不同地域有机磷杀虫药剂抗性库蚊复合组酯酶B1扩增的研究

在库蚊Culex pipiens品系中,非专一性酯酶的过量产生是对有机磷杀虫药剂抗性的普遍机理。酯酶基因位于紧密连锁的A和B座位上。现已知所有酯酶B的过量产生都是基因扩增的结果。为了确定不同国家库蚊品系的酯酶B1的过量产生是否都是相同DNA单基因型扩增的结果,我们构建了酯酶B1结构基因扩增区的限制性内切酶酶切图谱,分析了限制性酶切片段长度多态性(RFLP)。研究发现不同地理位置的酯酶B1库蚊,如法属圭亚那,委内瑞拉、波多黎各岛、美国加利福尼亚和中国北京,都有着相同的单基因扩增,但在扩增水平上有较大的差异。我们认为无论在美洲或亚洲,凡是酯酶B1扩增的库蚊都为同一个起源,之后经迁移而传播到各地;同时发现酯酶B1扩增的库蚊与酯酶A2一B2扩增的库蚊相比,其迁移有一定的局限性;并且酯酶B1扩增的库蚊仅仅限于美国、加勒比和中国的一些地区,而酯酶A2-B2扩增的库蚊则广泛地分布于美国、加勒比、亚洲、非洲、太平洋各岛及欧洲等地。     

解毒酶基因的克隆及在大肠杆菌中的融合表达

用RT－PCR克隆了酯酶B1 5′端B1（a）,并对其者了序列测定,将其与3′端B1（b）一起连接到pET-28a中,构了完整融合表达载体pET-ESTB1。转化大肠杆菌BL21,在IPTG诱导下,经过12小时,酯酶B1在大肠杆菌内的融合表达达到27％。通过纯化获得1条带的重组蛋白,用粗酶对马拉硫磷的降解显示,该解毒酶在15分钟即降解22.1％,具有较高降解有机磷酸酯类农药的能力,为利用真核生物的自然资源进行农药污染的生物治理等提供了新途径。     

多巴胺神经系统显像分子探针研究

多巴胺神经系统在神经退行性疾病和精神紊乱中充当了主要角色,比如帕金森病、亨廷顿病、迟发性运动障碍、精神分裂症。以多巴胺能神经系统为靶点的PET显像可以了解多巴胺合成、受体密度和状态改变,为神经系统疾病的早期诊断、疗效监测、发病机制以及脑认知功能的研究等方面提供客观、科学的观察手段。本文综述了以多巴胺受体、多巴胺转运体及囊泡单胺转运体为靶点的PET显像剂的研究进展。     

小菜蛾酯酶基因的克隆

根据已知的酯酶基因的保守性氨基酸序列设计简并引物 ,通过逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)扩增出小菜蛾PlutellaxylostellaL .酯酶基因片段 ,然后按照测序结果再设计 1对特异引物 ,利用PCR方法 ,筛选小菜蛾的cDNA文库。将RT PCR获得的 1条长度为 3 3 0bp的目的条带 ,亚克隆入T -载体 ,测序结果表明共得到了 1 0个不同的酯酶基因片段。利用特异引物对小菜蛾的cDNA文库进行初筛 ,显示文库中存在有小菜蛾的酯酶基因。     

P27kip1、EGFR在星形胶质瘤中的表达与其对增殖活性的影响

目的检测P27kip1与EGFR在星形胶质瘤中的表达,探讨其对增殖活性的影响,为治疗提供一定的依据.方法采用免疫组化S-P法检测星形胶质瘤EGFR、P27kip1的表达,每一例肿瘤用ki-67LI表示其增殖活性,应用SAS8.0统计软件进行结果分析.结果 1.P27kip1表达水平与星形胶质瘤病理分级负相关(rs=-0.487,P<0.0001).2.对EGFR、P27kip1及Ki-67LI联合分析显示:P27kip1( )EGFR(-)组的ki-67LI(5.0%)明显低于P27kip1( )EGFR( )、P27kip1(-)EGFR( )、P27kip1(-)EGFR(-)组(10.4%、10.4%、10.8%)(P<0.05).结论 1.P27kip1在星形胶质瘤的发生、发展过程中可能起抑制作用.2.P27kip1、EGFR对星形胶质瘤增殖活性起相互拮抗的作用.     

