利用重组Pichia pastoris生产腺苷甲硫氨酸

为改造甲醇利用型酵母Pichia pastoris来生产腺苷甲硫氨酸（SAM,S－adenosyl-L-methionine),我们将一个带有SAM合成酶基因的胞内表达质粒转化入Pichia pastoris菌株GS115,经过G418抗性筛选得到一株有两个基因拷贝的转化子。该菌在含有甲醇和甲硫氨酸的培养基中生长5d后,其细胞内的SAM的产量比原始菌株提高了30余倍。对该菌生产SAM的培养基中的碳源与氮源进行了优化,结果显示碳源的控制对该菌SAM产量的影响很大。在试管水平,该菌在含有0．75％的L-methionine并且碳源和有机氮源经过一定程度优化的培养基中,生长6d后SAM产量达到1．58g/L。     

口蹄疫病毒受体的结构与功能研究进展

口蹄疫病毒（FMDV）感染过程中的特异性受体是FMDV识别,结合宿主细胞的分子基础,研究FMDV受体的结构与功能对防治口蹄疫具有重要的理论意义和应用价值。本论述了近年来关于整联蛋白αvβ3,αvβ6和硫酸乙酰肝素（HS）三种FMDV受体的结构与功能的研究进展。     

分离和克隆小鼠ES细胞集落的主要影响因素

目的　研究不同培养条件分离和克隆小鼠ES细胞集落的效率。方法　以PMEF饲养层、NIH3T3细胞饲养层或培养液中加入LIF为培养条件 ,分离和克隆昆明小鼠ES细胞集落 ,比较其效率。结果　饲养层的培养条件明显优于培养液中加入LIF的培养条件 ;有饲养层的培养条件下 ,桑椹胚的ES细胞集落出现率显著低于囊胚 ;两种饲养层培养囊胚 ,其ES细胞集落的出现率差异无显著性。结论　以PMEF或NIH3T3细胞作饲养层 ,培养昆明小鼠的囊胚 ,适时离散ICM ,是比较理想的分离ES细胞集落的方法。     

尼日利亚菌素高产菌株的选育

通过对致死率和正负突变率的测定,确定了紫外线、亚硝酸、紫外线加吖啶橙3种诱变方式对吸水链霉菌NND-52的29号菌株进行诱变处理的合适剂量,并采用复合诱变得到了一株脱葡萄糖阻遏的高产菌株A19,其尼日利亚菌素的摇瓶产量比出发菌株提高了128％。传代结果表明,在传代的同时结合自然分离,可以保持稳定的产抗特性。     

劳埃晶体学时代的到来

(连载第十七卷第三期 )６．２．４胰蛋白酶（Ｔｒｙｐｓｉｎ） :扩散激发的 ｐＨ跳跃测定有序的催化溶剂结构Ｓｉｎｇｅｒ等人（１９９３）的研究表明通过仔细选择一个特异的底物有可能改变一个多步反应的动力学轨迹 ;ｐＨ跳跃能提供一个有效的 ,依赖于扩散的方法在整个晶体范围内触发一个慢催化事件。在这个例子中 ,丝氨酸蛋白酶胰蛋白酶在亲核反应残基Ｓｅｒ１９５处被 ｐ-胍基苯甲酸（ＧＢ）酰化。这个底物很容易形成一个酰基化酶中间物 ,但进行水解和再生游离酶却很慢。ＧＢ结合的胰蛋白酶单晶在 ｐＨ５．５下装在流槽中 ,在５秒钟内 ,…     

