利用基因芯片分析拉米夫定治疗过程中HBV DNA的基因变异

依据乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus; HBV)聚合酶基因序列研制HBV基因芯片,此芯片可分析HBV的7个基因型、4种血清型和HBV聚合酶基因rtV173、rtL180、rtM204和rtV207位点的突变.利用此芯片对A、B两组共计45例拉米夫定治疗12个月的患者进行服药前和服药后3、6、9、12个月的动态检测,其中C基因型39例,且血清型均为adr;B基因型6例,其血清型均为adw.在完成全程检测的38例患者中,17例ALT升高的A组出现1例拉米夫定耐药变异株,而21例ALT正常的B组出现4例变异株,且所有变异株均为rtM204 V/rtL180M,其中2例野生株和变异株共存.rtM204V变异最早在服药6个月时出现,随后出现rtL180M变异.10份PCR产物测序分析表明,芯片检测结果与测序结果基本一致,仅在rtL173位点出现1例差异.进一步分析HBV DNA变异与HBV DNA含量、ALT水平和HBeAg血清转换率的相关性,初步结果表明变异株的出现与治疗过程中的DNA反弹呈正相关,而与起始HBV DNA水平、ALT值无关联.HBV基因芯片可初步用于HBV DNA 检测,可能是临床追踪评价抗病毒治疗效果的较好方法之一.     

染色体核型分析的扫描显微分光光度法

核型分析是鉴别染色体进行配对分类的基 木技术。关于人类染色体的命名和形态描述已 经开过六次国际会议,会议规定对无带染色体 的形态描述,主要参数是相对长度、臂比和着丝 粒指数。核型分析的关键是准确地测定染色体 的长度,精确地找出着丝粒的位置。现在通用 的测量方法是对显微放大照片的手工量度, 比较精确的是采用投影法手工描绘[al。后者虽 可得到误差0.1 Jzm的数据,但准确地测定着丝 粒的位置,精确地测量短臂（P)、长臂（q）的 长度也有困难,特别是遇到弯曲的染色体标本 就更加困难。我们试用扫描显微分光光度计, 对人类染色体进行了初步测定,无论是平展的, 还是弯曲的染色体标本都可准确地测出P" q 的长度,从而进行核型分析。