光合作用的CO_2阶跃响应动态生化模型

针对CO2阶跃变化下光合动态响应的振荡现象,依据经典的光合系统酶触反应动力学,初步尝试构建了光合系统反馈控制动态生化模型。该模型以卡尔文环的核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶(ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase,Rubisco)接触反应的酶动力学进程作为核心,以磷酸甘油酸(phosphorylglyceric acid,PGA)还原和接续的核酮糖-1,5-二磷酸(ribulose-1,5-bisphosphate,RuBP)再生的多级过程高度简化为复合酶接触反应的酶动力学进程为反馈,构成反馈控制系统。采用经典的控制系统传递函数分析手段,将反馈控制系统表达为光合动态生化模型传递函数。据此模型将实测羧化速率Vc振荡动态进行仿真拟合,呈现出很高的拟合度(r=0.9377)。这表明,在卡尔文环或者光合系统反馈环中,因RuBP的消耗和再生补充不平衡引起的光合振荡现象,与光合系统酶接触反应动力学参数(k)造成各个中间产物再生的"滞后"效应有关。从而在机理上解释了Laisk和Walker(1986)的无机磷(inorganic phosphate,Pi)再生供应的光合动态生化模型中,需要假定代谢途径中蔗糖合成"滞后15～20s"才能表现出光合振荡效果的现象。     

酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)半乳糖可诱导表达系统特性的研究

把大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因克隆到带有酵母半乳糖可诱导启动子GAL1的穿梭表达质粒pYESZ中,并把得到的重组质粒分别转化到两种不同遗传性状的宿主菌中,其中一株菌为蛋白酶活性缺失90％以上的pep4－3突变菌株。通过比较两株重组菌产生的β-半乳糖苷酶活性水平发现在所述实验条件下,蛋白酶缺失突变菌株中产生的β-卜半乳糖苷酶活水平不仅均要高于另一对照菌株,并且pep4-3突变菌株表现出受葡萄糖阻遏的严紧程度高及对诱导反应迅速等特点。此外,带有重组质粒的pep4－3突变菌株在葡萄糖阻遏培养基中最大生长量和重组对照菌株基本相同,但β-半乳糖苷酶在pep4－3突变菌株中的表达对细胞生长的影响明显小于对照菌株。     

木糖代谢工程菌的研究进展

木糖广泛存在于农副产业及林产业的木质废弃物中,利用微生物转化木糖产生乙醇的研究,对生物质再生资源的全利用有着重要意义。本文介绍了木糖代谢工程菌的研究进展和策略。     

AAV-9病毒转载sfrp1靶向干预wnt信号通路治疗心力衰竭大鼠分子机制研究

摘要 目的：探讨腺病毒9（AAV-9）转载可溶性卷曲相关蛋白1（Sfrp1）靶向干预wnt信号通路治疗心力衰竭大鼠的效果和分子机制。方法：选择45只健康SD雄性大鼠作为研究对象,随机分为对照组、模型组和sfrp1组,各15只。模型组和sfrp1组采用左前降支动脉结扎手术建立慢性心力衰竭大鼠模型后,给予对照组和模型组大鼠经尾静脉注射生理盐水,给予sfrp1组大鼠经尾静脉注射AAV-sfrp1载体。分别在建模成功时和注射AAV-9病毒载体第28 d通过心脏超声评价各组大鼠心功能[左室射血分数（LVEF）、左室收缩期内径（LVIDS）和左室短轴缩短率（LVFS）]。采用酶联免疫吸附法检测腹主动脉血血清中Ⅰ型和Ⅲ型胶原水平。采用TUNEL法检测各组大鼠心肌细胞凋亡情况。采用Western blot技术检测心肌组织细胞中β-catenin、Dvl-1和α-SMA蛋白表达情况。结果：模型组和sfrp1组大鼠建模成功时的LVEF、LVFS均显著低于对照组,LVIDS显著大于对照组。注射AAV-9病毒载体后第28 d时sfrp1组大鼠LVEF和LVFS显著增加并显著大于模型组,LVIDS显著降低并显著低于模型组（P<0.05）。sfrp1组大鼠血清胶原Ⅰ和胶原Ⅲ水平以及心肌细胞凋亡比例均显著高于对照组,但显著低于模型组（P<0.05）。sfrp1组大鼠心肌组织中β-catenin、Dvl-1、α-SMA蛋白相对表达水平显著高于对照组,但显著低于模型组（P<0.05）。结论：AAV-9病毒转载sfrp1能够通过靶向抑制wnt信号通路以及抑制心肌胶原合成,降低心肌细胞凋亡,改善心力衰竭大鼠心脏功能。     

无花果内生真菌的分离及其鉴定

从无花果(Ficus carica)的根、茎、叶中分离得到87株内生真菌,经显微形态特征观察鉴定为14个属,其中根部35株涉及8个属,茎部37株涉及10个属,叶部15株涉及3个属。结果表明,无花果的不同部位内生真菌的数量、分布和种群存有差异。     

利用氨甲蝶呤－琼脂糖凝胶进行噬菌体展示人肝脏cDNA文库筛选的方法研究

目的：利用氨甲蝶呤（MTX）偶联琼脂糖凝胶吸附法从人肝脏细胞cDNA噬菌体展示文库中筛选与MTX相互作用的蛋白。方法：以偶联于琼脂糖凝胶表面的MTX为配基,通过"结合－洗脱－扩增"过程筛选与MTX相互作用的噬菌体。利用PCR对筛选结果进行监测,对筛选得到的噬菌体PCR产物进行序列测定和基因同源性分析。结果：通过五轮亲和筛选富集到特异噬菌体克隆,再通过PCR获得cDNA插入片段。通过BLAST程序搜索GenBank,证明筛选到的片段与人PI-3K相关蛋白激酶 SMG-1异构体1 蛋白同源性达100％。结论：利用偶联MTX的琼脂糖凝胶作为筛选基质,从T7噬菌体展示cDNA文库中富集特异噬菌体是一种方便、高效的MTX相互作用靶蛋白筛选方法。本方法可为探讨小分子药物的分子作用机制提供借鉴和参考.     

