二种简便迅速分离 RNA 的方法

RNA是基因表达的第一产物,但有些病毒中(如RNA病毒、反转录病毒)的遗传物质就是RNA。近年来的研究表明,某些RNA还有酶的功能,因此RNA在基因表达过程中和在生命起源的研究方面均占有重要地位。随着对RNA研究工作的迅速开展,分离RNA的方法也不断改进和完善。     

南方鲇线粒体DNA物理图谱及分析

南方站（SilurusmeridionalisChen）是我国重要的淡水经济鱼类,广泛分布于长江和珠江流域。南方站与翎（Sasotus）形态结构相似,生态习性相近,两者曾长期混淆在一起,1987年成庆泰等将其定为一新种［’1。目前,对南方站的研究主要集中于生物学特性、生长发育、生理生化及营养成分分析、组织学及繁殖生物学等方面,有关其线粒体DNA（mitochondrialDNA）方面的研究还未见报道。为进一步开展南方翎的遗传育种研究工作,我们构建了南方都mtDNA的物理图谱并进行了初步分析。l材料和方法1．l材料来源南方站由湖北省水产科学研究所提供。1…     

太湖新银鱼线粒体DNA物理图谱及分析

采用改进的碱裂解法制备太湖新银鱼线粒体DNA,构建其PvuⅡ、BamHI、X hoI、SalI、EcoRI和PstI等6种限制性内切酶的物理图谱。比较了鲑形目3种鱼的线粒体DNA物理图谱,根据限制性位点差异法计算它们之间的遗传距离, 利用UPGMA聚类分析法构建分子聚类图,结果表明:红点鲑属与大西洋鲑先聚在一起,再与太湖新银鱼相聚,前两者间遗传距离为12.33%,亲缘关系较近,太湖新银鱼与这两者间的遗传距离为21.36%,亲缘关系较远,表明银鱼科与鲑科分离较早。 Abstract:The mitochondrial DNA(mtDNA)from Neosalanx taihuensis Chen was prepared by the improved alkaline lysis procedure.The cleavage sites map of six kinds of restriction endonucleases(PvuII,BamHI,XhoI,EcoRI and PstI)was determined.The physical maps of mtDNAs from N.taihuensis Chen,Salvelinus taxa and Salmo salar were analyzed.Genetic distances between mtDNAs were calculated by the formula of Nei and Li(1979).Phylogenetic reconstruction method,UPGMA,was used to analyze the genetic relationships and the molecular dendrogram was established and revealed:the genetic distance between Salvelinus taxa and Salmo salar is 12.23% and that between N.taihuensis Chen and Salvelinus taxa-S.salar is 21.36%.Thisc indicates that Salangidae diverged from Salmoninae earlier.     

海狸腺的组织学研究

该文通过对４０只成年雄性海狸鼠的海狸腺体,利用石蜡包埋切片法,并分别进行苏木素伊红染色法和过碘酸Ｓｃｈｉｆ氏组织化学染色法。在光学显微镜（ＮｉｋｏｎＪａｐａｎＯＰＴＩＰＨＯＴ２）×３２０、×６４０、×１６００下进行系统观察。结果发现,海狸腺属于皮脂腺,腺细胞为全浆分泌方式,且有一套完整的导管系统;利用过碘酸Ｓｃｈｉｆ氏组织化学方法,对其有效成分,糖蛋白和粘蛋白进行定性、定位。此物质存在于腺细胞的胞质内,尤其是接近成熟的腺细胞。     

沙吸附DNA的分布及转化活性

尽管自然环境中存在着大量的DNase,大分子体外DNA在土等生态环境中存在并保持转化活性。实验表明DNA被沙土吸附之后会被沙土保护而产生对DNase的抗性。然而对沙中DNA的检测多是通过PCR或者探针杂交的方法来进行,采用转化方法进行来检测的却鲜有报道。为了研究DNA释放进沙之后的分布及转化活性,建立了流过式微型离心沙柱。将20μLpUC18置于1.0g直径介于1.2~2.5mm之间的沙中,1.5mL0.1mol/LCaCl2洗脱之后再用200μLTEN缓冲液提取。结果表明吸附于沙中的DNA经提取后仍然具有生物转化活性,并且与洗脱液、提取液具有不同的转化活性和对DNase抗性,说明DNA与沙粒的结合不只是一种简单的附着,而是3种复杂的复合体结构。相对于没有沙保护而只能在室温下保留7d转化活性的DNA,在被沙吸附保护之后的DNA可以保存转化活性达35d以上。研究结果还表明在存在感受态细胞的情况下,生物释放出来的DNA并非直接与沙粒结合,而是优先与感受态细胞结合。推测认为沙吸附DNA的转化活性同DNA的构象及同感受态细胞接触的机会相关,而与DNA的浓度不直接相关。这些结果为研究环境中存在的DNA库及其与混居的微生物间的相互作用,水平基因转移及其生态效应提供了有价值的信息。     

