葛根异黄酮对唾液淀粉酶及阴沟肠杆菌的抑制作用初探

目的：揭示葛根异黄酮降血糖与减肥作用的机理。方法：以乙醇回流提取法分离提取不同地域的野葛和粉葛葛根异黄酮类;AOAC法和高效液相色谱法分析营养成分;以唾液淀粉酶和阴沟肠杆菌构建试验评价体系,用比色法测定葛根提取物（PREE）添加的抑制活性。结果：野葛与粉葛的基本营养没有显著的差异,但异黄酮成分的含量和组成差异显著;PREE对唾液淀粉酶的半抑制浓度（IC50）是031～114mg/mL、对阴沟肠杆菌的IC50为049～056mg/mL。随着PREE浓度的增加,唾液淀粉酶活性减弱,阴沟肠杆菌的增殖速率降低。结论：葛根异黄酮对唾液淀粉酶活性和阴沟肠杆菌的增殖均具有抑制效果,直接影响糖代谢的初始阶段而发挥降血糖、减肥作用。     

一株抗重金属铜镉细菌的分离、鉴定及其16S rDNA的序列分析*

从湖北省大冶市矿区土壤中分离到一株高抗铜和镉的菌株,命名为NTG-01。该菌株可以单抗4.5mmol/L的铜和2mmol/L的镉,因此它是研究抗铜或镉机制的重要菌株。对分离到的NTG-01进行了形态学观察和生理生化鉴定以及16S rDNA序列分析。结果显示菌株NTG-01为细菌,革兰氏染色阴性,短杆状,鞭毛周生,菌体大小约为0.8μm×2.0μm,V-P实验阳性,甲基红实验阴性,利用葡萄糖产酸产气;通过对菌株NTG-01的16S rDNA序列进行测定和同源性比对,发现它与产气肠杆菌的16S rDNA有高达     

2008—2016年临床分离阴沟肠杆菌的 分布及耐药性变迁

摘要：目的 了解贵州医科大学附属医院2008—2016年阴沟肠杆菌的临床感染分布及耐药性变迁。方法 采用WHONET 5.6软件回顾性分析各年阴沟肠杆菌的检出率、标本类型分布及耐药情况。结果 2008—2016年共分离出2 009株阴沟肠杆菌,主要来源于痰液标本,占52.41％。药敏结果显示,阴沟肠杆菌对氨苄西林/舒巴坦的耐药率最高,对亚胺培南的耐药率最低。与2009年相比,2016年阴沟肠杆菌对氨苄西林/舒巴坦和亚胺培南之外的10种抗生素的耐药率均显著下降（P＜0.05）。结论 阴沟肠杆菌对临床常用抗生素的耐药率基本呈下降趋势,对碳青霉烯类抗生素耐药的阴沟肠杆菌应引起重视。     

六株成团肠杆菌 (Enterobacteragglomerans)接合子的分子生物学分析

对 6株成团肠杆菌 (Enterobacteragglomerans)接合子的分子生物学进行了分析 .6株菌与nifHDK基因有杂交 .菌株总DNA经BamHⅠ酶切后与pEA9 DNA进行Southern杂交 ,只有 2株菌具有完整的质粒DNA ,其余菌株质粒DNA发生了 15 3～ 137 7kb不同程度的缺失 .用切割位点较少的限制性内切酶XbaⅠ酶切 6株菌的总DNA ,经脉冲场凝胶电泳 (PFGE)后用pEA9 DNA为探针进行Southern杂交 ,每株菌的pEA9 DNA明显大于用BamHⅠ酶切后的杂交结果 ,表明质粒与染色体发生了整合 .转座子Tn5或插入序列IS 12 2 2和IS 12 71可能参与质粒与染色体的整合过程 .     

