基于液质联用的莱茵衣藻极性甘油酯组定性定量分析

以模式藻株莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)为材料, 基于液质联用技术对其极性甘油酯组进行定性定量分析。通过综合利用UPLC-ESI-Q-Trap/MS的一级质谱扫描(中性丢失或母离子扫描)及UPLC-ESI-Orbitrap/MS²的二级碎片信息扫描, 共鉴定出109种极性甘油酯分子; 再通过外标法利用UPLC-ESI-Q-Trap/MS在多级反应监测模式下对各分子进行靶向定量分析。结果表明, 莱茵衣藻的极性脂以糖脂MGDG、DGDG及甜菜碱脂DGTS为主, 所有极性脂的分子组成表明, DGDG、SQDG、DGTS及PI是C18脂肪酸的去饱和载体。该研究利用液质联用技术建立了莱茵衣藻极性甘油酯组的结构图谱及定量分析技术平台, 为微藻极性脂生物学功能及脂质代谢研究奠定了基础。     

辽宁植被区划的研究

作者在1:50万植被类型图上,采用定量与定性相结合的方法,将辽宁省划分为7个一级植被区、15个二级植被区和25个三级植被区。 分出的每级植被区,不仅具有定量的依据,而且符合植被的区域分异规律。 最后作者提出本植被分区所遵循的区划程序。     

转基因水稻检测用阳性质粒分子的构建及应用

通过分析转基因水稻(Oryza sativa)中调控元件和功能基因的种类及应用频率,结合水稻基因工程研究中标记基因的使用情况,确定将CaMV35S启动子、NOS终止子,标记基因Bar、HPT和NPTⅡ基因作为转基因水稻的筛查检测靶标。通过重叠延伸PCR技术,将水稻内标基因SPS、筛选靶标(CaMV35S启动子、NOS终止子、Bar基因、HPT基因和NPTⅡ基因)、事件特异性检测靶标(TT51-1、KF-6和KMD1)聚合克隆到质粒载体上,构建质粒分子pBS Rice。应用结果表明,阳性质粒分子pBS Rice既适用于转基因水稻的筛查检测,也适用于抗虫水稻TT51-1、KF-6和KMD1的事件特异性检测。研究结果为转基因水稻安全监管提供了一种不依赖于转基因水稻原材料供应的阳性对照,其对目前国内外批准的转基因水稻检出率达100%,满足了监管过程中转基因水稻的检测需要。     

利用Poincare 散点图法检测t 波交替的指标研究

目的:利用Poincare散点图进行t波交替检测,不仅从形态上找到检测标准,进一步研究散点中有效的定量指标。方法:以European ST-T Database标准心电数据库和MIT-BIH心律失常数据库的心电信号作为检测对象,以128个连续心拍的t波中的7个点为检测数据,相邻心拍t波差分后组成新序列,并由差分序列作出散点图,观察散点形态。根据形态区别和t波交替的幅值变化特点,利用个散点到x+y=0直线的距离均值作为定量检测指标D0,为避免不同心电信号幅值影响,D0除以RQ峰值差为最终指标D,找出合适阈值判定是否存在t波交替,并与谱分析法的检测结果比较分析。结果:①从Poincare散点图形态上,存在t波交替的散点图与正常t波存在明显区别,存在t波交替则散点集中在以x+y=0为轴线的附近,形成类似椭圆的狭长形状;而正常t波形成的散点会以原点为中心均匀分布,散点形态为圆形。②由t波交替的特点和散点图形态可知,定量检测指标D越小,就越有可能存在t波交替。经过大量仿真测试和谱分析法的比较,规定检测标准为,当D<=35uv时,存在t波交替;指标D与谱分析法的结论相吻合,并且两种方法的判定结果由kappa一致性检验,一致性程度好,进一步说明D指标具有优越的敏感性,是t波交替检测的有效指标。结论:Poincare散点图的散点分布形态和散点到x+y=0轴线的距离均值分别是是t波交替有效的定性和定量检测指标。     

一种定性比较抗体相对亲和力的酶联免疫吸附测定方法

目的:建立一种简便的对抗体相对亲和力进行定性比较的酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,以便快速、简便地从大量抗体突变体中挑选高亲和力突变体。方法:将待测抗体倍比稀释后用直接ELISA方法进行定量,同时用相同浓度抗体作为一抗与抗原进行间接ELISA反应,以前者吸光度值为横轴、后者吸光度值为纵轴绘制散点图,通过拟和后的曲线判断抗体亲和力高低,并通过BIA-core法对该方法的准确性进行验证。结果:通过该方法获得的抗体亲和力高低情况与经测定抗体亲和力得出的结果一致。结论:该ELISA方法是一种简便可行、准确有效的抗体亲和力定性比较方法,可以应用于不同抗体的亲和力成熟比较研究。     