酿酒酵母转座标签插入突变体263-H9中高盐胁迫基因的确定

突变体263-H9是利用mTn3转座标签对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) W303-1A诱变、筛选得到的。该突变体表现出对多种逆境胁迫(1.5 mol/L山梨醇高渗透压胁迫、0.65 mol/L NaCl高盐胁迫和15℃低温胁迫)敏感的表型特征, 而且与其他突变体不同其转座标签的插入位点是GIP2和YER053C-A的基因间隔区域。本文通过基因敲除、基因组文库功能互补等多种分子生物学和遗传学方法, 确定了突变体263-H9的敏感表型不是由于转座标签的插入直接引起的, 而是盐胁迫反应信号传导途经中重要的基因PBS2发生部分缺失, 造成该基因不能正常表达, 而导致的表型变化。     

血清CD163、AFU、miR202在原发性肝癌诊断中的作用及在介入治疗前后的变化

摘要 目的：探讨血清CD163、α-L-岩藻糖苷酶（AFU）、微小核糖核酸202（miR202）在原发性肝癌诊断中的作用及在介入治疗前后的变化。方法：选择本院2018年5月~2020年6月收治的106例原发性肝癌患者，均予以肝动脉化疗栓塞术（TACE）治疗，同期选择本院收治的94例肝硬化患者纳入疾病对照组，门诊健康体检者113例纳入健康对照组。对比三组血清CD163、AFU、miR202，原发性肝癌患者治疗前后CD163、AFU、miR202。结果：原发性肝癌组血清CD163、AFU高于疾病对照组及健康对照组，差异有统计学意义（P<0.05），miR202低于对照组及健康对照组（P<0.05）；疾病对照组血清CD163、AFU高于健康对照组（P<0.05），miR202低于健康对照组（P<0.05）。原发性肝癌患者治疗后血清CD163、AFU低于治疗前，差异有统计学意义（P<0.05）；miR202高于治疗前，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗前及治疗后，好转组血清CD163、AFU水平均低于无效组，差异有统计学意义（P<0.05），miR202高于无效组，差异有统计学意义（P<0.05）；治疗后，好转组血清CD163、AFU水平低于治疗前（P<0.05），miR202高于治疗前（P<0.05），无效组治疗前后血清CD163、AFU、miR202差异无统计学意义（P>0.05）。结论：血清CD163、AFU、miR202能够辅助原发性肝癌的诊断，又可为TACE的疗效评价提供参考依据。     

控温条件下C3、C4草本植物碳同位素组成对温度的响应

采取人工控制实验,探讨了6种C3、C4草本植物在昼/夜温度指标为20/12℃!36/28℃的范围内植物碳同位素组成(δ13C)及其对温度变化的响应,并结合植物比叶面积(SLA)、胞间CO2浓度(ci)与环境CO2浓度(ca)的比值、碳同化率(净光合速率Pn/胞间CO2浓度ci)等光合生长指标对植物δ13C的影响进行了分析。结果表明:所有C3、C4植物样品的δ13C值分别变化在-28.3‰!-32.1‰和-14.4‰!-17.6‰之间;在C3植物中,油菜δ13C值分布范围最集中,位于-31.1‰!-32.1‰之间;C4植物中,谷子δ13C值分布范围最窄。在控制的温度范围内,3种C3植物的平均δ13C值随温度升高而显著变低,而C4植物δ13C平均值与温度呈先增大后减小的抛物型关系,但线性回归结果未达到显著水平(P0.05)。单个植物种的δ13C值对温度的响应不同,茄子、高粱的δ13C值与温度呈线性负相关,其它4种植物与温度均呈二次抛物线关系,这可能与不同植物种具有不同的光合最适温度以及植物δ13C分馏对温度变化的敏感程度不同有关。     

基质金属蛋白酶和组织金属蛋白酶抑制剂在肾细胞癌组织中的表达

目的:基质金属蛋白酶及组织金属蛋白酶抑制剂在肾细胞癌转移中占有重要的作用,研究肾细胞癌组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的表达情况,为肾癌转移的治疗提供理论依据。方法:选取36例肾细胞癌肾组织标本,从相同的肾细胞癌组织及癌旁肾组织获得对照样本,均进行根治性肾切除手术切除。肿瘤分期按TNM分期标准。为了统计评估,肿瘤1期和2期为低级,3期以上为高级。RT-PCR检测肿瘤和正常组织中的MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的表达。结果:不同样本MMPs和TIMPs表达水平各不相同。肾细胞癌组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2在肾细胞癌中的表达明显高于正常肾组织(P0.05)。在肾细胞癌的肿瘤分期方面,MMP-2与MMP-9和肿瘤的分期显著相关,随着肿瘤分期的增加,MMP-2与MMP-9的表达明显升高(P0.05),而TIMP-1与TIMP-2与肿瘤的分期无关。结论:肾细胞癌组织中TIMP-2、MMP-2,MMP-9,TIMP-1的mRNA表达显著高于正常肾组织,抑制MMPS的表达将成为治疗肾细胞癌转移的新的方向。