转金属硫蛋白αα突变体基因的矮牵牛对铅的抗性及积累的研究

利用农杆菌介导的方法将MT及αα基因导入矮牵牛中.转基因植株对铅(Pb)的抗性及吸收能力明显高于对照.转MT及αα基因的植株分别能在150及200 μmol/L Pb中正常生长，而对照只能在50 μmol/L Pb中正常生长.转MT及αα基因植株后代种子萌发与对照相比表现出明显的抗Pb优势.Pb的吸收实验表明转MT、αα基因的植株对Pb的吸收分别比对照提高了28%和35%.     

溶磷真菌ATMT转化条件优化及其对矮牵牛的促生效果评价

【目的】建立和优化一株溶磷真菌咖啡果小蠹青霉菌Penicilliumbrocae的转化体系,并利用分子标记观察其在根部的定殖;检测接种咖啡果小蠹青霉菌对植物的促生作用,为菌肥的研发奠定基础。【方法】利用农杆菌介导的转化体系(Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation,ATMT)获得转化子并优化转化条件,结合插入片段携带的分子标记进行转化子验证和根部定殖研究,同时利用TAIL-PCR(thermalasymmetricinterlaced-PCR)锚定插入位点序列信息;通过矮牵牛盆栽实验,设置T1(10mL水)、T2(10g/L磷矿粉,10mL)、T3(106个/mL孢子,10 mL)和T4 (10 g/L磷矿粉+106个/mL孢子,10mL)4个处理,探究P.brocae对植物的促生作用。【结果】利用优化后的ATMT体系可获得44个转化子/106个孢子,通过标记基因hyg和gfp的克隆以及GFP荧光观察和GUS染色结果验证了转化子,并利用GUS标记观察到了菌株在矮牵牛根部的定殖情况;利用TAIL-PCR克隆了一株溶磷能力有较显著降低的转化子上插入位点一端的侧翼序列,并确定了插入位点的位置;T4处理组鲜重较T1、T2和T3差异显著(P≤0.05),且分别高出35.4%、35.6%和21.4%,T1、T2和T3相互之间无显著差异。T4处理组干重较T1、T2以及T3也有显著差异(P≤0.05),且分别高出25.1%、37.8%和26.0%,T1、T2和T3之间亦无显著差异。【结论】本研究优化了P. brocae的ATMT体系并观察到了转化子在矮牵牛根表的定殖;磷矿粉和P.brocae孢子共施能够显著促进矮牵牛幼苗的生长,但二者分别单独施用则无此效果,推测在二者共施情况下P. brocae可能提高了磷矿粉的肥效。     

矮牵牛(Petunia hybrida)开花过程中的可溶性蛋白质分析

在进行矮牵牛(Petunia hybrida)光周期诱导开花的过程中,对叶子中的可溶性蛋白质进行了分析,其中有4条与开花有关的特异蛋白,分子量分别为49.45 kD(a)、35.45 kD(b)、17.98 kD(c)和11.74 kD(d).在不开放的花苞中不含有蛋白质a和d,只有这4种蛋白质全出现时,才能形成花苞并且开放.花开了以后,蛋白质c和d就消失.即使在开花的植株中,各组织中的蛋白质也是不同的.茎中完全不含有蛋白质c和d,叶子和花中的蛋白质组成也是不同的.     

矮牵牛育种研究进展

从常规育种、基因工程育种、体细胞育种和单倍体育种4个方面评述了矮牵牛(Petunia hybrida Vilm.)育种研究进展。国外对矮牵牛育种研究较多,新品种面世推陈出新,国内对其研究则较为薄弱。其常规育种最为成功,不断有新品种推出,基因工程育种也取得了一定成就,已有新品种面世,而体细胞育种及单倍体育种尚无新品种产生,但对这两种方法在育种上应用的可能性和前景作出了一定探索。     

观赏花卉矮牵牛与野生牵牛花的染色体核型比较

对矮牵牛(Petunia hybrida)和牵牛(Ipomoea nil)的根尖细胞染色体作了计数,并讨论了有关细胞学和分类学问题。结果表明,牵牛花的核型公式为2n=2x=30=20m(2SAT) 8sm 2t,属于“2B”型, 在第1号染色体上有1对随体;矮牵牛的核型公式为2n=2x=14=10m 4sm,属于“2B”型,全套染色体上均无随体。二者在染色体水平上无亲缘关系。     

转金属硫蛋白aa突变体基因的矮牵牛对铅的抗性及积累的研究

利用农杆菌介导的方法将MT及aa基因导入矮牵牛中,转基因植株对铅（Pb）的抗性及吸收能力明显于对照,转MT及aa基因的植株分别能在150及200μmol/L Pb中正常生长,而对照只能在50mol/L Pb中正常生长,转MT及aa基因植株后代种子萌发与对照相比表现出明显的抗Pb优势,Pb的吸收实验表明转MT、aa基因的植株对Pb的吸收分别比对照提高了28％和35％。     

一种新型矮牵牛花发育突变体的研究

报道了新发现的一种矮牵牛(Petunia hybrida L.)花发育突变体,命名为efficient(eff),并对这一突变体进行了形态学和遗传学分析。eff突变体主要表现为雌蕊心皮数目的增加和雄蕊上长出花瓣状结构,同时,雄蕊、花瓣和萼片数亦有增多,但营养器官无变化。心皮数目的增加导致雌蕊柱头和子房体积的显著增大,并形成较大的果实。雄蕊上花瓣的形成对花粉的产生无明显影响。扫描电镜观察发现,eff突变体在花器官原基形成时发生了相应数目的增加及特征的变化。遗传学分析表明,突变的表现型符合孟德尔单基因遗传规律。     

查尔酮异构酶基因的克隆序列分析及在大肠杆菌中的表达

从矮牵牛(Petunia hybrida Vilm.)花瓣的cDNA中克隆了查尔酮异构酶(chalcone isomerase,CHI)的基因chi-a,进行了序列分析。结果表明,chi-a基因全长726 bp,编码241个氨基酸。并在大肠杆菌中表达了chi-a基因,对来源于不同植物种的CHI进行了同源性比较分析。