山西市场动物饲料中转基因成分的检测

为了评估转基因玉米和大豆在山西动物饲料市场的占有率和标识情况,采用改良十六烷基三甲基溴化铵法 (Hexadecyltrimethy ammonium bromide, CTAB) 提取山西市场抽取的30份鸡和猪饲料,通过定性PCR打包筛查,对检测阳性结果打包饲料拆包并检测CaMV 35S启动子、NOS终止子、玉米内标zSSIIb、大豆内标Lectin和CryIA (b)基因。同时检测玉米和大豆转化体事件MON810和GTS40-3-2。结果表明,83.3%的饲料含有转基因成分。所抽取的玉米、大豆、猪饲料和鸡饲料转基因成分阳性率分别为6.67%、100%、93.3%和73.3%。实时荧光定量PCR检测结果与定性PCR一致。结果提示,鸡和猪饲料中转基因成分在山西市场的占有率较高。     

过氧化物酶的定性反应实验的改进

过氧化物酶(peroxidase)广泛存在于植物组织中,少数动物组织也有该酶的存在。过氧化物酶能催化过氧化氢对各种多元酚式芳香族胺的氧化,即 ZMH~++H_2O_2→ZM+H_2O,是生物细胞代谢中起氧化还原反应的重要酶类,在生物氧化中具有重要的位置。此外,它还能有效地防止过氧化氢在机体内的积累,促进组织代谢,对机体具有独特的保护作用。由于该酶在生物氧化、组织代谢等生物化学反应中的重要地位,人们对它的存在、分布、含量、理化性质、提取纯化及结构等方面颇为重视,在诸方面都进行了较深刻的     

人参归脾丸薄层鉴别

目的:控制人参归脾丸的质量。方法:采用薄层色谱法(TLC)对人参归脾丸的主要成分人参、白术和甘草进行定性鉴别。结果:在TLC色谱中可检出人参、白术和甘草。结论:本方法准确可靠,可以用于人参归脾丸的质量控制。     

原发性甲状旁腺功能亢进症定性诊断与手术方式探讨

目的:目前原发性甲状旁腺功能亢进症的术前诊断较为困难,不同手术方式对预后的影响也不一样。本文探讨原发性甲状旁腺功能亢进症定性诊断方法与手术方式,提高诊断准确率,并针对不同病因采取不同手术方式,尽可能改善患者预后。方法:选取我院36例确诊为PHPT的患者,经不同检查方法组合(实验室检查+X线影像检查,实验室检查+B超检查、99 Tcm-甲氧异丁基异腈核素扫描检查,X线影像检查+B超检查、99 Tcm-甲氧异丁基异腈核素扫描检查,实验室检查+X线影像检查+B超检查、99 Tcm-甲氧异丁基异腈核素扫描检查)进行检查,采用统计学软件spss13.0经行统计学分析,比较各组之间的诊断符合率。结果:4种方式结合(实验室检查+X线影像检查+B超检查+99Tcm-甲氧异丁基异腈核素扫描检查)检查的诊断符合率最高;针对不同原发性甲状旁腺功能亢进症的病因,采取不同手术方式进行治疗,甲状旁腺腺瘤、甲状旁腺增生治疗效果好,腺癌例数不足,手术效果需进一步证实。结论:实验室检查,X线影像检查,B超,99 Tcm-甲氧异丁基异腈(sestamibi,MIBI)核素扫描检查的结合对PTPH的定性诊断效果好,对于不同的PHPT病因,正确选择手术方式可以改善患者的预后。     

定性PCR技术及卡那霉素对8个番茄品种的转基因检测

本研究利用定性PCR技术对8个不同番茄品种中外源基因35S启动子、NPTⅡ基因和NOS终止子进行检测.实验结果表明,阳性对照可以稳定扩增到预期的大小片段,而待检测品种和阴性对照则没有扩增到预期产物.利用100 mg/L的卡那霉素对8个不同番茄品种的种子进行萌发试验,再用50 mg/L的卡那霉素对番茄外植体(子叶和下胚轴)进行抗性验证,结果显示卡那霉素抗性筛选实验结果与定性PCR结果一致.本文通过对这两种检测方法的优缺点进行研究分析及比较,初步建立了一个对不同品种番茄进行转基因检测的体系.