t-PA cDNA在CHO细胞中的高效稳定表达

我们曾报道t-PA mRNA非翻译区序列对其表达有明显的抑制作用,在此基础上,通过对5′-UTR及3′-UTR的改造,使t-PA在COS-7细胞中的表达水平提高30倍左右。将t-PA表达质粒用电击法转染中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶缺陷株(CHO-dhfr),经过混合加压及筛选,在CHO细胞中高效表达了t-PA,表达水平达到5000～6000 IU/10~6细胞/24hr。重组t-PA具有与天然t-PA相同的分子量及酶活性。经过8个月连续传代,表达水平未下降,表明细胞株是稳定的,其主要指标均符合工程细胞株的要求。     

细脚拟青霉菌菌种保藏与复壮

细脚拟青霉菌在人工培养条件下容易退化。通过菜粉蝶虫体的人工接种感染后再分离,可使其复壮。人工诱发感病的菜粉蝶蛹在４℃条件下保藏期长,不易退化。温度处理试验表明,３１－３５℃处理１小时有刺激菌丝生长的作用。     

我国常见的海产多毛环节动物

我国常见的海产多毛环节动物孙瑞平,杨德渐（中国科学院海洋研究所青岛）（青岛海洋大学生物系２６６００３）多毛环节动物是环节动物中以海洋物种为主的最大的一个纲。身体由头部、躯干部和尾（肛）部组成。头部的口前叶和围口节常具感觉附肢（触角、触手或触须）或具外...     

华南淡水鱼类单殖吸虫的研究──XVI．锚首虫属一新种（指环虫目：锚首虫科）

从广西荔蒲河所产的美丽小条鳅Ｍｉｃｒｏｎｏｅｍａｃｈｅｉｌｕｓｐｕｌｃｈｅｒ（ＮｉｃｈｏｌｓｅｔＰｏｐｅ）鳃上采得单殖吸虫一种,经鉴定为锚首虫属一新种──小脊锚首虫,Ａｎｃｙｒｏｃｅｐｈａｌｕｓｌｉｒｅｌｌａｔｕｓｓｐ．ｎｏｖ。新种与Ａ．ｂｏｔｉａｅ．Ｍａｅｔａｌ．１９８１后吸器几了质结构相似,但雄性交接器,阴道结构显著不同。     

抗人PAI－1单克隆抗体制备、鉴定和应用

以重组PAI－（rPAI－1)为抗原,通过杂交瘤技术获得6株阳性杂交瘤细胞(Apl、AP2、AP3、AP4、AP5和AP6),并用SPA亲和层析纯化了抗Pal－1单克隆抗体(McAb)。所有McAb均能识别rPAI和天然PAI－1,腹水滴度均为10　6以上。6种McAb对PAI－1亲和常数在3．45×10⁷--1.05×10⁹mol／L之间。AP2、AP3McAb能完全抑制PAI－1活性,AP4、AP和AP6只能部分抑制PAI－1活性,Apl则不抑制PAI-1活性。6种McAb中只有Apl、AP4和AP5能识别Pal－1／t－PA复合物。利用Apl、AP3、和AP4 McAb制备免疫亲和柱一步纯化HepG2细胞分泌的PAI－1,纯度大于98％,回收率92％,纯化倍数51倍。利用抗PAI－1 McAb建立了夹心法ELISA,测定了人血浆PAI－1水平,正常人血浆PAI－1平均含量(X士D)为24．7±7．75ng／ml。     

抗人PAI—1单克隆抗体制备,鉴定和应用

以重组PAI-(rPAI-1)为抗原,通过杂交瘤技术获得6株阳性杂交瘤细胞(AP1、AP2、AP3、AP4、AP5和AP6),并用SPA亲和层析纯化了抗PAI-1单克隆抗体(McAb)。所有McAb均能识别rPAI和天然PAI-1,腹水滴度均为10~6以上。6种McAb对PAI-1亲和常数在3.45×10~7—1.05×10~9mol/L之间。AP2、AP3 McAb能完全抑制PAI-1活性,AP4、AP和AP6只能部分抑制PAI-1活性,AP1则不抑制PAI-1活性。6种McAb中只有AP1、AP4和AP5能识别PAI-1/t-PA复合物。利用AP1、AP3、和AP4 McAb制备免疫亲和柱一步纯化HepG_2细胞分泌的PAI-1,纯度大于98％,回收率92％,纯化倍数51倍。利用抗PAI-1 McAb建立了夹心法ELISA,测定了人血浆PAI-1水平,正常人血浆PAI-1平均含量(±D)为24.7±7.75ng/ml。     

横纹肌肌原纤维的第三肌丝──肌联蛋白

实验研究证明,在动物横纹肌肌原纤维中,除包含有粗肌丝、细肌丝外,还有纤肌丝的存在,肌联蛋白（肌巨蛋白）是具有挠性的线状蛋白质,分子量为3000 000,长度约为0.9μm,跨越肌原纤维的M－线和Z－线,形成纤肌丝.其生理功能是在粗肌丝装配中具有分子模板作用,并将粗肌丝稳定于肌原纤维肌小节中央以及可参与肌球蛋白活性的调节.