 1篇 |
2005年 | 9篇 |
2004年 | 10篇 |
2003年 | 1篇 |
2002年 | 2篇 |
2001年 | 2篇 |
2000年 | 7篇 |
1999年 | 1篇 |
1998年 | 3篇 |
1997年 | 4篇 |
1996年 | 6篇 |
1995年 | 3篇 |
1992年 | 2篇 |
1991年 | 1篇 |
1989年 | 1篇 |
1986年 | 1篇 |
1985年 | 1篇 |
1983年 | 1篇 |
1981年 | 1篇 |
1978年 | 2篇 |
1966年 | 1篇 |
1965年 | 1篇 |
排序方式: 共有177条查询结果,搜索用时 281 毫秒
91.
连丹花任蕾颖崔晓希邵晓亚李智涛蒙雪琼陈义祥 《生物技术》2022,(6):677-683
[目的]构建IFN-λ1真核表达质粒,利用人胚胎肾HEK293T细胞表达系统,获得具有良好生物学活性的IFN-λ1重组蛋白。[方法]将IFN-λ1目的基因克隆到pcDNA3.1+载体NheⅠ与XhoⅠ多克隆位点构建pcDNA3.1-IFN-λ1分泌表达质粒,并将其转染到HEK293T细胞中;采用Ni-NTA亲和层析方法分离纯化重组蛋白,SDS-PAGE和蛋白免疫印迹(Western Blotting)检测IFN-λ1的表达与纯度;采用qPCR、WB结合显微镜观察检测IFN-λ1的生物学活性。[结果]IFN-λ1真核表达质粒构建正确,而且能够在HEK293T细胞中分泌表达重组蛋白,分离纯化的IFN-λ1能够有效地诱导ISG15、ISG54、ISG56、OAS1、TNFα、MX1和TRAIL等凋亡相关基因的表达,激活p38促凋亡信号通路,抑制水泡性口炎病毒对BHK-21细胞的感染。[结论]成功构建了pcDNA3.1-IFN-λ1真核表达质粒,能够在HEK293T细胞中分泌表达IFN-λ1重组蛋白;分离纯化的IFN-λ1重组蛋白具有潜在的抗肿瘤和抗病毒生物学活性,为进一步研究IFN-λ1的功能和临床应用奠定了基础。 相似文献
92.
采用体外α-葡萄糖苷酶抑制模型对一株球毛壳菌H6的发酵液和菌丝体两种乙酸乙酯提取物进行活性评价,结果表明,发酵液乙酸乙酯提取物对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制活性,其IC50值为(510.76±23.46)μg/mL。采用硅胶、Sephadex LH-20、半制备高效液相等色谱技术从其发酵液乙酸乙酯提取物中分离得到12个化合物。通过各种光谱分析,依次鉴定为chaetoviridins A-B(1-2),chaetoglobosins A-D(3-6),chaetoglobosin J(7),chaetoglobosin Q(8),prochaetogobosinsⅠ-Ⅲ(9-11),vibratilicin(12),其中化合物12为首次从毛壳属中分离得到。对化合物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性测定发现,化合物12显示弱的抑制活性,其IC50为(1 182.75±19.14)μg/mL。 相似文献
93.
1.固体发酵制造赤霉素是一个很有前途的方法。制法簡单,原料广泛,很适合于农村人民公社推广应用。菌种培养基用麦麸。种子培养基用淘米水,或淘甘薯干水。发酵培养基用玉米軸加麦麸或棉子餅。即可获得效价較高的赤霉素。 2.在生产过程中,发酵培养基加水二倍較为合适。接种量为20%最經济。封閉式培养的效价远远高于开放式培养。变温培养(17.5—27.5℃)并不次于恒溫(27℃±1℃)培养。温度低,培养的时間应适当放长。 3.成品的灭菌,以采用60—70℃的高温干燥法最好。赤霉素溶液的浸提用普通水浸泡4—12小时为宜。但延长至60—72小时,其有效成分并无显著增降。 4.赤霉素对植物根、莖、叶的生长都有明显影响,对莖和叶的生长有促进作用,但对根的生长有抑制作用。促进生长的作用对生长旺盛的幼嫩部分最大,但有一定的期限,此有效期一般为10天左右。赤霉素有可能具有抽調根部貯藏养分的功能。一般而論,由于地上部分的旺盛生长,地下部分根的生长反而削弱,因此其再生的能力也被降低。 5.赤霉素对植物的发育有显著的促进作用,能促使菠菜、油菜抽苔。烟草提前現蕾。但对小麦未見有促进抽穗,成熟的效果。 6.試驗初步証明,赤霉素在菠菜、芹菜和大麻等,利用莖和叶的植物上,有一定的增产效果。对于打破馬鈴薯休眠,提早发芽也有明显的作用。在小麦和胡蘿卜上,經赤霉素处理后,反而会引起减产。 7.植物經赤霉素处理之后,在一定时期内,光合作用显著增强。酶的活性显著提高。