| 抗人PAI—1单克隆抗体制备,鉴定和应用 |
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| 引用本文： | 丁皓,吴晓俐.抗人PAI—1单克隆抗体制备,鉴定和应用[J].生物工程学报,1994,10(2):135-141. |
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| 作者姓名： | 丁皓 吴晓俐 |
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| 作者单位： | 上海医科大学分子遗传学研究室，上海医科大学分子遗传学研究室，上海医科大学分子遗传学研究室，上海医科大学分子遗传学研究室，上海医科大学分子遗传学研究室 上海 200032，上海 200032，上海 200032，上海 200032，上海 200032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金39040001 |
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| 摘 要： | 以重组PAI-(rPAI-1)为抗原,通过杂交瘤技术获得6株阳性杂交瘤细胞(AP1、AP2、AP3、AP4、AP5和AP6),并用SPA亲和层析纯化了抗PAI-1单克隆抗体(McAb)。所有McAb均能识别rPAI和天然PAI-1,腹水滴度均为10~6以上。6种McAb对PAI-1亲和常数在3.45×10~7—1.05×10~9mol/L之间。AP2、AP3 McAb能完全抑制PAI-1活性,AP4、AP和AP6只能部分抑制PAI-1活性,AP1则不抑制PAI-1活性。6种McAb中只有AP1、AP4和AP5能识别PAI-1/t-PA复合物。利用AP1、AP3、和AP4 McAb制备免疫亲和柱一步纯化HepG_2细胞分泌的PAI-1,纯度大于98％,回收率92％,纯化倍数51倍。利用抗PAI-1 McAb建立了夹心法ELISA,测定了人血浆PAI-1水平,正常人血浆PAI-1平均含量(±D)为24.7±7.75ng/ml。
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| 关 键 词： | 纤溶酶原激活剂抑制物(PAI一1) 单克隆抗体 纯化 夹心法ELISA |
Preparation, Characterization and Application of Monoclonal Antibodies Against PAI-1 |
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| Ding Hao Wu Xiaoli Zhou Xinhua Zhu Yunsong Song Houyan.Preparation, Characterization and Application of Monoclonal Antibodies Against PAI-1[J].Chinese Journal of Biotechnology,1994,10(2):135-141. |
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| Authors: | Ding Hao Wu Xiaoli Zhou Xinhua Zhu Yunsong Song Houyan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) McAb purification sandwich ELISA |
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