苏云金芽胞杆菌γ-氨基丁酸代谢途径相关功能基因的克隆、表达及同源性分析

γ-氨基丁酸代谢旁路作为三羧酸循环的一个分支,在真核、原核生物中广泛存在。在这条代谢途径中,涉及γ-氨基丁酸分解代谢的主要有两种酶:一种是γ-氨基丁酸转氨酶,能将γ-氨基丁酸转变成琥珀酸半醛;另一种是琥珀酸半醛脱氢酶,该酶能将琥珀酸半醛氧化形成琥珀酸,后者进入三羧酸循环。从国内分离得到的苏云金芽胞杆菌G03菌株中克隆了gabT和gabD基因。其中gabT基因含有1440bp,编码一个大小为52.6kD的蛋白质,而gabD基因大小为1449bp,编码一个52.2kD的蛋白质。这两个基因都分别在大肠杆菌中进行了表达和纯化。通过酶活测定结果表明,GabT和GabD蛋白分别呈现出γ-氨基丁酸转氨酶和琥珀酸半醛脱氢酶的活性。氨基酸序列同源性比对分析发现,这两个蛋白质在蜡样芽胞杆菌群(B.cereus group)中具有较高的相似性,而与枯草芽胞杆菌的相似性较低则分别为58%、51%。为进一步深入研究γ-氨基丁酸代谢旁路在苏云金芽胞杆菌中的生物学功能及其转录调控机制奠定了基础。     

Bcl-2 和COX-2 在宫颈鳞癌中的表达及其临床意义

目的：观察Bcl-2 和COX-2 在正常宫颈和宫颈鳞癌中的表达情况,并探讨其与宫颈鳞癌发生发展的关系。方法：应用免疫组 织化学S-P法检测40 例宫颈鳞癌组织、10 例正常宫颈组织中Bcl-2 和COX-2 的表达情况。结果：(1)Bcl-2 在正常宫颈组织和宫颈 鳞癌组织中的阳性表达率分别为30.0%、72.5 %(P<0.05),而COX-2在正常宫颈组织和宫颈鳞癌组织中的阳性表达率分别为0.0 %、 60.0 %(P<0.05)。(2)在宫颈鳞癌中,Bcl-2 的表达与宫颈鳞癌的病理分级、临床分期以及淋巴结转移无关(P>0.05),而COX-2 的表达 与宫颈鳞癌的病理分级及淋巴转移有关(P<0.05),与临床分期无关(P>0.05)。(3)Spearman 等级相关性分析显示宫颈鳞癌组织中 Bcl-2 和COX-2的表达呈正相关(r=0.517,P<0.01)。结论：Bcl-2 和COX-2 在宫颈鳞癌中的表达升高并呈显著正相关,且COX-2的 表达与宫颈鳞癌的淋巴转移有关,二者在宫颈癌的发生发展中可能起重要作用,有可能作为评估宫颈鳞癌淋巴结转移的参考指 标。     

Bcl-2和COX-2在宫颈鳞癌中的表达及其临床意义

目的：观察Bcl-2和COX-2在正常宫颈和宫颈鳞癌中的表达情况,并探讨其与宫颈鳞癌发生发展的关系。方法：应用免疫组织化学s-P法检测40例宫颈鳞癌组织、10例正常宫颈组织中Bcl-2和COX-2的表达情况。结果：（1）Bcl-2在正常宫颈组织和宫颈鳞癌组织中的阳性表达率分别为30．0％、72．5％（P〈0．05）,而COX-2在正常宫颈组织和宫颈鳞癌组织中的阳性表达率分别为0．0％、60．0％（P〈0．05）。（2）在宫颈鳞癌中,Bcl-2的表达与宫颈鳞癌的病理分级、临床分期以及淋巴结转移无关（P〉0．05）,而COX-2的表达与宫颈鳞癌的病理分级及淋巴转移有关（P〈0．05）,与临床分期无关（P〉0．05）。（3）Spearman等级相关性分析显示宫颈鳞癌组织中Bcl-2和COX-2的表达呈正相关（r=0．517,P〈0．01）。结论：Bcl-2和COX-2在宫颈鳞癌中的表达升高并呈显著正相关,且COX-2的表达与宫颈鳞癌的淋巴转移有关,二者在宫颈癌的发生发展中可能起重要作用,有可能作为评估宫颈鳞癌淋巴结转移的参考指标。     