第10届国际生物奥林匹克竞赛(1999)理论试题答案

1.B　2.C　3a.A　3b.C　3c.A　4.B　5.C　6.B　7.A　8.D　9.B　10.B　11a.E　11b.B　12.B　13.B　14.D　15.C　16.E　17.B　18.D　19.删除　20a.B　20b.D　20c.C　20d.A　21.B　22.删除　23.B　24a.B　24b.A　25.D　26.C　27.C　28a.B　28b.D　28c.C　29.C　30.A　31.A　32.删除　33.C　34.B　35a.D　35b.B　35c.C　36a.A　36b.A　36c.C　37.删除　38.删除　39.B　40.B　41.A　42.B　43.B　44.C　45.D　46.B　47.B　48.B,C,E　49.B　50.A,B　51.B,E　52.A,B,E　53.B　54.删除　55.删除　56a.A　56b.A　56c.C　5…     

濒危鱼类稀有白甲鱼外周血细胞特征

为了研究濒危鱼类稀有白甲鱼（Onychostoma rara）外周血细胞的特征,以采自长江中游沅江水系清水江共计21尾稀有白甲鱼的血液为材料,采用常规方法对稀有白甲鱼外周血细胞的组成、形态、大小和数量进行了观测。结果显示,稀有白甲鱼红细胞数量为（1.75±0.44）×106 个/ L,白细胞数量为（4.91±1.95）×105 个/ L。在血涂片上共计观察到了5种白细胞,包括淋巴细胞、血栓细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞,没有发现嗜碱性粒细胞。其5种白细胞数量比例差异较大,其数量比例关系为：淋巴细胞>血栓细胞>嗜中性粒细胞>单核细胞>嗜酸性粒细胞。这5种白细胞的大小也有所不同,其大小关系为：单核细胞>嗜中性粒细胞>嗜酸性粒细胞>淋巴细胞>血栓细胞。与已报道的鱼类相比,稀有白甲鱼白细胞的数量明显较高,红细胞数量较多、体积相对较小,可能与其适应流水生活相关。     

青藏高原微生物多样性研究

正青藏高原被誉为世界屋脊,其内部除平原外还有许多山峰、冰川、高山湖泊和高山沼泽,是生态环境最为奇特、生物资源最为丰富的自然资源宝库之一。同时,青藏高原的微生物群落结构及其多样性与其他区域存在巨大差异,因而具有极高的科学研究价值,并逐渐被人们所关注。研究发现气候变化对青藏高原高寒草地生态系统草丛-地境界面微生物会产生重要的影响[1]。冰川雪藻的研究主要在南部的Yala冰川开展,     

雄黄的生物浸出

<正>雄黄(Realgar,As4S4)是一种含砷的硫化物,作为一种中药砷剂已有上千年的历史。近年来,雄黄治疗血液系统疾病、恶性淋巴系统疾病取得了明显的疗效,引起人们广泛的关注[1]。雄黄的传统制备方法包括酸提、煅烧、膜分离,以及机械研磨等[2-3],然而这些方法炮制的雄黄水溶性低、胃肠道吸收差、毒性高以及生物利用度低的缺点严重限制了它的临床应用[4]。生物浸出(Bioleaching)是一种从低品位矿物中提取金属     

乙型脑炎病毒可视化分型基因芯片的制备

目的:制备乙型脑炎病毒(JEV)可视化分型基因芯片。方法:根据JEV的基因组序列,应用生物学软件设计JEV分型引物及探针,制备其可视化分型基因芯片;用生物素标记的引物PCR扩增目的片段,并与固定于玻片上的探针杂交,加入链霉亲和素标记的纳米金,银增强实现可视化;进行特异性、灵敏性及重复性试验。结果:探针特异地与相应的标记目的基因片段杂交,并在芯片上呈现较强的阳性杂交信号;2号探针能特异性检出JEV,3、4号探针可分别对Ⅰ型和Ⅲ型JEV进行分型;芯片对JEV质粒检测的灵敏度达105拷贝/mL;以蓝耳病病毒等5种病毒为对照,芯片只对JEV响应,具有特异性;制备的基因芯片具有批间、批内重复性。结论:制备的基因芯片具有高特异性、灵敏性及重复性,可以快速、准确、高通量地对JEV进行可视化分型检测。