HSP70系统分析与ER的起源

HSP 70是迄今研究过的进化上最保守的蛋白质之一,是分子伴侣的主要成分,对蛋白的跨膜转运及特定构象的维持等起着重要作用。对其序列进行系统分析表明,古细菌,真细菌和真核细胞内的HSP 70虽具有很强的相似性,但各具特点。真核细胞各区室(细胞器)的HSP 70顺序也既有共性,又有特性。根据ER HSP 70的特点,可推测出ER起源于真核细胞诞生的早期阶段,并由此引起细胞内的区室化,这是真核细胞区别于原核细胞的本质特征之一。     

Cdk1在浆液性卵巢癌中的表达及其与化疗耐药及预后的相关性

目的:卵巢癌是女性生殖致死率最高的恶性肿瘤。Cdk1作为细胞周期依赖性激酶中的核心分子,对肿瘤细胞的发生发展具有重要作用。本文旨在探讨Cdk1蛋白在上皮性浆液性卵巢癌中的表达情况,并分析其表达水平与患者临床病理特征、化疗反应及预后之间的关系。方法:采用免疫组化法检测68例浆液性卵巢癌中Cdk1蛋白的表达情况,并结合临床资料分析Cdk1蛋白的表达水平在浆液性卵巢癌患者中的意义。结果:Cdk1在浆液性卵巢癌患者中具有不同程度的阳性表达,其表达水平和患者的年龄、病理分化程度、淋巴结转移情况及临床分期无明显相关性(P0.05),但是其高表达与化疗耐药明显相关(P=0.040)。化疗耐药的卵巢癌患者中Cdk1的蛋白表达明显高于化疗敏感组,并且生存分析发现,高表达Cdk1的患者预后较差。结论:本研究证明Cdk1在浆液性卵巢癌中有较高表达,并且Cdk1的表达与卵巢癌化疗后复发有关,高的Cdk1表达预示着较差的预后。Cdk1可能是晚期浆液性卵巢癌治疗的新靶点。     

PDGF-A在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达及其临床意义

目的:探讨血小板源性生长子A(Platelet derived growth factor-A,PDGF-A)在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达及其临床意义。方法:以哈尔滨医科大学附属第四医院眼科2011年6月~2012年1月收治的72例年龄相关性白内障晶状体前囊膜作为实验组,10例无白内障发生的透明晶状体前囊膜作为正常对照组,采用SP免疫组织化学方法分别检测两组上皮细胞中PDGF-A的表达,运用图像分析软件进行量化,并采用SPSS11.0软件进行统计学分析探讨其与年龄相关性白内障临床特征之间的关系。结果:年龄相关性白内障及透明晶状体上皮细胞中均有PDGF-A表达,且在年龄相关性白内障中表达明显高于透明对照组,差异有统计学意义(P0.05)。随晶状体混浊程度加重,PDGF-A强阳性表达率逐渐升高,差异有统计学意义(P0.05);另外,不同年龄组白内障人群中PDGF-A表达无显著性差异(P0.05)。结论:①PDGF-A在年龄相关性白内障患者晶状体上皮细胞中呈高表达;②年龄相关性白内障患者中PDGF-A的表达量与晶状体的混浊程度呈正相关;③PDGF-A的过度表达可能在年轻人白内障的发生中起到了重要作用。     

A549肺癌细胞株中癌睾丸抗原的表达及生物学意义研究

目的:癌睾丸抗原(cancer-testis antigen,CTA)是一类主要表达于睾丸组织和癌组织,并具有较强诱导体液和细胞免疫应答能力的抗原,可以作为抗肿瘤的理想靶分子。本研究探讨了A549肺癌细胞系中CTA的表达情况及其生物学意义。方法:本研究中选取了A549肺癌细胞株,运用RT-PCR的方法检测了其中九种常见CTA的表达情况,进一步通过AV-PI双染法观察了表柔比星,紫杉醇,卡铂,伊立替康,依托泊苷五种化疗药物对A549细胞的凋亡作用及其调控CTA表达的情况。另外用转化生长因子β1(TGF-β1)处理A549细胞,验证了TGF-β1促进细胞生长的作用,进一步检测此时CTA的表达调控。结果:结果显示MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1,HCA661在A549细胞系中稳定表达,表柔比星能够强烈诱导细胞发生凋亡,其诱导作用岁浓度增高而增强。表柔比星下调了MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1的表达,对HCA661的表达无影响。TGF-β1增强了肿瘤细胞增殖能力,与此同时下调HCA661的表达,对MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1的表达无影响。结论:MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1,HCA661在肺癌细胞系A549中稳定表达。TGF-β1作用48小时,使HCA661的表达下调,MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1的表达无变化。表柔比星作用48小时,使MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1的表达下调,HCA661表达无影响,卡铂,紫杉醇,伊立替康,依托泊苷对CTA的表达无调控,为进一步明确CTA的表达调控机制奠定了研究基础,同时为将HCA661作为临床中诊断与治疗的新靶点提供了可行性。     

