叶片发育影响紫罗勒花青素的强光诱导和激发能分配

通过气体交换、叶绿素荧光、反射光谱和显微技术等研究了叶片发育与花青素强光诱导的关系及其对激发能分配的影响。结果表明,遮荫导致紫罗勒叶片变薄,花青素含量显著降低。当弱光下生长的植株转入强光后,转光前发育成熟的叶片花青素含量很低,而此后强光下发育成熟的叶片花青素含量高。转强光后,弱光下发育成熟的叶片光合速率低、光抑制严重,且天线耗散增强;强光下发育成熟的叶片净光合速率高,光抑制程度轻,天线耗散低。因此,我们认为叶片发育影响紫罗勒花青素合成的强光诱导,而转强光后花青素的诱导差异进一步改变了光合作用过程中的激发能分配。     

滇龙胆GrHMA基因的克隆和原核表达

HMA蛋白(heavy metal transporting ATPase)是一种在植物中广泛存在的多功能蛋白。根据滇龙胆转录组GrHMA基因序列,设计特异性引物,通过RT-PCR扩增GrHMA基因序列,并进行TA克隆、测序及序列分析;构建原核表达载体pGEX-4T-1-GrHMA,转入E.coli Rosetta(DE3)中,并在37℃、1.0 mmol/L IPTG下成功诱导表达。序列分析表明,GrHMA基因是HMA超家族的成员;GrHMA氨基酸序列系统发育分析表明,GrHMA与TcHMA处于同一进化枝。SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致。这些结果为GrHMA蛋白的进一步纯化及结构和功能的研究奠定基础。     

重组K-Ras突变基因在胰腺癌Bxpc-3细胞株中的表达及其对化疗药物药效的影响

K-Ras是Ras基因家族中的一员,在细胞生存、增殖和分化过程中发挥重要作用.当Ras基因发生突变时,其表达的Ras蛋白可能被过度激活,从而导致肿瘤的产生和发展.胰腺癌中K-Ras的突变频率较高,但其对胰腺癌化疗药物药效的影响尚不明确.本文以p Ac GFP1-C3质粒为载体构建了含有5种不同基因型K-Ras序列的重组质粒,分别为野生型和G12V,G12R,G12D,G13D 4种突变型.将上述重组质粒转入人胰腺癌Bxpc-3细胞株并筛得稳转株.结果显示,转染野生型和突变型K-Ras的细胞株具有相似的生长速度,且细胞中K-Ras-GFP融合蛋白的表达量也一致.药效学研究显示,转染突变型K-Ras基因的细胞对吉非替尼、5-氟尿嘧啶、多西他赛和吉西他滨的药物敏感性降低,而对厄罗替尼和顺铂的药效则无显著影响,这可能与转染突变型K-Ras基因的细胞中K-Ras下游信号p-Akt和p-Erk的水平升高有关.此外,转染不同突变型K-Ras导致的药效及p-Akt,p-Erk的表达变化也不同.体外研究结果表明,K-Ras突变细胞对多种化疗药物的药效敏感性降低,同时不同突变型细胞之间药效也有差异,该结果有待进一步深入研究.     

靶向融合蛋白XE-TNFαm2导致受HIV/SIV感染细胞的凋亡

研制了基因工程靶向融合蛋白XE-TNFαm2。其中,XE为HIV/SIV辅助受体CXCR4的第二胞外域;TNFαm2是经突变改型的TNFα,其毒副作用已降低18倍,己用于临床治疗恶性肿瘤。己有的研究表明XE-TNFαm2的功能之一是杀灭受HIV/SIV感染的细胞、但不杀伤未受HIV/SIV感染的正常细胞。探讨XE-TNFαm2可否引起细胞的凋亡, 以阐明其杀伤细胞作用的可能机制。结果表明,XE-TNFαm2只能引起受HIV/SIV感染细胞的凋亡,但不能引起未受HIV/SIV感染的正常细胞的凋亡。这一结果表明XE-TNFαm2是一种可特异杀灭受HIV/SIV感染细胞的准确靶向融合蛋白,其毒副作用己最小化。     

微生物基因组注释系统MGAP

利用生物信息学方法和工具开发了微生物基因组注释系统（Microbial genome annotation package, MGAP）,并用于蓝细菌PCC7002的基因组注释。该系统由基因组注释系统和基于Web的用户接口程序两部分组成。基因组注释系统整合多个基因识别、功能预测和序列分析软件;以及蛋白质序列数据库、蛋白质资源信息系统和直系同源蛋白质家族数据库等。用户接口程序包括基因组环状图展示、基因和开放读码框在染色体上的分布图,以及注释信息检索工具。该系统基于PC微机和Linux操作系统,用MySQL作数据库管理系统、用Apache作Web服务器程序,用Perl脚本语言编写应用程序接口,上述软件均可免费获得。     

