热休克蛋白90的N端与ATP类似物的晶体结构揭示其功能调控

分子伴侣热休克蛋白90(Hsp90)对于许多涉及细胞周期调控、信号转导以及细胞生长调控蛋白质的折叠、成熟及稳定是必需的．Hsp90的N端结构高度保守,包含一个ATP结合口袋并具有ATP酶活性,Hsp90的功能依赖于ATP与Hsp90结合后诱导的构象重排及之后的ATP水解．为了深入研究ATP与Hsp90结合后N端的结构及其功能状态,使用悬滴法共结晶了Hsp90的N端与ATP类似物AMPPNP及ATPγS的复合物,并利用分子置换法对其结构进行了解析．两个复合物晶体结构都捕获到了核苷酸的电子密度,尤其是γ-磷酸的电子密度,从而观察到γ-磷酸与蛋白质之间的相互作用．ATPγS中γ-磷酸的捕获证实了之前报道的结构中没有捕获到γ-磷酸是其处于无序状态而非被水解．单体状态下的人源Hsp90^N- AMPPNP与处于二聚体化的酵母Hsp90-AMPPNP结构对比可见S1和ATP lid的位置有明显区别,结构分析表明,E18-K100和N40-D127之间形成的氢键相互作用,在一定程度上阻碍了S1和ATP lid的摆动,很可能阻止了二聚体的形成．     

应用无创通气治疗56例COPD患者呼吸衰竭的临床分析

目的探讨无创通气在慢性阻塞性肺疾病（COPD）呼吸衰竭的应用价值。方法将急性加重期COPD患者56例分为无创通气组26例和有创通气组30例,观察患者上机前、上机后30min、上机后2天的血气变化,机械通气天数,住院天数。费用及并发感染等指标。结果有创通气组上机30min后PaO2升高、PaCO2下降、pH的恢复幅度明显快于无创通气组（P〈0．01）.但2天后两组PaO2、PaCO2、pH差异无显著性（P〉0．05）。无创通气组机械通气天数、住院天数、费用以及院内感染的发病率明显低于有创通气组（P〈0．01）。无创通气组明显嗜睡者12例．占27．3％,其中10例经无创通气治疗后清醒,无需有创通气。结论无创通气治疗急性加重期COPD患者呼吸衰竭是一种方便有效的方法。     

脊尾白虾血蓝蛋白大亚基基因的克隆及表达分析

应用RACE技术克隆脊尾白虾血蓝蛋白大亚基基因, 并通过攻毒实验揭示脊尾白虾血蓝蛋白基因的先天免疫防御作用, 为脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)的免疫防治研究提供依据和思路。研究成功克隆了脊尾白虾血蓝蛋白大亚基基因全长cDNA序列, 该大亚基cDNA全长 2192 bp, 开放式阅读框长 2034 bp, 5′非编码区长 21 bp, 3′非编码区长 137 bp, 将该基因命名为 EcHcL。EcHcL编码 667 个氨基酸, 前 21 个氨基酸组成信号肽, 推测成熟肽的分子量为 78.5 kD。Blast比对结果显示, 由脊尾白虾血蓝蛋白EcHcL序列推导的氨基酸序列与日本沼虾、凡纳滨对虾血蓝蛋白氨基酸序列的同源性分别达到 87%、73%, 其M结构域氨基酸序列与斑节对虾、日本对虾等物种同源性性高达 90% 左右, 由此推断该cDNA序列属于血蓝蛋白家族。组织表达分析结果显示, EcHcL基因在脊尾白虾鳃、卵巢、肝胰腺、心脏、肠、肌肉、胃、腹神经节、眼柄、血细胞中均有表达, 肝胰腺中相对表达量最高。Real-time PCR分析发现EcHcL基因在金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌和对虾白斑综合征病毒(WSSV)感染后脊尾白虾肝胰腺和血细胞中的表达量显著增加, 并具有不同的时空表达模式, 推测脊尾白虾EcHcL基因在免疫防御中具有重要作用。     