拟除虫菊酯类农药降解菌的紫外线诱变

拟除虫菊醑类农药降解菌阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacap)w10j15菌株经紫外线诱变后,筛选出突变株55株。分别在30℃,转速180rpm条件下培养3d,测降解力,获得正突变菌株6株,经加药普通斜面传种10代,2株(UW19,UW2)降解力保持稳定。降解力较强的UW19对联苯菊醑、甲氰菊醑、氯氰菊醑的降解率分别达70．40％、84．04％、70．87％,比出发菌株降解率提高了近20％;UW2也比出发菌株提高了约10％的降解率。     

阴沟肠杆菌(nifL－Ac)工程菌株的构建

采用基因定位突变的方法,在体外把来自ｐＢＲ３２２ 的四环素抗性（Ｔｃｒ） 基因片段插入由ｐＳＴ１１４２ 质粒所携带的阴沟肠杆菌ｎｉｆＬ基因３’端的Ｓｍａ Ⅰ位点,再经细胞体内同源基因片段的重组交换,选择获得了在染色体上ｎｉｆＬ突变的阴沟肠杆菌Ｅ１２ 和Ｅ１３ ,两者Ｔｃｒ 基因插入ｎｉｆＬ的转录方向相反。经分析显示,Ｅ１３（ ｎｉｆＬ－ ） 由于Ｔｃｒ 基因插入后,在ｎｉｆＡ上游产生具有启动子功能的核苷酸序列（ＴＴＴＣＡＴＡ） ,激活ｎｉｆＡ 的表达。当Ｅ１３ 和Ｅ１２ 被引入多拷贝组成型ｎｉｆＡ 质粒ｐＢＦ１０１后,在有氨条件下ｎｉｆ 基因去阻遏表达,呈高的固氮酶活力,与野生型Ｅ２６（ｐＢＦ１０１） 比较,其比活力提高近１ 倍     

二种重组α-乙酰乳酸脱羧酶在啤酒生产中降低双乙酰的作用

利用已构建的含有短芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅｖｉｓ）和产气肠杆菌（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）α－乙酰乳酸脱羧酶（α－ａｃｅｔｏｌａｃｔａｔｅ ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ, α-ＡＬＤＣ）基因的工程菌株,并使它们分别在大肠杆菌中高效表达,获得重组α－ＡＬＤＣ。在实验室,用 ２Ｌ体积的麦芽汁进行啤酒生产试验,添加 ２种重组α－ＡＬＤＣ后,使啤酒中的双乙酰含量快速下降到或始终保持在０.１ｍｇ／Ｌ以下。证明得到的重组ａ－ＡＬＤＣ能有效地降低啤酒中双乙酰含量。     

阴沟肠杆菌Tn5—nifA重组质粒的构建及其nifA的表达分析

构建的生组质粒ＰＢＦ１０１带有阴沟肠植菌Ｅ２６固氮基因ｎｉｆＡ片段,该质粒具有广泛宿主范围接合转移特性和转座子Ｔｎ５的转座作用。验证了Ｅ２６ｎｉｆＡ产物能激活肺炎克氏杆菌ｎｉｆＨ启动子的表达。解除氨对固氮酶合成的阻遏作用。发现当ＰＨＦ１０１引入自生固氮催娩克氏杆菌ＮＧ１３后,可观罕到固氮酶的组成型生成,同时在３９℃高温条件下的细菌仍能检测到部分固氮活性。     

肠杆菌科细菌鉴定的进展

本文以第９版伯杰鉴定细菌学手册（１９９４年）为基础,简述肠杆菌科细菌分类与命名历史、鉴定与鉴别特性,着重介绍１９８４￣１９９４年新增加的１０个属的生物学特性和鉴别要点。     

水稻根际兼性厌氧催娩克氏杆菌和阴沟肠杆菌的固氮与氢代谢

兼性厌氧细菌Enterobacter cloacae菌株E-26和Klebsiella oxytoca菌株NG-13的氢酶与固氮酶同时形成。固氮的最佳碳源为蔗糖、葡萄糖和丙酮酸,此外延胡索酸和苹果酸也能支持固氮。支持固氮的碳源也支持放氢,两者动力学基本一致。40％乙炔预处理后,吸氢活性下跌,放氢量未增加;NH_4~ 抑制固氮酶,但未导致放氢量降低;可能E-26菌株的放氢主要依赖于氢酶。菌株E-26和NG-13的吸氢反应,既能以O_2为电子受体,也能以延胡索酸、硝酸、MB为电子受体。但仅延胡索酸为电子受体时,E-26菌的固氮活性被分子H_2促进,它的氢吸收利用与固氮相偶联;而在CO_2和NH_4~ 代谢与H_2利用之间并无明显相关性,吸氢活性不被CO_2和NH_4~ 促进。