颗粒酶B和胱天蛋白酶-3对肌动蛋白水解作用的体外研究

已知凋亡过程的基本变化之一是细胞骨架的异常,后者在某种程度上决定凋亡细胞的形态学特征.为揭示凋亡相关蛋白酶--颗粒酶B和胱天蛋白酶-3对胞浆型肌动蛋白的水解作用,采用成年猕猴脑组织粗提物作为无细胞体系,以外源性颗粒酶B触发凋亡途径的终末反应.经一系列免疫印迹分析发现:孵育12 h方见β-肌动蛋白被剪切,产生41 ku和15 ku水解片段,并证明该水解反应为颗粒酶B依赖;颗粒酶B活化的内源性胱天蛋白酶-3和重组胱天蛋白酶-3均不能水解脑提取物中的β-肌动蛋白,尽管胱天蛋白酶-3可作用于纯化的肌动蛋白,产生15 ku片段.以上结果提示,内源性β-肌动蛋白对凋亡相关蛋白酶,尤其胱天蛋白酶-3不敏感,这可能与该蛋白质的空间结构特征或脑组织中存在的某种蛋白酶抑制因子有关.     

天仙果的繁殖生物学研究

研究了天仙果（Ficus erecta Thunb.var.beecheyana(Hook.et Arn.)King）的繁殖生物学特性。春季雌株不形成雌花序,雄瘿株的花序中雄花也不完全发育,只有瘿花发育良好,这些瘿花为培育传粉者（Blastophaga sp.)提供了必需的繁殖及发育场所;夏秋季是天仙果自身的繁殖时期,雌花充雄花花药发育良好。雌花期与雄花期每年在3－4月份及6－8月份相遇。通常进入花序传粉或产卵的小蜂只有1－2只。对天仙果隐头花序的配置及花的解剖研究还表明,其繁殖习性是榕树－榕小蜂共生体系繁殖对策多样性的体现。     

水稻冠层结构变化对二向反射率的影响

通过对植被二向反射特性的研究,可反演植被冠层结构信息,如叶面积指数、平均叶角、株高、覆盖率等。在大田晚稻（秀水63）移栽后第26、35、41、49、62、67和86d,对水稻冠层结构及二向反射率进行实测,并分析了二向反射率随冠层结构变化规律,结果表明,植被冠层二向反射率对入射角与观测角的敏感性随着植被冠层结构的变化而变化,蕴涵着丰富的植被结构信息。     

以家蚕核型多角体病毒为载体高效表达天花粉蛋白基因

本文报道以家蚕核型多角体病毒为载体,在家蚕体内高效表达天花粉蛋白基因的结果。天花粉蛋白基因是用ＰＣＲ技术从栝楼基因组中分离的,该基因被插入到家蚕核型多角体病毒转移载体质粒ｐＢｍ-１的多角体蛋白基因启动子下游,构建成重组质粒ｐＢｍＴＣＳ。将重组质粒ＤＮＡ和野生型ＢｍＮＰＶＤＮＡ共转染家蚕培养细胞,通过在家蚕培养细胞中进行同源重组和筛选,获得了无多角体的重组病毒ＢｍＴＣＳ。采用ＰＣＲ技术对重组病毒进行了鉴定,证实重组病毒合天花粉蛋白基因。重组病毒对家蚕的感染性不及野生病毒,提示表达产物对病毒的增殖有抑制作用。对重组病毒感染的家蚕血淋巴进行了ＳＤＳ-ＰＡＧＥ和免疫印迹分析,结果显示在蚕体血淋巴中的表达产物天花粉蛋白占总蛋白的５％。本实验为利用基因工程方法大量生产天花粉蛋白提供了又一条新的途径。     

细胞凋亡抑制因子

细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)是一种细胞的生理性自杀行为 ,对保持周围组织的健康和正常生长具有十分重要的意义。细胞凋亡的紊乱与许多致病性疾病的发生有关 ,涉及细胞凋亡过度的疾病如ＡＩＤＳ、神经变性紊乱、局部缺血等 ;涉及到细胞凋亡程度过低而导致的疾病如癌症的发生等。因此对细胞凋亡途径具有调节作用的蛋白质引起人们的广泛关注。ＩＡＰ(ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓ)家族蛋白最早发现于杆状病毒 ,它能抑制由病毒感染而诱导的细胞凋亡。杆状病毒在长期进化过程中 ,为适应自身的生活环境及繁殖的需要 ,获得了一些…     

Really interesting new gene finger protein 121 is a novel Golgi-localized membrane protein that regulates apoptosis

