一种新的人端粒相关锌指蛋白cDNA的克隆及鉴定

为了从早期胚胎寻找与发育分化有关的新基因,本文构建了3周龄人胚cDNA文库,并应用EST技术对该文库中随机挑选的47个低丰度克隆进行测序,结果发现了一个与人亚端粒DNA和锌指基因同源的cDNA克隆(L30),该基因长约3.8kb,5＇端序列有明显的阅读框架(ORF),3＇端序列有加尾信号(AAUAGA)和有39个A组成的Poly(A)尾巴;通过Northern杂交确认在早期人胚胎中有表达,应用地高辛染色体原位杂交技术将其定位于人第12号染色体长臂端部.     

用改进的DDRT-PCR技术进行人胚差异基因筛选

介绍一种从不同类型细胞或不同生长状态细胞中分离差异表达基因的快速高效mRNA差异显示技术,其特点是利用Ready-To-Go RT-PCR反应珠和Ready-To-Go RAPD分析珠进行mRNA差异显示分析,使取样步骤降至最低程度,减少了潜在的取样误差和外源DNA污染,并确保每次反应的高度重复性.通过银染测序胶分析差异显示的cDNA带,便于DNA回收和进一步克隆.用此方法分析人胚发育早期不同阶段基因的差异表达,选用6条随机引物对3、4和5周龄人胚进行mRNA差异显示分析,从2 000多条带中共分离出14个差异产物,经二次扩增及反向RNA印迹确证其中6个片段为发育不同阶段差异表达基因.     

从人早期胚胎中克隆组织型纤溶酶原激活因子基因cDNA

人在早期胚胎时ｔＰＡ基因表达,但ｍＲＮＡ丰度很低。以１７日龄人胚胎为材料,分离ｍＲＮＡ,以表达质粒ｐＳＰＯＲＴ１为载体,建立ｃＤＮＡ文库,重组子达到１．６×１０６个,能包含极低表达基因的ＣＤＮＡ。从人血白细胞基因组中扩增出一条１７５ｂｐ的ｔＰＡ外显子片段作探针,用地高辛标记进行菌落原位杂交,获得六个阳性菌落。提取阳性菌落质粒,经限制性内切酶Ｓａｌ　Ⅰ和ＥｃｏＲⅠ酶切分析鉴定,得到３个ｔＰＡｃＤＮＡ重组子。     

海南蛛毛苣苔属一新种

Species P.swinhoii(Hance)Burtt affinis,sed foliis margine obtuse dentatibus,cymis umbelliformibus axillaribus,corollils lilacino—albis,lobis corollarum longioribus,capsulis brevioribus tantum 0.8-1.5 cm longis differt．     

利用荧光分光光度计定量分析GFP基因的表达水平

以3种表达水分高低不一的绿色组织特异性启动子驱动绿色光蛋白（green fluorescent protein,GFP）基因转化烟草植株,设计了一种利用荧光分光光度计对组织中GFP的表达水平进行定量分析的新方法,利用该方法对获得的102株转基因烟草中不同部位叶片中的GFP表达水平进行了定量分析.其结果与荧光显微镜观察结果高度一致,从而证实利用这种新方法对GFP基因进行定量分析是可行的。     

基于最小数据集的青藏高原南北部不同土地利用方式土壤质量评价

为了评估青藏高原南北部林地、草地和农地的土壤质量状况，明确3种土地利用方式下生产力水平的关键影响因子，在青藏高原南部和北部采集了101个(0～30 cm)土壤样品测定土壤理化性质，通过主成分分析选择3个指标作为最小数据集(MDS),综合评估青藏高原南北部土壤质量。结果表明：3种土地利用方式下土壤理化特性在青藏高原南、北部差异显著。北部土壤有机质(SOM)、全氮(TN)、速效磷(AP)、速效钾(AK)含量均高于南部，且南北部的林地SOM、TN含量均显著高于农地和草地。土壤铵态氮(NH₄⁺-N)含量表现为农地>林地>草地，且在南部差异显著，而南北部硝态氮(NO₃^--N)含量均表现为林地最高。农地的土壤容重(BD)和电导率(EC)显著高于草地和林地，且北部农地和草地的BD和EC高于南部。南部草地pH显著高于林地和农地，北部林地pH最高。北部土壤质量选取指标为SOM、AP和pH,林地、草地和农地的土壤质量指数依次为0.56、0.53和0.47;南部选取指标为SOM、全磷(TP)和NH_4...