芽孢杆菌γ-氨基丁酸代谢旁路研究进展

-γ氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是一种在生物体中普遍存在的四碳非蛋白质氨基酸,具有较为广泛的生理功能。其代谢是通过GABA旁路(GABA shunt)来完成的。现就其基本性质、代谢调控特点、表达调控机制及其生理功能等方面分别介绍芽孢杆菌γ-氨基丁酸代谢旁路的研究进展。系统研究苏云金芽孢杆菌中γ-氨基丁酸代谢旁路的调控机制和生理功能,有可能为进一步了解其杀虫晶体和芽孢的形成机制提供思路和线索。     

两步法硫酸水解热凝胶生产β-1,3-葡寡糖

对硫酸水解热凝胶制备β-1,3-葡寡糖进行了研究。首先建立了葡寡糖的分析方法,采用半制备HPLC分离热凝胶水解液得到β-1,3-葡寡糖,利用ESI-MS和TLC技术对分离组分进行了成分鉴定。考察了反应温度和反应时间对热凝胶寡糖收率的影响,结果表明,两步法硫酸水解获取低聚合度β-1,3-热凝胶寡糖(DP 2~6)的较优水解条件为:1.0 mol/L硫酸于70℃水解1%热凝胶6h,回收水解残留物后于80℃继续水解3 h;对于较高聚合度寡糖(DP 7~10)两步水解时间分别为4 h和1 h较为合适。     

干旱和复水对崖柏光合特性及水分利用效率的影响

以4年生崖柏(Thuja sutchuenensis Franch.)盆栽实生苗为材料,试验干旱和复水对崖柏光合特性及水分利用效率的影响。结果显示,在自然干旱处理过程中,叶片相对含水量(LRWC)在土壤相对含水量(SRWC)降至30%之后开始出现下降;净光合速率(P_n)、蒸腾速率(T_r)、胞间CO₂浓度(C_i)、光饱和点(LSP)和最大光合速率(P_max)随着土壤可利用水分的减少而逐渐降低;而表观量子效率(Q)、表观量子需要量(1/Q)及光补偿点(LCP)未发生明显变化;水分利用效率(WUE)则随着SRWC的下降而逐渐提高。在停止浇水50 d后(SRWC下降约95%),叶片萎蔫,净光合速率接近零,复水后3 d,净光合速率(P_n)恢复至对照的88.59%,WUE降至对照的88.63%。通过干旱-复水一系列生理指标的变化分析认为,崖柏为干旱避免型植物。     

冷暴露对中缅树鼩适应性产热特征的影响

在冷暴露(5 ± 1℃)1 d,7 d,14 d 和21d 对中缅树鼩的肝脏、心脏、膈肌、腓肠肌和褐色脂肪组织(BAT)的总蛋白和线粒体蛋白含量、线粒体的状态Ⅳ呼吸能力、细胞色素C 氧化酶活力及血清中甲状腺激素的水平等指标进行了测定。结果表明:冷暴露过程中肝脏线粒体蛋白含量对低温的反应比总蛋白的反应剧烈,心脏和BAT 组织的线粒体蛋白含量也随着冷驯化时间的延长而显著增加,但腓肠肌的反应较为温和;各组织线粒体的状态Ⅳ呼吸能力均显著增强,除腓肠肌外其它各组织细胞色素C 氧化酶活性也随冷暴露时间的延长而急剧增加。说明在低温条件下,肝脏、腓肠肌、心脏和BAT 等组织都参与了体温调节的过程,在自然生境中,低温是重要的刺激产热的调节因子。     

气相色谱法测定抗毒素中的间甲酚含量

采用气相色谱法测定抗毒素中的间甲酚含量。样品用苯甲醇作内标,经高氯酸沉淀蛋白、氯仿抽提后,通过HP-INNO-WAX柱,以氢火焰检测器测定间甲酚含量。内标峰与样品峰的分离度大于1.5,平均回收率及变异系数分别为100.067%和1.93%,测定线性范围0.0202~1.7588mg/ml,最小检测限为0.01272mg/ml,该方法准确快速,比化学方法好。     

医药价格改革对城市公立医院经济运营效率的影响

目的 了解城市公立医院医药价格综合改革政策对医院经济运营效率的影响程度,为评价和进一步深化公立医院综合改革提供数据支持。方法 利用Excel2007 和SPSS13.0软件,从经济运营效率角度对医院改革前后半年数据进行描述性统计分析。结果 医药价格综合改革对医院就诊人次、业务收入、住院患者均次费用影响不大,对医院业务收入结构、收支结余结构、门诊患者均次费用、患者费用负担影响重大。结论 此次价改的调整医院业务收入结构、减轻住院患者就医负担的目的已初见成效,而对减轻门诊患者就医负担和医院政策性亏损补偿考虑不足。从医院目前经济运营效率看,此次价改不利于医院长远发展,亟待政府出台相关补偿政策,弥补公立医院政策性亏损。