基于比浊法的杆菌肽定量测定方法优化

杆菌肽在研究应用过程中,定量测定方法不统一,结果缺乏参考性。为规范其测定方法,拟通过建立杆菌肽浓度对数值与OD600之间的线性关系,以重复性和精密度为指标,优化指示菌初始浓度、杆菌肽溶液与菌悬液的比例、培养时间等因素,确定比浊法测定杆菌肽抑菌活性的方法。结果显示,比浊法的最适测定条件为:指示菌初始浓度107 CFU/mL,杆菌肽溶液与菌悬液比例1∶9,培养时间4 h,在此条件下,线性关系良好,R2达到0.99以上,且具有良好的重复性。进一步选用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌验证方法的可行性,方法重复性好,精密度高。研究结果将为比浊法的进一步应用以及杆菌肽在试验和生产过程中的定量测定提供参考和依据。     

河北省丙型肝炎病毒基因分型研究

Using nested RT-PCR and type special primers of HCV, we performed genotype analysis of HCV RNA from five representative cities in Hebei Province. Among 168 samples with HCV RNA, 104 sera was typelb(61.9%), type 2a account for 22.6% (38/168) , and lb/2a mixed-type was 15.5% (26/168) . The results indicate that typelb is the dominance strain in Hebei Province. Compared with type 2a, typelb has important relationship with chronic hepatitis C. This study build up some foundations for diagnosis, treatment and vaccine study of hepatitis C.     

误诊2年的左上臂难辨认体癣1例

报道1例由须癣毛癣菌引起的难辨认体癣。患者女,45岁,左臂伸侧多处红斑、丘疹伴脱屑、瘙痒2a余。曾多次就医诊断不明,患处皮损取活检做病理检查倾向于＂银屑病＂但疗效不佳。刮取皮屑镜检见真菌菌丝,小培养见葡萄串状小分生孢子及螺旋菌丝,尿素酶试验阳性,毛发穿孔试验阳性,鉴定为须癣毛癣菌。经内服特比萘芬和外用萘替芬酮康唑乳膏治疗28d后皮损消退,复查真菌阴性。     

miR-375 在AGEs介导糖尿病血管损伤细胞中的生物学功能

目的：探讨miR-375 在血管损伤细胞中的表达及生物学功能。方法：利用基因克隆技术构建miR-375表达载体;然后将 miR-375 表达质粒转染至血管损伤细胞中,同时分别设立Huvec12对照组,血管损伤细胞组,血管损伤抑制组,Huvec12 转染 miR-375 组。24h 后收集细胞,在mRNA 和蛋白水平检测Mtpn、NFγB、profilin1、sICAM1 的表达,经荧光染色观察细胞F-actin 的 变化,再用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：血管损伤细胞中过表达miR-375后,在mRNA和蛋白水平靶基因Mtpn 下降,NFγB 的表达活性下降,使糖尿病血管病变的标志profilin1 下调;F-actin 表达恢复;细胞粘附因子（sICAM1）表达下降,细胞凋亡减少。 结论：初步证明miR-375 可以抑制AGEs 介导的糖尿病血管细胞损伤的发生,可能成为糖尿病血管损伤并发症基因治疗的靶点。     

猪γ干扰素基因的克隆、表达及其纯化

以RT-PCR方法,从经丝裂原诱导的猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增出编码猪IFNγ的基因。经测序证实后插入载体pJLA503,并实现在大肠杆菌中的高表达。表达产物以包涵体形式存在,经7mol/L盐酸胍变性及精氨酸存在的情况下复性。再经DEAE-Sepharose离子交换柱、Sephdex-200凝胶过滤柱分离获得电泳单一纯猪IFN-γ蛋白,细胞病变抑制实验检测纯化产物有干扰素活性。