蒸騰强度和伤流速度急剧增加。植物体内糖分和叶綠素含量相对降低。試驗証明,經处理后,叶綠素含量之所以降低,是由于赤霉素处理后,叶組織内非蛋白氮含量不足影响叶绿素在光下的稳定性明显下降所致。增施氮肥能防止叶綠素的含量降低。 8.固体发酵赤霉素和液体发酵赤霉素具有同等效能。固体发酵赤霉素用普通水浸提与用0.5%NaHCO_3溶液浸提者效能相近。赤霉素的应用,必須根据不同作物,不同生育期,实际經济效益等方面,掌握适当的濃度、施用时期和次数,才能收到良好的效果。試驗証明,菠菜以10—20ppm,芹菜以20—50ppm为宜。施用时期不宜过早,最好当其效能发揮殆尽之时,恰好是收获之日,一般在收获前10天左右为宜。在有效濃度范圍内,采用低濃度,增加噴雾次数,能提高增产效果。結合增加肥水条件应用赤霉素能更好的发揮其促进生长的作用。附注 1.菌种培养基 (1) 普通馬鈴薯、洋菜培养基:馬鈴薯20%,蔗糖2%,洋菜2%。 (2) 麦麸培养基:麦麸和水各半。 2.种子培养基 (1) 洛林-湯姆配方:葡萄糖5%,酒石酸0.266%,酒石酸銨0.266%,磷酸二氫銨0.04%,碳酸鉀0.04%,碳酸鎂0.027%,硫酸銨0.017%,硫酸鋅0.005%,硫酸亚鉄0.005%。 (2) 苏联配方:蔗糖2%,硝酸鉀0.1%,碳酸鎂0.03%,氯化鈉0.02%,硫酸亚鉄0.0001%。 (3) 日本配方:甘油3%,氯化銨0.25%,磷酸二氫鉀0.5%,硫酸鎂0.5%,酒石酸0.3%,硫酸鋅0.005%,硫酸亚鉄0.005%。 (4) 澳大利配方:葡萄糖2%,硫酸鎂0.3%,氯化銨0.3%,磷酸二氫鉀0.3%,硫酸錳、硼酸、硫酸鋅、硫酸亚鉄各0.000005%,氯化銅0.000002%。 (5) 美国配方:葡萄糖2%,硫酸鎂0.3%,氯化銨0.3%,磷酸二氫鉀0.3%。 相似文献
94.
95.
氨基酸分析在近几十年得到广泛应用,一般均采用进口的氨基酸混合标液进行,仅用一种方法来测定各种各样食品,饲料,药物中的氨基酸或进行课题研究,显然是不能满足需要的。本实验采用的模拟样品的方法自配标样,对200多个批号六种配方的产品作了测定,与传统方法比较。本方法结果精确可靠,且节省时间。 相似文献
96.
脂肪酶产生菌分离,鉴定及酶性质的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
从含油污泥中分离筛选出17株产脂肪酶菌株,对其中一株进行鉴定,为无花果丝孢酵母(Trichospfigueriae).研究了该菌的最适产酶条件,并对其部分酶性质进行了研究. 相似文献
97.
判别分析法在描述叶温分布与植物水分状况关系上的应用 总被引:3,自引:1,他引:2
植物在水分胁迫条件下关闭气孔,以尽量减少水分耗散.但是气孔关闭不是整齐划一的行为,气孔的不均匀关闭会引起叶温的非均匀分布.本实验用了同精度下的生物多点温度仪、红外测温仪,对甘薯苗叶片下表面和上表面主脉周围与叶周边进行了同步温度测定,并用判别分析法对这些数据作了分析处理.结果表明:发生水分胁迫时,甘薯叶片下表面主脉周围的温度高于叶周边的温度,这两个温度的差值可以作为水分胁迫的指标:判断水分胁迫的温差阈值是0.8℃;对温度测定仪的精度要求是0.2℃. 相似文献
98.
外源乙酰胆碱在丝瓜卷须弯曲中起“神经递质”的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
用乙酰胆碱(ACh)或毒扁豆碱处理离体丝瓜卷须不仅能增强机械刺激引发的卷曲程度,甚至可以直接引发卷须的弯曲运动。用阿托品预处理卷须可以抑制由机械刺激引发的电化学波传递,减弱ACh对卷须弯曲运动的效应;而D-管箭毒预处理卷须则无此效应。说明在丝瓜卷须中ACh是通过毒蕈碱型受体传递电化波并引起原生质收缩和快速弯曲运动,这与动物神经-平滑肌突触传递兴奋的机制很相似。 相似文献
99.
100.
该研究通过生物信息学方法,从桑树基因组中获得了8个花青素生物合成调控关键转录因子(MYB)候选基因,利用转录组数据及实时荧光定量PCR技术,分析了各基因在不同组织及果实发育过程中的表达。聚类分析结果显示,4个MYB基因与葡萄、水稻和玉米花青素调控相关MYB基因聚为一类,仅1个MYB基因与拟南芥、苹果花青素调控相关MYB基因聚为一类。转录组数据显示多数基因在雄花中高水平表达。实时荧光定量PCR结果表明,2个MYB基因(MnMYBJ和MnMYB4)在果实发育过程中持续下调,1个MYB基因(MnMYB330)在果实发育过程中显著上调,分别与花青素在桑椹中的积累成负相关和正相关关系。因此,桑树MYB基因家族对花青素的积累可能存在正调控与负调控两种机制。 相似文献