Really interesting new gene （RING） finger proteins represent a large protein family in the human genome, and play crucial roles in physiological activities and cancer develop- ment. The biological functions of some RING finger proteins remain unknown. Here, we described the biological activity of a novel, human Golgi-localized RING finger protein 121 （RNF121）, the function of which is, thus far, unknown. Unlike the endoplasmic reticulum-iocalized RNF121 in Caenorhabditis elegans, human RNF121 is predominantly localized to the Golgi apparatus. RNF121 knockdown inhib- ited cell growth and induced apoptosis, which was accom- panied by caspase-3 activation and the cleavage of poly （adenosine diphosphate-ribose） polymerase. Z-VAD-FMK, a pan-caspase inhibitor, inhibited the RNF121 knockdown- induced apoptosis. Over-expression of wild-type RNF121, but not the RING domain mutants of RNF121, decreased RNF121 knockdown-induced apoptosis, indicating that the RING domain is required for RNF121-regulated apoptosis. Moreover, RNF121 knockdown enhanced etoposide-induced apoptosis. This is the first study to demonstrate that RNF121 is a novel regulator of apoptosis and provides a new potential target for cancer therapy.     

X连锁凋亡抑制蛋白的功能及其在肿瘤中的作用

X连锁凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis,XIAP）是目前发现的最具特征性与作用最强的内源性凋亡抑制蛋白质。XIAP特征性结构是其BIR结构域和RING结构域,它们都是XIAP发挥抗凋亡作用的重要结构。多种内源性抑制蛋白质（XAF1、Smac和Omi）能通过不同的方式抑制XIAP的抗凋亡作用。XIAP能直接抑制胱天蛋白酶凋亡途径的起始至持续阶段,通过直接结合胱天蛋白酶、激活NF-κB途径及其它信号途径等多种方式,参与抑制细胞凋亡的死亡受体途径和线粒体途径,对调控肿瘤细胞的生存和发展必不可少。XIAP在多种肿瘤组织中高表达。XIAP的高表达还与肿瘤的发生发展、耐药性、治疗及愈后密切相关。XIAP缺失会明显降低肿瘤细胞的成瘤性。同时,XIAP阻断多个信号通路汇集而成的细胞凋亡下游。因此,XIAP已成为临床上抗癌药物设计的一个新靶点。目前,临床上采用XIAP治疗肿瘤的3个方向为小分子抑制剂、反义寡核苷酸类抑制剂以及XIAP基因沉默。本文将从XIAP抗细胞凋亡的生物学功能及其在肿瘤疾病的发生发展、耐药性、治疗及预后中的作用作一介绍。     

褪黑素对小鼠MFC前胃癌细胞的survivin、caspase-3表达的影响

目的探讨褪黑素（Melatonin,MLT）对小鼠前胃癌细胞（murine foregastric carcinoma,MFC）的生存素survivin和半胱天冬酶-3（cysteinyl aspartate-specific protease-3,caspase-3）表达的影响。方法使用不同浓度褪黑素处理培养的胃癌细胞,运用细胞免疫组化、实时荧光定量PCR、免疫印迹法、分光光度法等方法检测褪黑素在抑制小鼠MFC前胃癌细胞增殖过程中对细胞survivin、caspase-3的表达影响。结果与空白对照组相比,6mmol/L浓度褪黑素干预组的胃癌细胞survivin表达下调,caspase-3蛋白表达上调,并呈剂量依赖性。结论褪黑素能够降低胃癌细胞survivin的表达,进而激活caspase-3的活性,是褪黑素体外抑制肿瘤细胞增殖的作用机制之一。     

细胞焦亡机制及与疾病的关系

细胞焦亡(pyroptosis)是近年来发现的一种区别于细胞凋亡的促炎程序性死亡方式。焦亡途径包括半胱天冬酶(caspase)-1介导的经典焦亡途径和Caspase-4/5/11介导的非经典焦亡途径。细胞焦亡涉及多种炎性小体的激活,如核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLR pyrin domain containing 3,NLRP3)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白C4 (NLR containing a caspase recruitment domain 4,NLRC4)以及黑色素瘤缺乏因子2 (absent in melanoma 2,AIM2)等。Gasdermin-D(GSDMD)是参与细胞焦亡的关键切割蛋白,最终导致膜蛋白通道开放、膜孔形成、白细胞介素(interleukins,ILs)释放,从而扩大炎症反应。细胞焦亡介导许多疾病如感染性疾病、神经系统疾病、心血管疾病、代谢性疾病以及炎症免疫性疾病等。本文综述了细胞焦亡机制及与疾病关系的研究进展。