金线莲多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞体外增殖、分泌NO及细胞因子的影响

本试验旨在研究金线莲多糖(ARP)对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞体外增殖、NO及细胞因子IL-2、IL-6、IFN-γ分泌水平的影响。MTT法检测小鼠脾淋巴细胞体外增殖;Griess法检测NO分泌水平;ELISA法检测细胞因子IL-2、IL-6、IFN-γ的含量。结果显示,与对照组比较,ARP在50~400μg/m L可明显促进免疫抑制小鼠脾淋巴细胞体外增殖(P0.01),促进NO分泌(P0.01),促进细胞因子IL-2、IL-6和IFN-γ分泌(P0.05,P0.01)。以上结果提示ARP能提高免疫抑制小鼠脾淋巴细胞体外免疫活性,其作用机制可能与促进免疫抑制小鼠脾淋巴细胞增殖,促进NO产生以及提高IL-2、IL-6、IFN-γ的分泌水平有关。     

生地黄对内毒素诱导的急性肺损伤的保护作用

目的:以中医辨证论治为基础,研究生地黄对急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(acute lung injury/acute respiratory distress syndrome,ALI/ARDS)的干预作用。方法:将大鼠分为对照组、模型组、生地黄预防组、生地黄治疗组,通过气管注射脂多糖(LPS)制备大鼠ALI/ARDS模型,酶联免疫法(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)含量的变化,考马斯亮蓝法测定BALF中总蛋白含量,BALF细胞悬浮液离心涂片Giemsa染色后光镜下细胞分类计数,H.E.染色肺部组织并通过光镜观察其形态学变化,分析生地黄水提物对ALI的保护作用。结果:生地黄干预组BALF中TNF-α、IL-6含量明显降低(P0.0),蛋白含量明显降低(P0.0),中性粒细胞数(Polymorphonuclear cells,PMN)和炎症细胞总数明显降低(P0.0),肺部病理损伤减轻。结论:生地黄对ALI可能具有保护作用,对ALI/ARDS可能具有潜在的治疗价值。     

不同镇痛镇静方案对机械通气重症肺炎患者的临床价值研究

目的 探讨不同镇痛镇静方案对机械通气重症肺炎患者的干预价值。方法 选取2019年6月至2020年5月在我院行机械通气治疗的重症肺炎患者80例,按照随机数字表法分为两组各40例,对照组给予枸橼酸舒芬太尼加右美托咪定进行镇痛镇静干预,观察组在对照组的基础上联合丙泊酚进行镇痛镇静干预,观察比较两组干预前后的平均动脉压(MAP)、心率(HR)、呼吸频率(RR)以及机械通气时间、拔管时间、入住重症监护病房(ICU)时间。结果 干预前,两组的MAP、HR、RR水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);干预后,观察组的MAP、RR水平均高于对照组,HR水平低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。两组患者的机械通气时间、拔管时间及入住ICU时间比较,观察组均短于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 枸橼酸舒芬太尼加右美托咪定联合丙泊酚应用于机械通气重症肺炎患者,能明显改善临床症状体征,缩短机械通气时间及入住ICU时间,值得临床应用。     

Internet上的分子生物学免费软件资源

Ｉｎｔｅｒｎｅｔ的迅猛发展使得大量的分子生物学数据库和软件与之连接［１］,为分子生物学的研究带来了极大的便利,为生命科学的研究带来了机遇和挑战。生命科学网络资源的利用应当成为我国生命科学工作者的必备素质之一。本文简单介绍常用的基于Ｍａｃｉｎ－ｔｏｓｈ...     

粟长孺孢菌的异核现象

本文报道了粟长孺孢的菌(Hetminthosporium setariae)的异核现象。用γ-射线和甲基磺酸乙酯诱变获得的颜色、形态和营养突变株(H8、Hw)可在基本培养基上形成异核体(8W)。其以上各种特性不同于亲本。 8W分离之后的突变株可稳定地传代,混合后仍能形成异核体。从而证实了该菌的异核性。观察并测定了亲本株和异核体的生长率、致病性及产孢能力。粟长孺孢菌(H8)和玉蜀黍长孺孢菌(866·R-8)可形成种间异核体。     

乳酸杆菌的质粒及耐药性质粒

乳酸杆菌的质粒及耐药性质粒中国药品生物制品检定所北京１０００５０李健袁佩娜乳酸杆菌是人类等脊椎动物消化道和生殖道等的正常菌群之一,同时也存在于一些昆虫体内,在植物中也有发现。乳酸杆菌可以产生多种维生素、蛋白质等物质,还可以调节宿主免疫功能,具有重要的...