使用外国教材进行《微生物学》英语教学的体会

采用Prescott等编撰的第5版(2002出版)为教材进行了两届生物类专业本科生的微生物学全英语教学,深切地体会到该书是一本内容丰富、结构灵活、重视对学生能力培养的优秀教材.教材内容将知识系统性和基础性有机结合,紧跟学科发展前沿,充分体现出先进性.对于教师建立科学的课堂讲授体系、丰富教学内容、保证教学效果发挥重要作用.采用英语原版教材全英文授课,有助于培养学生国际化视野和全球化发展的适应能力.     

双层平板法检测嗜盐古菌铁载体

采用双层平板法应用于嗜盐古菌铁载体的原位检测.双层平板的上层为不添加铁离子的嗜盐古菌培养基,嗜盐古菌可在其上生长,在缺铁胁迫下可向外界分泌铁载体;下层为含有CAS检测液用于铁载体检测的琼脂.当上层平板生长的嗜盐古菌分泌的铁载体透过培养基渗透到下层检测琼脂后,即可在下层检测平板上产生明显的特征性的铁载体螯合晕圈,表明双层平板法在嗜盐古菌的铁载体检测中确实可行,且较原有的嗜盐古菌铁载体检测方法简便、直接.     

测定极端嗜盐古菌保持完整细胞形态最低NaCl浓度研究方法探析

细菌要维持其完整的细胞形态需要一定的渗透压,根据极端环境微生物耐盐程度的差异大致分为非嗜盐、弱嗜盐、中等嗜盐、极端嗜盐和耐盐菌5大类.本研究组通过测定不同浓度NaCl条件处理下,600 nm处的光谱吸收的改变值结合显微照相的方法,对极端嗜盐古菌维持完整细胞形态所必须的最低NaCl浓度进行研究.发现极端嗜盐古菌CY1保持完整的细胞形态的最低NaCl浓度为8%～10%.并建立了较为系统、可靠的测定极端嗜盐古菌保持完整细胞形态最低NaCl浓度的研究方法.     

假单胞菌荧光与非荧光铁载体对铁离子的应答差异

假单胞菌既能产荧光铁载体也能产非荧光铁载体.通过对假单胞菌在不同铁离子浓度下,在通用CAS(Chrome azroul S)检测平板、改进的蔗糖-天冬氨酸(SA)平板(MSA)上以及通用液体CAS培养基和MSA培养基内的铁载体产生情况的比较,发现在通用CAS的液体培养基上产生的主要为非荧光铁载体(pyochelin),而在改进的MSA培养基上产生的主要为荧光铁载体(pyoverdine);在铁离子的应答方面,pyoverdine较pyochelin灵敏,较低的铁离子浓度即可抑制荧光铁载体的产生,但是不能抑制非荧光铁载体.     

盐生盐杆菌DNA 片段RM07的-35、-10区缺失分析

RM07DNA片段分离自嗜盐古菌——盐生盐杆菌R1,该片段不仅在嗜盐古菌内具有启动子功能,而且在大肠杆菌中也具有启动子活性。序列分析表明其上确实含有细菌启动子的-35、-10保守区。进一步通过缺失分析证实该片段就是在大肠杆菌中具启动功能的DNA片段：仅含-10区而缺失-35区的RM07a片段基本上无启动活性;而含-35和-10区的0．1kb片段RM07b具有高于RM07的启动活性。研究结果还表明,RM07片段在大肠杆菌中的启动活性是受环境因素调节的,尤其是对氯化钠浓度的提高具有明显的相关性。因此RM07片段有可能成为构建双功能表达载体的新启动子资源,同时对进一步揭示古菌的融合特征及水平基因转移具有特殊意义。