阿霉素肾病大鼠肌肉和静脉注射心钠素基因利尿作用的比较研究

为探讨心钠素基因经体细胞转移对阿霉素诱导的肾病动物泌尿功能的影响及其治疗肾病的潜力,采用肌肉或静脉内直接注射裸DNA的方法,将人心钠素基因的逆转录病毒载体分别导入阿霉素肾病动物体内,以期为其提供持续性的心钠素来源。结果发现,人心钠素基因经肌肉和静脉内直接注射这2 种途径导入后,均可使阿霉素肾病动物的尿量/体重比明显增加,有效利尿作用时间大于15d。试验期间,实验组肾病动物的体重明显增长,血浆中的心钠素浓度在基因转移5d 后明显升高,但动物尿中的K⁺和Na⁺浓度无明显变化。以上结果说明,心钠素基因经肌肉和静脉2 种途径导入均可明显改善肾病动物的泌尿功能,具有治疗肾病的潜力。     

藻蓝蛋白的最新药理活性及作用机制研究

藻蓝蛋白是一种重要的光合辅助色素,包含一个开链的藻蓝素发色团,首先在螺旋藻中被发现。藻蓝蛋白由于具有抗癌、抗氧化等多种生物活性,成为近年天然海洋药物研究的热点。本文对近几年来有代表性的中英文文献进行分析、归纳,介绍关于藻蓝蛋白的最新药理活性的研究状况及可能的机制,为进一步研究其各种生物学功能提供参考。     

HBV X基因转化人肝细胞的实验研究

选取已稳定转染HBV X基因的QSG7701细胞(pCMVX/QSG7701),并以稳定转染空质粒pRc/CMV2的QSG7701细胞(pRcCMV2/QSG7701)及未转染的QSG7701细胞为对照,用免疫荧光方法检测pCMV X/QSG7701细胞中HBX蛋白的分布;用RT-PCR方法和免疫细胞化学法分别检测细胞中c-Myc表达:用光镜及电镜观察细胞形态学变化,进一步研究乙肝病毒(HBV) X基因对永生化非瘤性人肝细胞QSG7701的转化作用.研究发现,乙肝病毒X(HBX)蛋白主要分布在细胞膜及细胞浆;c-Myc mRNA及c-Myc蛋白在3种细胞中均有表达,但转染了X基因的细胞中c-Myc的表达水平较其他两组明显升高(p<0.Ol);光镜和电镜下观察发现pCMV X/QSG细胞的胞核较大,核膜增厚,核仁肥大且增多,核/浆比例失调.可见少量多核巨细胞,pRc-CMV2/QSG7701细胞与QSG7701细胞核浆比正常,染色质分布均匀,胞核大小及形态正常.结果表明.HBVX基因成功转染了QSG7701细胞,HBV X蛋白主要分布于转染细胞的细胞膜和细胞浆中.HBX可能通过上调转染细胞中c-Myc蛋白的表达而使细胞具备恶性化生长的倾向.     

亚热带-温带过渡区秦岭落叶阔叶林幼苗存活机制

【目的】物种幼苗的存活与各种生物和非生物因素密切相关,研究关键因素对幼苗存活的影响有助于理解群落物种共存的主要作用机制。【方法】以秦岭落叶阔叶林25 hm²固定样地的木本植物幼苗为对象,对11 408棵幼苗的生存动态开展连续5年(2015—2019年)的监测,利用广义线性混合模型(GLMMs)在群落水平上对影响不同年龄阶段幼苗存活的主要生物与非生物因素进行分析。【结果】(1)从群落水平来看,对幼苗存活影响最大的是生物因素,幼苗存活率与同种幼苗邻体密度和同种大树邻体胸高断面积呈显著负相关,与异种幼苗邻体密度呈显著正相关,表明物种在幼苗时期受到强烈的负密度制约效应;(2)从苗龄水平上来看,除了生物因素,影响幼苗存活的主要因素还包括海拔等非生物因素,但非生物因素的影响随着苗龄增大而减小。【结论】影响幼苗存活因素是多样的,其中生物因素的影响更显著,促进秦岭大样地中幼苗共存的主要机制为负密度制约效应。     

肝癌组织中miR-338-3p的表达及与临床病理参数的关系

目的:探讨肝癌组织中微小RNA-338-3p(miR-338-3p)的表达及与临床病理参数的关系。方法:选取2015年1月至2016年6月我院手术获得的67例肝癌组织标本,同时每例标本均取癌旁正常组织标本作为配对对照,采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)对两组组织标本中的miR-338-3p进行检测,并分析其与肝癌临床病理特征的关系。结果:45例(67.16%)miR-338-3p表达下调,22例(32.85%)表达上调;RT-qPCR结果显示,肝癌组织中miR-338-3p的相对含量为(0.76±0.38),低于癌旁正常组织中的(1.23±0.45),差异有统计学意义(t=-6.259,P=0.000)。miR-338-3p在低分化、TNM分期Ⅲ+Ⅳ期、肿瘤浸润深度T3+T4期、有淋巴结转移肝癌患者肝癌组织中的表达下调率高于中高分化、Ⅰ+Ⅱ期、T1+T2期、无淋巴结转移肝癌患者,差异有统计学意义(P0.05)。不同性别、年龄、病理类型、肿瘤大小肝癌患者肝癌组织中miR-338-3p表达下调率差异无统计学意义(P0.05)。结论:miR-338-3P在肝癌组织中呈低表达水平,与分化程度、TNM分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移有关,可能参与了肝癌的发生发展过程,早期检测可作为评估肝癌病情的指标。