绿色草莓(Fragaria viridis Duch.)自交后代的生物学特性观察及评价

本文对绿色草莓（Fragaria viridis Duch.）及其自交后代5个株系的生物学特性进行了观察,其生物学特性与母本均存在一定程度差异,在观察的67个性状中,我们获得了可溶性固形物等42个差异明显的性状。利用SPSS软件对其中15个差异明显性状进行主成分分析和变异系数分析,结果表明植株高度、植株冠径、小花梗长、小花梗粗、叶柄粗、花序梗粗及花粉生活力是区分绿色草莓及其自交后代株系的重要指标。5个自交一代株系自交坐果率差异明显,其中株系Ls-S1-4属于自交不亲和最强的株系。本研究为绿色草莓自交亲和/不亲和系的创建奠定基础。     

阴茎阴囊转位合并尿道下裂分期手术修复（附43 例报道）

目的：探讨阴茎阴囊转位合并尿道下裂的手术方法及分期手术修复的临床意义。方法：回顾性分析2005年1 月至2012 年 6 月间兰州军区兰州总医院收治的43 例阴茎阴囊转位伴尿道下裂的病例资料并分析手术方式及术后随访外观情况。结果：43 例 患者经2 期阴囊成形术后疗效满意,其中2 例伴严重尿道下裂患者经分手术后达到预期效果,术后随访6 个月至7 年。所有患者 在阴茎阴囊复位后经同期或分期尿道成形术后最终均达到尿道下裂修复的标准。结论：阴茎阴囊转位合并尿道下裂应及早手术 矫正治疗。分期手术方法使操作简化,阴茎阴囊复位整形效果满意,最终尿道成形术后预后良好,术后并发症少,是一种安全可行 的手术方式,但性器官发育后易复发,术后要随访至青春期以后。     

日本鳗鲡精子形成过程中的形态结构特点

本文通过扫描电镜、透射电镜观察了日本鳗鲡（Anguilla japonica）精子形成的特殊过程及产生细胞器的特殊结构。由精细胞变成精子包括四个特殊阶段,即经过早期、中期、晚期和精子期．最后形成正常成熟的精子．（1）早期阶段：其特征是细胞核由椭圆形逐步变成长条形;在细胞核的一端．有一个大的圆的染色较浅的形状似球形的特殊结构,约占细胞核的三分之一,其内含有少量着色深的颗粒状和线条状物质,外面由质膜包被着与细胞核分开,该结构和细胞核的外层还有一层质膜包着形成一个整体：精子早期阶段没有形成独立的线粒体和中心粒。（2）中期阶段：其特征是细胞核呈长条形．有球形结构的一端成为细胞核的上端,无球形结构的一端成为细胞核的下端,在下端出现鞭毛的原基;球形结构伴随着精子的发生也发生变化,内部逐步分化出中心粒和线粒体等细胞器：在细胞核的中段有明显的溶酶体分布。（3）晚期阶段：其特征是细胞核呈“眉形”或“新月形”．中心粒从球形结构中释放出来形成独立结构．球形结构中只剩下还没有形成独立结构的线粒体：在细胞核的下端鞭毛的原基处长出较长的鞭毛,这时期的精子已具有运动能力。（4）精子期：其特征是细胞核呈圆形,中心粒位于植入窝内,线粒体分布在细胞核的下面．在线粒体的下面有袖套腔形成,此时形成的鞭毛为“9＋2”结构。日本鳗鲡精子经过四个时期的变态．才能形成真正成熟的精子。     

有机磷抗性致倦库蚊种群中酯酶基因扩增的定量分析

致倦库蚊Culex qinquefasciatus是丝虫病的主要传染媒介。通过生物测定、单个蚊虫酯酶α2和β2基因拷贝数分析和酯酶β基因序列比较, 分析了抗性水平、抗性相关基因在种群中的分布及其基因拷贝数等的抗性分子特征。应用快速PCR仪（realtime quantitatIve PCRs）直接检测库蚊中酯酶基因和mRNA拷贝数。结果显示：上海致倦库蚊对对硫磷的抗性LC₅₀为8.12, 酯酶活性升高是上海致倦库蚊种群对有机磷杀虫药剂产生抗性的主要机理。编码致倦库蚊酯酶β的氨基酸序列同编码尖音库蚊酯酶B1的氨基酸序列相比同源性为98%;同致倦库蚊酯酶B2氨基酸序列相比同源性为100%,同环蹶库蚊酯酶B3氨基酸序列相比同源性为90%, 上海致倦库蚊中酯酶α和β基因均扩增。有机磷抗性的上海和PellRR蚊虫种群中单个蚊虫酯酶α2 和β2定量基因拷贝数均不同,其同一蚊虫个体的酯酶α2 比酯酶β2基因的拷贝数高,但没有明显的规律性,酯酶结构基因的扩增是上海致倦库蚊种群对有机磷杀虫药剂抗性的主要机理,估计在野外种群的杂合个体中存在多种调控机制。